ВВЕДЕНИЕ. Разработка универсальных противогриппозных вакцин на основе консервативных антигенов вируса гриппа представляет собой перспективную стратегию для предотвращения пандемий гриппа. Рекомбинантные вакцины на основе аденовирусных векторов обладают высоким противовирусным потенциалом и доказали свою эффективность в период пандемии COVID-19. В связи с этим представляется актуальной разработка и клиническая оценка векторной вакцины против гриппа А.
ЦЕЛЬ. Изучение безопасности, реактогенности и иммуногенности векторной вакцины широкого спектра действия против гриппа А при однократном интраназальном введении у здоровых добровольцев.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. В исследовании использовали векторную вакцину против гриппа А на основе рекомбинантных аденовирусов человека 5 серотипа ГамФлюВак (ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России). В клиническом исследовании принимали участие 36 добровольцев. Период наблюдения составлял 28 сут. Оценку безопасности проводили на основании данных о частоте, характере и степени тяжести нежелательных явлений (НЯ) при однократном интраназальном введении векторной вакцины в дозах (по количеству вирусных частиц): 2,5×10¹⁰ ( группа 1 ), 1 ,0×10¹¹ (группа 2) и 2,5×10¹¹ (группа 3). Для изучения иммуногенности определяли уровень IgG антител к вирусу гриппа А (H5N2) в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа на 0 и 28 сут исследования.
РЕЗУЛЬТАТЫ. В ходе проведения исследования серьезных нежелательных явлений и НЯ тяжелой степени не было зарегистрировано. Наиболее часто НЯ, связанные с исследуемым препаратом, проявлялись со стороны дыхательной системы, крови, а также в виде общих расстройств (повышение температуры тела, головная боль, озноб, недомогание, артралгия, миалгия). Оценка НЯ категории общих расстройств и нарушений в месте введения вакцины показала, что различия в частотах возникновения НЯ при сравнении групп 1 (0%), 2 (16,7%) и 3 (33,3%) были статистически значимыми (p=0,0285). В группе 3 через 28 сут выявлено максимальное увеличение среднего геометрического значения титров специфических IgG антител — в 2,8 раза. Показатель частоты сероконверсии в 2 и более раза составил 100%, в 4 и более раза — 41,7%.

ВЫВОДЫ. В клиническом исследовании I фазы векторной вакцины против гриппа А ГамФлюВак при однократном интраназальном введении продемонстрирована иммуногенность и благоприятный профиль безопасности вакцины.

ВВЕДЕНИЕ. Применяемые в настоящее время вакцины, содержащие бесклеточный или цельноклеточный коклюшный компонент, не обеспечивают стерильность иммунитета и его необходимую продолжительность, не предотвращают передачу возбудителя и распространение инфекции. Ранее живая вакцина интраназального применения для профилактики коклюша ГамЖВК прошла необходимые доклинические исследования и клиническое исследование, в котором была определена оптимальная доза для однократной вакцинации.

ЦЕЛЬ. Оптимизация метода и схемы введения ГамЖВК, живой вакцины интраназального применения для профилактики коклюша, по показателям иммуногенности в клиническом исследовании у здоровых взрослых добровольцев от 18 до 40 лет.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. В слепом рандомизированном плацебо-контролируемом исследовании приняли участие 50 здоровых взрослых добровольцев, распределенных в 2 группы по методу введения ГамЖВK — капельно и распылением. Проведена оценка эффективности двух схем введения — однократно и двукратно с интервалом 60 сут. Для анализа использовали аспираты из носо- и ротоглотки, образцы сыворотки крови и мононуклеаров периферической крови добровольцев. Уровень специфических IgM-, IgA-, IgG-антител в сыворотке крови и секреторного IgA в аспиратах детектировали методом ИФА, титр агглютинации — в реакции агглютинации (РА). Количественное определение ДНК Bordetella pertussis в аспиратах проводили с помощью ПЦР в реальном времени. Клеточный иммунный ответ оценивали по синтезу цитокинов IFN-γ и IL-17 мононуклеарами периферической крови.

