Оценка сопоставимости результатов определения тиомерсала колориметрическим методом и методом атомно-абсорбционной спектрометрии холодного пара в сорбированных иммунобиологических лекарственных препаратах

Количественное определение консерванта тиомерсала, входящего в состав ряда иммунобиологических лекарственных препаратов (ИЛП), является обязательным требованием к их качеству. Ранее нами была разработана методика количественного определения тиомерсала в несорбированных ИЛП, основанная на методе атомно-абсорбционной спектрометрии холодного пара (методика ААС ХП). Цель работы: анализ возможности применения методики ААС ХП для количественной оценки содержания тиомерсала в сорбированных препаратах и оценка сопоставимости результатов количественного определения тиомерсала, полученных с помощью колориметрической методики и методики ААС ХП. Материалы и методы: государственный стандартный образец содержания ионов ртути; фармакопейный стандартный образец (ФСО) содержания мертиолята в сорбированных препаратах (ФСО 3.1.00427); образцы сорбированных ИЛП различных производителей (АКДС-вакцина, препараты анатоксинов, вакцины против гепатита В и гриппа, комбинированные вакцины). Исследование проводили с применением колориметрической методики в реакции с дитизоном и методики ААС ХП. Результаты: полученные с использованием методики ААС ХП значения относительного стандартного отклонения (3,95%) и коэффициента корреляции «объем образца — содержание тиомерсала» (0,9956) подтверждают специфичность методики; регрессионный анализ и полученное значение F-критерия Фишера, равное 0,16, свидетельствуют об отсутствии систематической ошибки методики. Диапазон процента выявления добавленного количества тиомерсала, не превышающий 10%, свидетельствует об удовлетворительной правильности методики. Установлена чувствительность методики ААС ХП: предел количественного определения и предел обнаружения ионов ртути в образце составили 6,9×10^-3 и 2,3×10^-3 мкг/мл соответственно. Значение критерия Фишера (1,29), полученное при оценке сопоставимости результатов определения тиомерсала колориметрической методикой и методикой ААС ХП, ниже табличного значения (3,96). Выводы: подтверждена возможность применения методики ААС ХП для количественного определения тиомерсала в сорбированных ИЛП. Установленный предел обнаружения методики позволяет оценивать остаточные количества тиомерсала в полупродуктах при производстве бесконсервантных форм ИЛП. Оценка сопоставимости результатов определения тиомерсала колориметрической методикой и методикой ААС ХП, проведенная с применением однофакторного дисперсионного анализа по критерию Фишера, показала возможность применения ФСО 3.1.00427 для контроля стабильности аналитической работы при воспроизведении методики ААС ХП.

1. Baker JP. Mercury, vaccines, and autism: one controversy, three histories. Am J Public Health. 2008;98(2):244–53. https://doi.org/10.2105/AJPH.2007.113159

2. Wolfe RM, Sharp LK. Anti-vaccinationists past and present. BMJ. 2002;325(7361):430–2. https://doi.org/10.1136/bmj.325.7361.430

3. Wiedermann U, Garner-Spitzer E, Wagner A. Primary vaccine failure to routine vaccines: why and what to do? Hum Vaccin Immunother. 2016;12(1):239–43. https://doi.org/10.1080/21645515.2015.1093263

4. Sugarman SD. Cases in vaccine court—legal battles over vaccines and autism. N Engl J Med. 2007;357(13):1275–7. https://doi.org/10.1056/NEJMp078168

5. Pichichero ME, Cernichiari E, Lopreiato J, Treanor J. Mercury concentrations and metabolism in infants receiving vaccines containing thiomersal: a descriptive study. Lancet. 2002;360(9347):1737–41. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(02)11682-5

6. Pichichero ME, Gentile A, Giglio N, Umido V, Clarkson T, Cernichiari E, et al. Mercury levels in newborns and infants after receipt of thimerosal-containing vaccines. Pediatrics. 2008;121(2):e208–14. https://doi.org/10.1542/peds.2006-3363

7. Pichichero ME, Gentile A, Giglio N, Alonso MM, Fernandez Mentaberri MV, Zareba G, et al. Mercury levels in premature and low birth weight newborn infants after receipt of thimerosal-containing vaccines. J Pediatr. 2009;155(4):495–9. https://doi.org/10.1016/j.jpeds.2009.04.011

8. da Cunha GK, de Matos MB, Trettim JP, Rubin BB, de Avila Quevedo L, Pinheiro KAT, et al. Thimerosal-containing vaccines and deficit in child development: population-based study in southern Brazil. Vaccine 2020;38(9):2216–20. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2019.12.044

9. Kern JK, Geier DA, Homme KG, Geier MR. Examining the evidence that ethylmercury crosses the blood-brain barrier. Environ Toxicol Pharmacol. 2020;74:103312. https://doi.org/10.1016/j.etap.2019.103312

10. Hinman AR, Orenstein WA, Schuchat A. Vaccine-preventable diseases, immunizations, and MMWR — 1961–2011. MMWR Suppl. 2011;60(4):49–57.

11. Колесникова ОН, Устинникова ОБ, Рунова ОБ, Бондарев ВП. Определение мертиолята в несорбированных ИЛП методом атомно-абсорбционной спектрометрии холодного пара (ААС ХП) по ионам ртути. Часть 1: отработка методики и оценка статистической значимости результатов определения ртути колориметрическим методом и методом ААС-ХП. Биопрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2015;(2):59–63.

12. Glantz SA, ed. Primer of biostatistics. New York: McGraw-Hill; 1992.

13. Doerffel K. Statistik in der analytischen Chemie. Leipzig: Dt. Verl. für Grundstoffindustrie; 1990.

14. Эпштейн НА. Оценка пригодности (валидация) ВЭЖХ методик в фармацевтическом анализе (обзор). Химико-фармацевтический журнал. 2004;38(4):40–56.