Оценка возможности применения иммунохроматографического метода для экспертизы качества вакцины чумной живой и аллергена туляремийного (Тулярина) по показателю «Подлинность»

Определение показателя качества «Подлинность», согласно требованиям нормативной документации на вакцину чумную живую и аллерген туляремийный жидкий (Тулярин), проводится иммунофлуоресцентным методом, однако серьезным недостатком метода является его трудоемкость. Альтернативным методом испытания данных препаратов является иммунохроматографический (ИХ) метод, обладающий рядом преимуществ, в том числе высокой скоростью проведения испытания и простотой учета результатов.

Цель работы: оценка возможности применения иммунохроматографического метода для экспертизы качества вакцины чумной живой и аллергена туляремийного (Тулярина) по показателю «Подлинность».

Материалы и методы: испытание показателя качества «Подлинность» проводили на образцах фармакопейного стандартного образца вакцины чумной живой и трех коммерческих серий вакцины; аллергена туляремийного жидкого (Тулярин) двух серий. Исследование показателя качества «Подлинность» препаратов ИХ методом проводили с помощью следующих наборов реагентов: ИХ тест-система для экспресс-выявления и идентификации микробных клеток Yersinia pestis «ИХ тест-система Y. pestis» и ИХ тест-система для экспресс-выявления и идентификации Francisella tularensis «ИХ тест-система F. tularensis» производства ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии».

Результаты: показано, что ИХ метод является эффективным экспресс-методом для видоспецифического подтверждения наличия Y. pestis в вакцине чумной живой и F. tularensis в аллергене туляремийном жидком (Тулярин). Установлена рекомендуемая концентрация вакцины чумной живой для проведения испытания по показателю «Подлинность» ИХ методом — 10⁹ м.к./мл. Испытание аллергена туляремийного жидкого (Тулярина) по показателю «Подлинность» ИХ методом рекомендовано проводить с использованием цельного препарата.

Выводы: полученные результаты могут служить основанием для внесения ИХ метода с использованием указанных наборов реагентов в нормативную документацию на вакцину чумную живую и на аллерген туляремийный жидкий (Тулярин) в качестве альтернативного метода определения показателя «Подлинность».

1. Онищенко ГГ, Кутырев ВВ, ред. Лабораторная диагностика опасных инфекционных болезней. Практическое руководство. М.: Шико; 2013. EDN: SHFBUN

2. Андрюков БГ, Ляпун ИН, Бынина МП, Матосова ЕВ. Упрощенные форматы современных биосенсоров: 60 лет использования иммунохроматографических тест-систем в лабораторной диагностике. Клиническая лабораторная диагностика. 2020;65(10):611–8. https://doi.org/10.18821/0869-2084-2020-65-10-611-618

3. Соловьев ПВ, Баранова ЕВ, Федюкина ГН. Разработка и опытно-экспериментальное производство иммунохроматографических тест-систем для выявления и идентификации B. anthracis, Y. pestis, F. tularensis и L. monocytogenes. В кн.: Материалы научно-практической конференции молодых ученых и специалистов научно-исследовательских учреждений Роспотребнадзора «Биологическая безопасность в современном мире». 21–22 апреля 2009 г. Оболенск, Протвино; 2009. С. 140–2. EDN: UATJPV

4. Белькова СА, Балахонов СВ, Бикетов СФ, Баранова ЕВ. Апробация иммунохроматографической тест-системы для экспресс-индикации возбудителя чумы. Журнал инфекционной патологии. 2009;16(3):69–70. EDN: SJLWMR

5. Chanteau S, Rahalison L, Ralafiarisoa L, Foulon J, Ratsitorahina M, Ratsifasoamanana L, et al. Development and testing of a rapid diagnostic test for bubonic and pneumonic plague. Lancet. 2003;361(9353):211–6. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(03)12270-2

6. Белькова СА, Балахонов СВ. Индикация капсульного антигена чумного микроба в суспензиях органов мелких млекопитающих с применением иммунохроматографической тест-системы. Дальневосточный журнал инфекционной патологии. 2014;(25):96–8. EDN: TAVIAL

7. Губарева ТИ, Уланова ГИ. Анализ эффективности применения методов лабораторного исследования на природно-очаговые инфекции. В кн.: Важнейшие вопросы инфекционных и паразитарных болезней. Шестой сборник научных работ. Ижевск; 2018. C. 26–8. EDN: YYQXRR

8. Холин АВ, Шаракшанов МБ, Вержуцкий ДБ, Корзун ВМ, Оргилбаяр Л, Ганхуяг Ц и др. Результаты эпизоотологического обследования приграничной с Россией части Хархира-Тургенского природного очага чумы Монголии в 2019 г. Проблемы особо опасных инфекций. 2020;(2):129–34. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2020-2-129-134

9. Еремкин АВ, Елагин ГД, Печенкин ДВ, Фоменков ОО, Богачева НВ, Кытманов АА и др. Разработка иммуноферментной и иммунохроматографической моноклональных тест-систем для выявления возбудителя туляремии. Клиническая лабораторная диагностика. 2016;61(3):184–7. EDN: VXLOFZ

10. Кретенчук О.Ф. Отечественные средства диагностики особо опасных инфекций на основе моноклональных антител. Проблемы особо опасных инфекций. 2021;(4):35–45. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2021-4-35-45

11. Зайцев АА, Гнусарева ОА, Солодовников БВ, Царева НС, Остапович ВВ, Куличенко АН. Алгоритм лабораторной диагностики при исследовании иксодовых клещей на туляремию. Проблемы особо опасных инфекций. 2012;(3):79–81. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2012-3-79-81

12. Зайцев АА, Гнусарева ОА, Царева НС, Остапович ВВ, Борздова ИЮ, Куличенко АН. Применение иммунохроматографических тест-систем для экспресс-выявления липополисахарида Francisella tularensis при мониторинге природных очагов. Проблемы особо опасных инфекций. 2013; (1):78–80. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2013-1-78-80

13. Касина ИВ, Алексеева СА, Бердникова ЗЕ, Немировская ТИ, Алехина АС. Перспективы совершенствования экспертизы качества вакцины туляремийной живой. Биопрепараты. Профилактика. Диагностика. Лечение. 2017;17(4):240–7. EDN: ZXGLLX

14. Касина ИВ, Алексеева СА, Немировская ТИ. Теоретическое и экспериментальное обоснование перспективных методов экспертизы качества вакцины сибиреязвенной живой. Биопрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2020;20(4):277–84. https://doi.org/10.30895/2221-996X-2020-20-4-277-284

15. Поздеев ОК. Медицинская микробиология. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2010. EDN: QLFKVB