РЕЗУЛЬТАТЫ. Вакцинация добровольцев ГамЖВК сопровождалась продукцией специфических антител класса IgG и IgА в сыворотке крови и секреторных IgА в аспиратах, увеличением титра общих противококлюшных антител в РА после однократного и двукратного введения независимо от способа введения. При повторном введении ГамЖВК наблюдался выраженный бустерный эффект в виде увеличения титра антител всех классов начиная с 14 сут. Повторное введение вакцины приводило к укорочению времени элиминации бактерий B. pertussis в сравнении с первым введением (c 28 до 14 сут). Не выявлено достоверных отличий в динамике и значениях измеренных показателей при использовании распыления и капельного интраназального введения вакцины.

ВЫВОДЫ. Интраназальная иммунизация препаратом ГамЖВК способствует формированию выраженного гуморального и клеточного иммунного ответа, а также мукозального иммунитета в отношении коклюшной инфекции у взрослых добровольцев. Рекомендован капельный метод введения ГамЖВК. Сокращение времени элиминации бактерий после повторного введения свидетельствует о проявлении стерильного иммунитета, индуцированного первой вакцинацией, что в итоге может привести к снижению передачи инфекции в популяции.

ВВЕДЕНИЕ. Ветряная оспа является высоко контагиозным вирусным заболеванием, поражающим преимущественно детей дошкольного возраста. В мире зарегистрированы несколько вакцин для профилактики ветряной оспы, которые обладают различными профилями безопасности и эффективности, при этом охват вакцинацией остается недостаточным. Есть нерешенные вопросы, связанные с долгосрочной эффективностью вакцин и возникновением нежелательных эффектов, что подчеркивает необходимость продолжения мониторинга и развития программы иммунизации.

ЦЕЛЬ. Обобщение зарубежного и российского опыта изучения эффективности и безопасности вакцин   против   ветряной   оспы   для   совершенствования   и   оптимизации   подходов в иммунизации.

ОБСУЖДЕНИЕ. Проанализированы сведения о разработке вакцин для профилактики ветряной оспы, опыт клинических исследований и изучения параметров эффективности и безопасности в условиях контролируемых клинических исследований и реальной клинической практики. Большая часть зарегистрированных в мире вакцин производится с использованием оригинального штамма Оkа вируса ветряной оспы (Varicella zoster), при этом южнокорейским предприятием выпускается вакцина на основе собственного штамма MAV/06. Вакцинные препараты производства Бельгии,   США,   КНР   и   Республики   Корея для профилактики ветряной оспы продемонстрировали сопоставимые показатели иммуногенности, профилактической эффективности и безопасности. Поскольку региональные программы иммунизации позволили существенно снизить заболеваемость и осложнения, в обозримом будущем предполагается включение вакцинации против ветряной оспы в национальный календарь профилактических прививок Российской Федерации. В целях реализации национальной программы иммунизации могут применяться вакцины, изученные надлежащим образом.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Анализ российского и зарубежного опыта изучения эффективности и безопасности вакцин против ветряной оспы продемонстрировал, что живые аттенуированные вакцины характеризуются сопоставимыми показателями эффективности и иммуногенности, благоприятным профилем безопасности и могут быть использованы для развития национальной программы иммунизации в Российской Федерации.

ВВЕДЕНИЕ. Случаи заболевания столбняком ежегодно регистрируются в различных странах мира, главным образом среди невакцинированных или частично вакцинированных лиц. Анализ случаев заболевания столбняком и выявление причин отсутствия вакцинации, включая отказы от ее проведения, имеют большое значение для привлечения внимания специалистов системы здравоохранения к данной проблеме.

ЦЕЛЬ. Обзор клинических случаев столбняка у непривитых или частично привитых лиц, анализ причин отсутствия вакцинации и выявление проблем, связанных с профилактической вакцинацией от данного заболевания.

