biopreparatБИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечениеBiological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment2221-996X2619-1156Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products10.30895/2221-996X-2025-25-4-400-412biopreparat-702Research ArticleТЕМА НОМЕРА: ПРЕПАРАТЫ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ И ИММУНОГЛОБУЛИНОВ: ОТ РАЗРАБОТКИ ДО КЛИНИЧЕСКОГО ПРИМЕНЕНИЯISSUE TOPIC: MONOCLONAL ANTIBODIES AND IMMUNOGLOBULINS: FROM DESIGN TO CLINICAL USEИммуноглобулин человека против гепатита В для внутривенного введения: разработка, контроль качества, исследование вирусной безопасности и фармакокинетикиHuman hepatitis B immunoglobulin for intravenous administration: Development, quality control, viral safety, and pharmacokinetics researchhttps://orcid.org/0000-0002-7608-1914ИвановА. В.IvanovA. V.

Иванов Александр Викторович, канд. фарм. наук

2-й Волконский переулок, д. 10, Москва, 127473

Alexander V. Ivanov, Cand. Sci. (Pharm.)

10 2nd Volkonsky Ln., Moscow 127473

https://orcid.org/0000-0001-6352-9380БеляковаО. В.BeliakovaO. V.

Белякова Ольга Валерьевна, канд. фарм. наук

2-й Волконский переулок, д. 10, Москва, 127473

Olga V. Beliakova, Cand. Sci. (Pharm.)

10 2nd Volkonsky Ln., Moscow 127473

https://orcid.org/0000-0003-0230-3091СемичеваА. И.SemichevaA. I.

Семичева Анастасия Игоревна

2-й Волконский переулок, д. 10, Москва, 127473

Anastasia I. Semicheva

10 2nd Volkonsky Ln., Moscow 127473

https://orcid.org/0000-0003-0497-9757ВязниковаТ. В.VyaznikovaT. V.

Вязникова Татьяна Владимировна, канд. биол. наук

2-й Волконский переулок, д. 10, Москва, 127473

Tatyana V. Vyaznikova, Cand. Sci. (Biol.)

10 2nd Volkonsky Ln., Moscow 127473

https://orcid.org/0000-0001-8536-4804СаканянЕ. И.SakanjanE. I.

Саканян Елена Ивановна, д-р фарм. наук

2-й Волконский переулок, д. 10, Москва, 127473

Elena I. Sakanjan, Dr. Sci. (Pharm.)

10 2nd Volkonsky Ln., Moscow 127473

https://orcid.org/0000-0002-2934-3002СмоляноваТ. И.SmolyanovaT. I.

Смолянова Татьяна Ивановна, канд. фарм. наук

2-й Волконский переулок, д. 10, Москва, 127473

Tatiana I. Smolyanova, Cand. Sci. (Pharm.)

10 2nd Volkonsky Ln., Moscow 127473

https://orcid.org/0000-0003-4922-9052СоколоваА. Р.SokolovaА. R.

Соколова Алина Рашидовна, канд. биол. наук

2-й Волконский переулок, д. 10, Москва, 127473

 

Alina R. Sokolova, Cand. Sci. (Biol.)

10 2nd Volkonsky Ln., Moscow 127473

https://orcid.org/0009-0001-3179-1429ТрофимовД. М.TrofimovD. M.

Трофимов Денис Михайлович

2-й Волконский переулок, д. 10, Москва, 127473

Denis M. Trofimov

10 2nd Volkonsky Ln., Moscow 127473

https://orcid.org/0000-0002-3160-518XНиколаеваА. М.NikolaevaA. M.

Николаева Алевтина Максимовна, д-р биол. наук

2-й Волконский переулок, д. 10, Москва, 127473

Alevtina M. Nikolaeva, Dr. Sci. (Biol.)

10 2nd Volkonsky Ln., Moscow 127473

a.m.nikolaeva@microgen.ruАкционерное общество Научно-производственное объединение «Микроген»РоссияMicrogenRussian FederationАкционерное общество «Национальная иммунобиологическая компания»РоссияNational Immunobiological CompanyRussian Federation202519122025254400412Copyright © Иванов А.В., Белякова О.В., Семичева А.И., Вязникова Т.В., Саканян Е.И., Смолянова Т.И., Соколова А.Р., Трофимов Д.М., Николаева А.М., 20252025Иванов А.В., Белякова О.В., Семичева А.И., Вязникова Т.В., Саканян Е.И., Смолянова Т.И., Соколова А.Р., Трофимов Д.М., Николаева А.М.Ivanov A.V., Beliakova O.V., Semicheva A.I., Vyaznikova T.V., Sakanjan E.I., Smolyanova T.I., Sokolova А.R., Trofimov D.M., Nikolaeva A.M.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.biopreparations.ru/jour/article/view/702ВВЕДЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ. Несмотря на значительное снижение заболеваемости острым гепатитом В (ГВ) благодаря вакцинопрофилактике, экстренная специфическая профилактика ГВ остается актуальной проблемой для глобального здравоохранения и здравоохранения Российской Федерации. Совершенствование методов экстренной профилактики, в частности переход на внутривенные формы специфического иммуноглобулина, обладающие более высокой биодоступностью и способностью быстро создавать защитный титр антител, позволит обеспечить надежную защиту лицам в группах высокого риска заражения ГВ. В Российской Федерации иммуноглобулины человека (ИГЧ) против ГВ представлены препаратом Антигеп (Россия) для внутримышечного введения и зарубежным препаратом Неогепатект (Германия) для внутривенного введения. Для совершенствования иммунопрофилактики ГВ и реализации политики импортозамещения актуальны исследования по разработке первого российского лекарственного препарата ИГЧ против ГВ для внутривенного введения.

