Модификация и валидация методики оценки невидимых механических включений на основе метода Култера в растворах для парентерального введения

Для определения невидимых механических включений (размером менее 100 мкм) в лекарственных формах для парентерального применения Государственная фармакопея Российской Федерации XIV издания предусматривает применение метода Култера в дополнение к счетно-фотометрическому методу и методу микроскопии. Использование предлагаемой апертурной трубки с отверстием диаметром 100 мкм не позволяет оценить весь диапазон размеров невидимых механических включений. Таким образом, актуальны исследования по подбору оптимальных параметров методики определения невидимых механических включений на основе метода Култера. Цель работы: модификация методики на основе метода Култера с использованием апертуры диаметром 200 мкм и проведение валидационных исследований модифицированной методики. Материалы и методы: исследования проводили с использованием анализатора размеров частиц Multisizer 4e, использовали суспензии стандартных латексных частиц с заданными размерами 10, 20, 43 мкм и стандартный образец счетной концентрации с содержанием 0,998 × 10⁶ частиц/мл. В ходе валидации модифицированной методики оценивали следующие валидационные характеристики: правильность, повторяемость (сходимость), линейность. Результаты: проведенное исследование подтвердило возможность использования модифицированной методики с апертурой диаметром 200 мкм, основанной на методе Култера. Установлены валидационные характеристики модифицированной методики: правильность в сравнении со стандартным образцом счетной концентрации составила 5,3% (по отклонению от среднего значения); в сравнении со счетно-фотометрическим методом — 4,2%. Повторяемость (сходимость) результатов составила: 1% (по относительному стандартному отклонению) — при концентрации ≈10000 частиц в 1 мл и 7,6% — при концентрации ≈300 частиц в 1 мл. Показана линейность: коэффициент корреляции линейной зависимости более 0,99. Выводы: установлено соответствие критериям приемлемости по исследованным валидационным характеристикам модифицированной методики. Применение модифицированной методики позволит оценить весь требуемый диапазон размеров невидимых механических включений при оценке качества растворов для парентерального введения по показателю «Невидимые механические включения».

1. Воропаев АА, Фадейкина ОВ, Ермолаева ТН, Давыдов ДС, Кудашева ЭЮ. Оценка возможности применения метода Култера (электрочувствительных зон) для определения невидимых механических включений в препаратах крови человека отечественного производства. Антибиотики и химиотерапия. 2017;62(7–8):32–7.

2. Barnard J, Rhyner M, Carpenter J. Critical evaluation and guidance for using the Coulter method for counting subvisible harticles in protein solutions. J Pharm Sci. 2012;101(1):140–53. https://doi.org/10.1002/jps.22732

3. Новик ЕС, Доренская АВ, Борисова НА, Гунар ОВ. Особенности анализа лекарственных препаратов для парентерального применения методом электрочувствительных зон. Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. 2018;8(2):123–7. https://doi.org/10.30895/1991-2919-2018-8-2-123-127

4. Narhi L, Jiang Y, Cao S, Benedek K, Shnek D. A critical review of analytical methods for subvisible and visible particles. Curr Pharm Biotechnol. 2009;10(4):373–81. https://doi.org/10.2174/138920109788488905

5. Гланц С. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. М.: Практика; 1998.

6. Johnson JB. Thermal agitation of electricity in conductors. Physical Review. 1928;32(1):97–109. https://doi.org/10.1103/PhysRev.32.97