ОБСУЖДЕНИЕ. Анализ эпидемиологических данных показал, что случаи заболеваемости столбняком ежегодно фиксируют практически во всех странах мира. В 2023 г. в мире было зарегистрировано 21830 случаев столбняка (по данным ВОЗ), в Российской Федерации — 8 случаев. Основной проблемой при диагностике столбняка является отсутствие надежных методов лабораторного подтверждения диагноза. Специфическая терапия с применением лошадиной противостолбнячной сыворотки сопряжена с рисками развития аллергических реакций. Несмотря на то что столбняк традиционно считается инфекцией, которая может развиваться в случаях появления глубоких и загрязненных почвой ран, у непривитых или частично привитых лиц даже незначительные травмы могут привести к развитию инфекции. Проведен анализ клинических случаев столбняка (13 случаев), развившегося у невакцинированных или частично вакцинированных лиц вследствие незначительных травм или травм, ограниченно загрязненных почвой. В описанных случаях все заболевшие дети не были вакцинированы из-за религиозных и/или личных мотивов родителей. Анализ клинических случаев у взрослых выявил, что заболевание развивалось из-за небрежного отношения к травме и несвоевременного обращения за медицинской помощью.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Проблема заболеваемости столбняком связана с недостаточной информированностью населения об опасности заболевания и ростом числа противников вакцинации. Необходимо активное взаимодействие специалистов системы здравоохранения, представителей общественных организаций и религиозных общин с целью улучшения пропаганды вакцинации и санитарно-просветительской работы, что позволит повысить доверие населения  вакцинопрофилактике, увеличит охват профилактическими прививками и снизит риски инфицирования столбняком.

ВВЕДЕНИЕ. Основным методом лечения ботулизма в настоящее время является применение антитоксина ботулинического, однако использование данного препарата вызывает ряд побочных эффектов, включая аллергические реакции. Перспективным направлением для лечения интоксикации ботулиническим токсином представляется разработка препаратов на основе моноклональных антител, а именно однодоменных, модифицированных Fc-фрагментом IgG1 человека.

ЦЕЛЬ. Оптимизация лабораторной технологии получения и доклинические исследования эффективности препарата на основе однодоменного антитела, модифицированного Fc-фрагментом IgG1 человека (B11-Fc), для терапии и экстренной профилактики ботулизма.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Для культивирования использовали клеточную линию CHO. Культивирование стабильного клона-продуцента В7 осуществляли в колбах Эрленмейера с использованием коммерчески доступных сред и подпиток. Для очистки препарата однодоменного антитела B11-Fc использовали многоступенчатую хроматографическую очистку (аффинная, анионообменная и мультимодальная), вирусную очистку и тангенциальную фильтрацию. Степень чистоты препарата оценивали с помощью ВЭЖХ и электрофореза. Гликановый профиль устанавливали с применением ВЭЖХ. Определение концентрации антител в культуральной жидкости, а также оценку равновесных констант диссоциации антитела с различными Fc-рецепторами проводили с использованием метода биослойной интерферометрии. Ботулинический токсин типа А (BoNT/A) получали путем культивирования штамма Clostridium botulinum А98 и дальнейшей хроматографической очистки токсина. Экспериментальные исследования in vivo проводили на мышах-самках линии BALB/c. BoNT/A вводили внутрибрюшинно (в/б) или внутрижелудочно (в/ж), оценивали тяжесть токсических признаков. Препарат антител вводили внутримышечно (в/м) или внутривенно (при исследовании фармакокинетики). Проводили изучение эффективности препарата антител (по показателю выживаемости мышей) на различных моделях интоксикации и в разных режимах применения.

