Изучение биологической и генетической стабильности штамма № 205 вируса клещевого энцефалита, применяемого для производства вакцин клещевого энцефалита ЭнцеВир, ЭнцеВир Нео детский

Представлены результаты многолетнего изучения биологической и генетической стабильности штамма № 205 вируса клещевого энцефалита, используемого в ФГУП «НПО «Микроген» для производства культуральных инактивированных очищенных сорбированных вакцин клещевого энцефалита: ЭнцеВир (для вакцинации взрослых) и ЭнцеВир Нео детский (для вакцинации детей). Биологическую стабильность штамма № 205 изучали на этапах получения посевных серий вируса при пассажах на аутбредных белых мышах: исходный производственный штамм № 205, производственный «штаммовый запас». Лиофилизаты производственных посевных серий изучали на различных сроках хранения при температуре минус 20 °С (до 9 лет и более). Определяли показатели биологической активности (титры вируса клещевого энцефалита (КЭ) в lg LD₅₀/мл) при различных способах заражения аутбредных белых мышей, а также определяли подлинность (специфичность) штамма № 205 по отношению к эталонному в реакции биологической нейтрализации (РБН) в соответствии с требованиями фармакопейной статьи предприятия (ФСП) на вышеуказанные вакцины КЭ. Эти же материалы, а также одну из серий вакцины КЭ, полученной на основе производственного «штаммового запаса» вируса КЭ штамма № 205 (лиофилизат 1986 г.), изучали на сохранность генетической стабильности в процессе пассирования и длительного хранения методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) и секвенирования. Впервые показана биологическая и генетическая стабильность вируса КЭ, штамм № 205, в процессе производства вакцин КЭ.

клещевой энцефалит, вакцинация, производство вакцин клещевого энцефалита, биологическая и генетическая стабильность, подлинность в реакции биологической нейтрализации, пассажи через мозг аутбредных белых мышей, полимеразная цепная реакция, праймеры, секвенирование, tick-borne encephalitis, vaccination, production of tick-borne encephalitis vaccines, biological and genetic stability, identification in a biological neutralization assay, outbred white mouse brain passage, polymerase chain reaction, primers, sequencing

1. Воробьева МС, Меркулов ВА, Ладыженская ИП, Рукавишников АВ, Шевцов ВА. История создания и оценки качества современных вакцин КЭ отечественного и зарубежного производства. Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения 2013; (3): 40-4.

2. Barrett PN, Plotkin SA, Ehrlich HJ. Tick-borne encephalitis virus vaccines. In: Plotkin SA, Orenstein WA, Offit PA, eds. Vaccines. Philadelphia: Saunders Elsevier; 2008. P. 841-56.

3. Морозова ОВ. Проблемы и перспективы профилактики, диагностики и лечения клещевого энцефалита. Российский медицинский журнал 2014; 20(6): 26-31.

4. Pastorino BA, Peyrefitte CN, Grandadam M, Thill MC, Tolou HJ, Bessaud M. Mutagenesis analysis of the NS2B determinants of the Alkhurma virus NS2B-NS3 protease activation. J Gen Virol. 2006; 87: 3279-83.

5. Pöllabauer EM, Pavlova BG, Löw-Baselli A, Fritsch S, Prymula R, Angermayr R, et al. Comparison of immunogenicity and safety between two paediatric TBE vaccines. Vaccine 2010; 28(29): 4680-5.

6. Горбунов МА, Павлова ЛИ, Воробьева МС, Расщепкина МН, Стронин ОВ. Результаты клинических испытаний вакцины против клещевого энцефалита ЭнцеВир. Эпидемиология и вакцинопрофилактика 2002; (1): 64-8.

7. Романенко ВВ, Анкудинова АВ, Килячина АС. Эффективность программы массовой вакцинопрофилактики клещевого энцефалита в Свердловской области. Вестник УГМА 2010; (21): 125-32.

8. Воробьева МС, Расщепкина МН, Красильников ИВ, Мищенко ИА, Шарова ОИ, Рюмина ТА, Билалова ГП. Результаты лабораторных испытаний модифицированной вакцины против клещевого энцефалита «ЭнцеВир», производства ФГУП «ВИРИОН». В кн.: Актуальные вопросы разработки, производства и применения иммунобиологических и фармацевтических препаратов. Тезисы конференции, 2001. С. 8-11.

9. Котыков ИВ, Киселева НН, Федоров ЮВ Изучение популяции производственного штамма 205 вируса клещевого энцефалита. В кн.: Тезисы докладов Всесоюзного симпозиума «Современные проблемы эпидемиологии, диагностики и профилактики клещевого энцефалита», 1990. С. 71-2.

10. Holzmann H, Vorobyova MS, Ladyzhenskaya IP, Forenczi E, Kundi M, Kunz C, Heinz FX. Molecular epidemiology of tick-borne encephalitis virus: cross-protection between European and Far Eastern subtypes. Vaccine 1992; 10(5): 345-9.

11. ICH Guidance, Q5D: Derivation and Characterisation of Cell Substrates Used for Production of Biotechnological/Biological Products (63 FR 50244; September 21, 1998).

12. Андреев ЮЛ, Маева ТВ, Кедич ЛА, Золина ЕД, Куслий АГ. Физико-химическая и иммунологическая характеристика вакцины «Геп-а-ин-вак» при различных условиях хранения. Биопрепараты. Профилактика, диагностика, лечение 2008; (4): 26-8.

13. Ecker M, Allison SL, Meixner T, Heinz FX. Sequence analysis and genetic classification of tick-borne encephalitis viruses from Europe and Asia. J Gen Virol. 1999; 80(1): 179-85.

14. ICH Guidance, Q5A(R1): Viral Safety Evaluation of Biotechnology Products Derived from Cell Lines of Human or Animal Origin (63 FR 51074; September 24, 1998).

15. Akey DL, Brown WC, Dutta S, Konwerski J, Jose J, Jurkiw TJ, et al. Flavivirus NS1 structures reveal surfaces for associations with membranes and the immune system. Science 2014; 343(6173): 881-5.

16. Leung JY, Pijlman GP, Kondratieva N, Hyde J, Mackenzie JM, Khromykh AA. Role of nonstructural protein NS2A in flavivirus assembly. J Virol. 2008; 82(10): 4731-41.

17. Kofler RM, Heinz FX, Mandl CW. Capsid protein C of tick-borne encephalitis virus tolerates large internal deletions and is a favorable target for attenuation of virulence. J Virol. 2002; 76(7): 3534-43.

18. Mandl CW, Heinz FX, Stockl E, Kunz C. Genome sequence of tick-borne encephalitis virus (Western subtype) and comparative analysis of nonstructural proteins with other flaviviruses. Virology 1989; 173(1): 291-301.

19. Zent O, Bröker M. Tick-borne encephalitis vaccines: past and present. Expert Rev Vaccines 2005; 4(5): 747-55.