Разработка и аттестация стандартных образцов содержания фенола в иммунобиологических лекарственных препаратах с учетом сопоставимости результатов, полученных методами ГЖХ, ВЭЖХ, спектрофотометрии и колориметрии

Фенол — консервант, входящий в состав ряда иммунобиологических лекарственных препаратов, при этом методы, используемые для его количественной оценки, имеют принципиальные отличия. Актуальные требования к аккредитованным лабораториям предполагают постоянный внутрилабораторный контроль качества, эффективным метрологическим инструментом обеспечения которого служат стандартные образцы с аттестованным содержанием аналита. Цель работы: разработка и аттестация стандартных образцов содержания фенола в иммунобиологических лекарственных препаратах с учетом сопоставимости результатов, полученных методами ГЖХ, ВЭЖХ, колориметрическим и спектрофотометрическим. Материалы и методы: разводящая жидкость для аллергенов (кандидат в стандартный образец); раствор фенола 2,5 и 5 мг/мл; раствор 2-феноксиэтанола 2,5 мг/мл. Исследования проводили с применением спектрофотометрической и колориметрической методик, а также методик, основанных на методах ГЖХ и ВЭЖХ. Результаты оценивали с применением статистических методов расчета среднего арифметического, стандартного отклонения, коэффициента вариации, дисперсионного анализа с применением критериев Стьюдента и Фишера. Результаты: результаты определения фенола спектрофотометрическим и колориметрическим методами, а также методом ВЭЖХ статистически достоверно сопоставимы. Значение критерия Фишера (F-критерия) при сравнительной оценке равнозначных выборок (n = 40) — F = 0,9343, при критическом значении F_крит = 3,96. Для контроля стабильности определения фенола данными методами возможно применение стандартного образца, аттестованного одним из вышеуказанных методов. Результаты определения фенола методом ГЖХ статистически достоверно отличаются, F = 17,47 при F_крит = 3,96, что подтверждает необходимость аттестации отдельного стандартного образца. Выводы: аттестованы стандартный образец содержания фенола 42-28-449 для спектрофотометрического, колориметрического метода и метода ВЭЖХ с аттестованной характеристикой содержания фенола от 2,56 до 3,32 мг/мл и стандартный образец содержания фенола 42-28-451 для метода ГЖХ с аттестованной характеристикой содержания фенола от 2,92 до 3,28 мг/мл.

1. Колесникова ОН, Рунова ОБ, Устинникова ОБ. Разработка и валидация методики количественного определения фенола методом газожидкостной хроматографии в биологических лекарственных препаратах. Химикофармацевтический журнал. 2018;52(5):60–4. https://doi.org/10.30906/0023-1134-2018-52-5-60-64

2. Колесникова ОН, Устинникова ОБ, Рунова ОБ. Способ количественного определения фенола методом газожидкостной хроматографии в биологических лекарственных препаратах. Патент Российской Федерации № 2693518; 2019.

3. Dettmer-Wilde K, Engewald W. Practical Gas Chromatography: a Comprehensive Reference. Berlin: Springer, 2014.

4. Berezkin VG, Chemical Methods in Gas Chromatography. Journal of Chromatography Library. V. 24. Amsterdam; New York: Elsevier Scientific Publishers; 1983.

5. Parris NA. Instrumental Liquid Chromatography. Journal of Chromatography Library. V. 27. Amsterdam; New York: Elsevier Science Publishers; 1984.

6. Хайвер К, ред. Высокоэффективная газовая хроматография. M.: Мир; 1993.

7. Bruner F. The Science of Chromatography. Journal of Chromatography Library. V. 32. Amsterdam; New York: Elsevier, 1985.

8. Guiochon G, Guillemin CL. Quantitative Gas Chromatography for Laboratory Analyses and On-line Process Control. Journal of Chromatography Library. V. 42. Amsterdam; New York: Elsevier; 1988.

9. Rotzsche H. Stationary Phases in Gas Chromatography. Journal of Chromatography Library. V. 48. Amsterdam; New York: Elsevier; 1991.

10. Hanai T. Liquid Chromatography in Biomedical Analysis. Journal of Chromatography Library. V. 50. Amsterdam; New York: Elsevier; 1991.

11. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика; 1998.

12. Бондарев ВП, Борисевич ИВ, Волкова РА, Фадейкина ОВ. Проблема аттестации отраслевых стандартных образцов для контроля качества иммунобиологических лекарственных препаратов. Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. 2013;(2):28–32. https://doi.org/10.30895/1991-2919-2013-0-2

13. Фадейкина ОВ, Волкова РА. Разработка порядка аттестации стандартных образцов биологических лекарственных средств. Химико-фармацевтический журнал. 2017;51(8):44–50. https://doi.org/10.30906/0023-1134-2017-51-8-44-50

14. Волкова РА. Проблемы метрологического обеспечения методик оценки качества иммунобиологических препаратов, в кн.: I Международная конференция «Стандартные образцы в измерениях и технологиях». Сборник трудов. Ч. 1. Екатеринбург; 2013. С. 88–90.

15. Волкова РА. Методики контроля или методики испытаний — к вопросу о метрологическом обеспечении аналитических методик. Справочник заведующего КДЛ. 2013;(4):4–9.

16. Меркулов ВА, Саканян ЕИ, Климов ВИ, Шеремянкина ТБ, Яшкир ВА, Бармин АВ. Современные подходы к разработке стандартных образцов для оценки качества фармацевтических субстанций. Химико-фармацевтический журнал. 2015;49(11):54–6. https://doi.org/10.30906/0023-1134-2015-49-11-54-56