РЕЗУЛЬТАТЫ. Проведена оптимизация условий культивирования клона-продуцента антитела B11-Fc. Разработанная технология очистки антитела B11-Fc обеспечивала высокий выход антитела (0,5 г/л) с чистотой более 99%. Средний диаметр частиц в препарате — 7,85 нм. Проведена характеристика гликанового профиля препарата. Определены равновесные константы диссоциации антитела B11-Fc с различными Fc-рецепторами человека. Проведено моделирование интоксикации BoNT/A на мышах. Введение (в/м) препарата антител B11-Fc в дозе 0,6 мг/кг обеспечивало 100% протективный эффект при одновременном в/б введении BoNT/A в дозе 20 LD₅₀. Определены основные фармакокинетические параметры антитела B11-Fc. Продемонстрирована защитная эффективность препарата в профилактическом режиме применения — в течение 21 сут при в/б введении 5 LD₅₀ токсина. В терапевтическом режиме применения через 14 ч после в/ж введения токсина в дозе 12000 LD₅₀ (для в/б введения) антитело обеспечивало 100% защитный эффект.

ВЫВОДЫ. Проведена оптимизация лабораторной технологии получения кандидатного препарата на основе модифицированных однодоменных антител B11-Fc. В экспериментах in vivo на модели интоксикации ботулиническим токсином мышей показана высокая эффективность препарата для терапии и профилактики ботулизма. Полученные данные доклинических исследований позволили перейти к проведению фазы I клинических исследований на здоровых добровольцах.

ВВЕДЕНИЕ. Совершенствование технологий производства, расширение спектра биологических лекарственных препаратов (БЛП) и показаний к их применению обусловливают необходимость формирования единого подхода к их стандартизации в рамках как Государственной фармакопеи Российской Федерации (ГФ РФ), так и региональной фармакопеи — Фармакопеи Евразийского экономического союза (Фармакопея Союза). В условиях единого фармацевтического рынка стран Евразийского экономического союза (ЕАЭС) требования к лекарственным препаратам должны учитывать национальные фармакопейные стандарты качества, которые, в свою очередь, подвергаются пересмотру с целью гармонизации с Фармакопеей Союза.

ЦЕЛЬ. Систематизация требований к биологическим лекарственным препаратам в рамках Фармакопеи Союза и Государственной фармакопеи Российской Федерации для гармонизации региональных и национальных стандартов.

ОБСУЖДЕНИЕ. Проведен анализ особенностей стандартизации БЛП в фармакопеях государств — членов ЕАЭС, а также требований ведущих мировых фармакопей и международных нормативных документов, в том числе Международного совета по гармонизации технических требований к лекарственным средствам для медицинского применения (ICH). Установлены основные принципы формирования требований к БЛП в рамках Фармакопеи Союза и подготовлен проект  фармакопейной статьи (ОФС) «Биологические лекарственные препараты». В данной ОФС унифицировано определение понятия «биологические лекарственные препараты» с учетом региональных и российских законодательных актов; проведена фармакопейная стандартизации требований к различным группам БЛП; выделены основные аспекты, требующие рассмотрения в рамках производства (технологии), контроля качества промежуточных продуктов и лекарственного препарата. В процессе гармонизации ГФ РФ с требованиями Фармакопеи Союза представлены основные подходы к стандартизации БЛП в ГФ РФ и внесены изменения в ОФС.1.7.1.0010.18 «Биологические лекарственные препараты», в том числе в части исключения требований к производству, которые не являются общими для всех БЛП, а также исключения перечня испытаний фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Систематизированы требования к БЛП с учетом мировых и региональных нормативных документов. Подготовлен проект ОФС «Биологические лекарственные препараты» для Фармакопеи Союза и на его основе актуализирована ОФС.1.7.1.0010.18 «Биологические лекарственные препараты». Обоснованы подходы к формированию фармакопейных статей и общих фармакопейных статей, касающихся требований к различным группам БЛП.

ВВЕДЕНИЕ.   Современные   комбинированные   АКДС-вакцины    представлены    четырех-, пятии шестивалентными препаратами, содержащими инактивированные полиомиелитные и гемофильные компоненты, а также вакцинные компоненты против гепатита В. Несмотря на широкое внедрение этих вакцин в национальные программы вакцинации, остаются проблемные вопросы, связанные с иммуногенностью и безопасностью коклюшного компонента, стандартизацией производства и методов контроля качества АКДС-вакцин, а также с включением этих вакцин в национальные календари профилактических прививок.

