Разработка метода определения биологической активности препаратов эритропоэтина in vitro
Резюме
Разработан метод оценки биологической активности препаратов эритропоэтина in vitro на культуре чувствительных клеток TF-1. Исследованы особенности измерения и расчета биологической активности эритропоэтинов с различным уровнем гликозилирования в тестах in vivo и in vitro. Диапазоны линейного ответа клеточной линии на эритропоэтин и его гипергликозилированный аналог отличались и составляли (0,39-0,56 нг/мл) и (3,1-12,5 нг/мл) соответственно. Проведенный анализ полученных результатов показывает возможность применения клеточного теста для сопоставления и количественной оценки активности аналогов эритропоэтина в международных единицах стандарта биологической активности (МЕ), принятых для эритропоэтина.
Об авторах
Н. А. Гаврилова
Научный центр экспертизы средств медицинского применения
Россия
Россия
Аналитик 1-й категории Управления экспертизы противобактериальных МИБП Центра экспертизы и контроля МИБП, канд. биол. наук
С. А. Черепушкин
Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов
Россия
Научный сотрудник отдела медицинской биотехнологии
Россия
Научный сотрудник отдела медицинской биотехнологии
Н. В. Рыкалина
Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов
Россия
Научный сотрудник лаборатории иммунологии
Россия
Научный сотрудник лаборатории иммунологии
Ю. И. Обухов
Научный центр экспертизы средств медицинского применения
Россия
Начальник Управления экспертизы противобактериальных МИБП Центра экспертизы и контроля МИБП
Россия
Начальник Управления экспертизы противобактериальных МИБП Центра экспертизы и контроля МИБП
Список литературы
1. Bunn HF. New agents that stimulate erythropoesis. Blood 2007; 109(3): 868-3.
2. Macdougall IC, Eckardt K-U. Novel strategies for stimulating erythropoiesis and potential treatments for anaemia. Lancet 2006; 368(9539): 947-53.
3. Cossar JD, Lawrence M, Donaldi S. Pegylated erythpoietic compounds. WO2004009627; 2004.
4. Egrie JC, Dwyer E, Browne JK, Hitz A, Lykos MA. Darbepoetin alfa has a longer circulating half-life and greater in vivo potency than recombinant erythropoietin. Exp Hematol. 2003; 31(4): 290-9.
5. Joung CH, Shin JY, Koo JK, Linn JJ, Wang JS, Lee SJ, et al. Production and characterization of long-acting recombinant human albumin-EPO fusion protein expressed in CHO cell. Protein Expr Purif. 2009; 68(2): 137-45.
6. Brines M, Grasso G, Fiordaliso F, Sfacteria A, Ghezzi P, Fratelli M, et al. Erythropoietin mediates tissue protection through an erythropoietin and common beta-subunit heteroreceptor. Proc Natl Acad Sci USA 2004; 101(41): 14907-12.
7. European Pharmacopoeia 8.0 /8.4. «Erythropoietin Concentrated Solution».
8. List of European Pharmacopoeia Reference Standards. Available from: http://www.edqm.eu/en/ph-eur-reference-standards-orders-catalogue.
9. Яковлев АК, Гайдерова ЛА, Алпатова НА, Лобанова ТН, Батуашвили ТА, Симутенко ЛВ. и др. Этапы стандартизации препаратов эритропоэтинов. Биопрепараты 2015; (4): 17-20.
10. Kitamura T, Tange T, Terasawa T, Chiba S, Kuwaki T, Miyagawa K, et al. Establishment and characterization of a unique human cell line that proliferates dependently on GM-CSF, IL-3, or erythropoietin. J Cell Physiol. 1989; 140(2): 323-34.
11. Elliott S, Egrie J, Browne J, Lorenzini T, Busse L, Rogers N, et al. Control of rHuEPO biological activity: the role of carbohydrate. Exp Hematol. 2004; 32(12): 1146-55.
12. Гаврилова НА, Черемных АМ, Бобренёва РА, Аскерова ЕВ, Калинина ТИ, Булушова НВ и др. Гемопоэтическая активность и фармакокинетика гибридных белков EPO-Fc, EPO-Fcneo и Alb-EPO - производных эритропоэтина человека. Биотехнология 2012; (5): 38-49.
13. Черемных АМ, Аскерова ЕВ, Бобренёва РА, Гаврилова НА, Калинина ТИ. Гибридный белок на основе рекомбинантного эритропоэтина человека, обладающий пролонгированным действием (варианты), и способ его получения. Патент Российской Федерации, № 2515914; 2013.
Рецензия
Для цитирования:
Гаврилова Н.А., Черепушкин С.А., Рыкалина Н.В., Обухов Ю.И. Разработка метода определения биологической активности препаратов эритропоэтина in vitro. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2016;16(2):120-124.
For citation:
Gavrilova N.A., Cherepushkin S.A., Rykalina N.V., Obukhov Yu.I. The development of a method for determining the biological activity of erythropoietin preparations in vitro. BIOpreparations. Prevention, Diagnosis, Treatment. 2016;16(2):120-124. (In Russ.)
Просмотров:
823
Послать статью по эл. почте 