ЦЕЛЬ. Обзор состояния комбинированных вакцин на основе АКДС, анализ актуальных проблем, связанных с применением и совершенствованием их качества.

ОБСУЖДЕНИЕ. АКДС-вакцина занимает центральное положение в национальных календарях профилактических прививок. Разработки   многочисленных   безопасных   и   эффективных АКДС-вакцин способствовали созданию комбинированных препаратов для вакцинации младенцев. Добавление инактивированных вакцин от полиомиелита, гемофильной инфекции и гепатита B благоприятствовало внедрению комбинированных вакцин в рекомендуемые графики иммунизации и позволило сократить количество инъекций, получаемых ребенком. Вакцины на основе АКДС от разных производителей отличаются по составу и количественному содержанию антигенов, а также по применяемым методам контроля их качества. Основные различия состава вакцин обусловлены содержанием цельноклеточного или бесклеточного коклюшных компонентов. В настоящее время повышение заболеваемости коклюшем в мире связывают с широким применением бесклеточной вакцины, которая не обеспечивает формирование долговременного иммунитета. В обзоре рассмотрены вопросы взаимного влияния антигенов на эффективность и безопасность вакцины, стандартизации производства и контроля качества антигенов. Проанализированы данные о различных комбинациях вакцин на основе АКДС и количественном содержании антигенов. Предложены перспективные направления разработок по повышению качества и эффективности рассматриваемой группы вакцин.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Достижение высокого уровня специфической активности и безопасности комбинированных вакцин на основе АКДС возможно прежде всего при решении проблем в области стандартизации производства и контроля качества, принимая во внимание ограничения международного обмена вакцинными препаратами и особенности их лицензирования.

ВВЕДЕНИЕ. Высокие требования к качеству стерильной воды для инъекций (СВДИ) диктуются необходимостью гарантировать безопасность и эффективность применения инъекционных лекарственных средств и прежде всего биологических лекарственных препаратов, поскольку присутствие в растворителе примесей, главным образом микробных контаминантов, эндотоксинов или тяжелых металлов, может вызывать серьезные побочные эффекты. Определение наиболее перспективных подходов к оценке качества воды для инъекций при разработке нормативных требований в регуляторной системе Евразийского экономического союза (ЕАЭС) представляется актуальной задачей.

ЦЕЛЬ. Анализ основных трендов в оценке качества растворителя лекарственных средств — воды для инъекций.

ОБСУЖДЕНИЕ. Проведен сравнительный ретроспективный анализ требований к оценке качества воды для инъекций ведущих фармакопей мира, в том числе Государственной фармакопеи Российской Федерации, Фармакопеи США, Японской, Европейской, Британской, Индийской и Китайской фармакопей, а также анализ рекомендаций ICH и Фармакопейной дискуссионной группы. Показано, что в последнее десятилетие подход зарубежных фармакопей к контролю органических и неорганических примесей в воде для инъекций претерпел значительные изменения в отношении как аналитических методов, так и количества тестов. Отмечено, что в Европейской фармакопее в 2024 г. произошли наиболее значительные изменения в отношении оценки качества готовой лекарственной формы СВДИ. Рассмотрена возможность оптимизации процедуры контроля за счет сокращения и замены десяти качественных методов анализа неорганических примесей на количественное измерение электропроводности. Описаны данные, касающиеся замены теста на наличие органических примесей на количественный метод анализа показателя «Общий органический углерод». Представлен анализ результатов испытательного центра ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России по контролю 148 серий готовой лекарственной формы СВДИ, выпускаемой в комплекте с биологическими лекарственными препаратами 38 российских и зарубежных производителей.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Обновленные требования к оценке качества воды для инъекций и стерильной воды для инъекций, принятые в действующем издании Европейской фармакопеи (07/2024:0169), могут быть использованы при подготовке соответствующего стандарта в рамках фармакопеи стран ЕАЭС, а также для актуализации фармакопейной статьи «Вода для инъекций» Государственной фармакопеи Российской Федерации. Это будет способствовать оптимизации процедур оценки качества, повышению скорости и точности анализа, снижению финансовых и трудовых затрат, что обеспечит повышение качества как растворителя, так и лекарственных препаратов, в комплекте с которыми он выпускается. Введение в действие этих требований будет содействовать гармонизации фармакопейных требований, обеспечивая установление единых критериев оценки качества воды для инъекций как для российских, так и для зарубежных производителей, что позволит уменьшить регуляторные барьеры и облегчит выход готовой формы растворителя на международные рынки.

ВВЕДЕНИЕ. Цельноклеточная коклюшная вакцина (ЦКВ) обладает высокой эффективностью, однако побочное действие (повышение температуры, отечность в месте введения, аллергические реакции, фебрильные судороги) ограничивает ее широкое использование. Актуальными являются исследования, направленные на снижение токсических свойств ЦКВ.

ЦЕЛЬ. Оценка токсических свойств цельноклеточной коклюшной вакцины в экспериментах на мышах при изменении условий в процессе хранения вакцины.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Использовали штаммы Bordetella pertussis — производственные штаммы, а также циркулирующие штаммы, выделенные от больных коклюшем детей. Десять образцов ЦКВ готовили путем проведения смыва выращенной бактериальной культуры и внесения в суспензию формальдегида (инактивирующий агент) и тиомерсала (консервант). Использовали аутбредных мышей, которых распределяли в 10 опытных групп и 1 контрольную, содержащих по 10 животных каждая. Мышам опытных групп внутрибрюшинно вводили образцы ЦКВ, мышам контрольной группы — 0,9% раствор натрия хлорида с тиомерсалом. Проводили взвешивание мышей до введения препарата, а также на 1 и 7 сут после введения. Сроки взвешивания животных обусловлены сроками максимального проявления действия основных токсинов B. pertussis — липоолигосахарида (на 1 сут) и коклюшного токсина (на 7 сут). Определяли значения показателя специфической безопасности образцов ЦКВ на протяжении срока хранения вакцины (12 мес.) как отношение прироста массы тела мышей группы опытных животных к приросту массы тела контрольных животных, выраженное в процентах.

РЕЗУЛЬТАТЫ. Введение животным коклюшной суспензии после ее выдерживания с инактивирующим агентом в условиях хранения в течение 1–3 мес. приводило к снижению массы тела мышей на (-2,84%) относительно исходного веса на 1 сут после введения вакцины, а в случае коклюшной суспензии, инактивированной в течение 10–12 мес., снижение массы тела составило (-1,62%). Установлено, что при введении коклюшной суспензии, выдержанной с инактивирующим агентом в течение 1–3 мес., прирост массы тела мышей через 7 сут после введения вакцины составил 31,0% по отношению к исходному весу, а показатель специфической безопасности — 69,38%. В случае коклюшной суспензии, инактивированной в течение 10–12 мес., прирост массы тела составлял 43,22%, а показатель специфической безопасности — 84,31%. Это указывает на снижение остаточной токсичности вакцины через 12 мес., а также на то, что процесс обезвреживания коклюшного токсина носит пролонгированный характер и продолжается на протяжении всего срока хранения вакцины. Величина коэффициента корреляции Спирмена, характеризующая силу связи между значениями специфической безопасности и приростом массы тела мышей, составила: на 7 сут — 0,55 (р<0,01), что указывает на заметную силу связи между изучаемыми показателями; на 1 сут — 0,349 (р<0,01), что свидетельствует об умеренной силе связи.

ВЫВОДЫ. Полученные результаты продемонстрировали более полную детоксикацию коклюшного токсина в образцах вакцин, выдержанных с инактивирующим агентом не менее 10–12 мес. в условиях хранения. Для повышения безопасности АКДС-вакцины целесообразно использовать серии ЦКВ после 10–12 мес. хранения в регламентированных условиях.