ЦЕЛЬ

ЦЕЛЬ. Разработка, контроль качества, исследование вирусной безопасности и фармакокинетики российского препарата иммуноглобулина человека против гепатита В для внутривенного введения.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. ИГЧ против ГВ (Антигеп-Нео) получали из плазмы крови доноров с высоким уровнем антител к вирусу ГВ. Качество препарата оценивали по физико-химическим, биологическим и молекулярным параметрам, содержанию иммуноглобулина А, функциональному состоянию Fc-фрагмента и тромбогенному потенциалу. Фармакокинетику изучали в рамках доклинических (кролики) и клинических (добровольцы) исследований. Препараты Неогепатект и Антигеп использовали в качестве препаратов сравнения.

РЕЗУЛЬТАТЫ

РЕЗУЛЬТАТЫ. Технология получения ИГЧ основана на стандартном спиртовом фракционировании по методу Кона с последующей хроматографической очисткой и трех стадиях удаления и инактивации вирусов. Полученный препарат демонстрировал вирусную безопасность и содержит более 95% действующего вещества — иммуноглобулины класса G (IgG), из которых более 99% — мономеры и димеры. Препарат характеризовался низкой антикомплементарной активностью (0,17±0,06 СН50/мг IgG), низким содержанием активатора прекалликреина (7,45±2,11 МЕ/мл) и отсутствием тромбогенного потенциала. Биоэквивалентность препаратов Антигеп-Нео и Неогепатект подтверждена в доклинических и клинических исследованиях. Фармакокинетические параметры сравниваемых препаратов статистически не различались.

ВЫВОДЫ

ВЫВОДЫ. Разработанный иммуноглобулин человека против гепатита В (препарат Антигеп-Нео) соответствует нормативным требованиям по качеству и вирусной безопасности. Доклинические и клинические исследования подтвердили близкую фармакокинетику Антигеп-Нео и препарата сравнения Неогепатект.

INTRODUCTION

INTRODUCTION. Despite the decreasing acute hepatitis B (HBV) incidence due to active vaccine prophylaxis, HBV-specific post-exposure prophylaxis is still a relevant problem for both global and Russian healthcare. Advanced post-exposure prophylaxis, particularly intravenous specific immunoglobulin with its higher bioavailability and fast formation of protective titre, will better protect high-risk groups. Preparations of hepatitis B human immunoglobulins available in Russia are Antigep (Russia) for intravenous administration and Neohepatect (Germany). Enhancing vaccine prophylaxis of hepatitis B and import substitution requires development studies of the first hepatitis B immunoglobulin for intravenous administration produced in Russia.

AIM

AIM. This study aimed to develop Russian human HBV immunoglobulin for intravenous administration and perform quality control, safety and pharmacokinetics study.

MATERIALS AND METHODS

MATERIALS AND METHODS. Human HBV immunoglobulin (Antigep-Neo) was obtained from the blood plasma of donors with high anti-HBV levels. Antigep-Neo was evaluated according to physico-chemical, biological, and molecular parameters, immunoglobulin A level, activity of the Fc function, and thrombogenic potential. Pharmacokinetic properties were studied in preclinical (rabbit) and clinical (healthy volunteers) studies. Neohepatect and Antigep immuno­globulin preparations were used as comparator drugs.

RESULTS

RESULTS. Production of human antiglobulin is based on the standard Cohn fractionation followed by chromatographic purification and three virus removal and inactivation steps. Antihep-Neo is safe, it contains more than 95% of the human IgG, of them more than 99% are monomers and dimers. The product showed low anticomplementary activity (0.17±0.06 CH50/mg IgG) and low concentration of prekallikrein activator (7.45±2.11 IU/mL) and had no thrombogenic potential. Bioequivalence of Antigep-Neo and Neohepatect was confirmed in preclinical and clinical trials (differences in the pharmacokinetic profiles were not statistically significant).

CONCLUSIONS

CONCLUSIONS. The developed human HBV immunoglobulin (Antigep-Neo) meets quality and safety regulatory requirements. Preclinical and clinical studies have confirmed similar pharmacokinetic profile of Antigep-Neo and Neohepatect (comparator).

гепатит BВГВвнутривенное введениеиммуноглобулин Gплазмакроликибиоэквивалентностьпостконтактная профилактикаэкстренная специфическая профилактикалекарственные препаратыиммуноглобулин против гепатита Вhepatitis BHBVintravenous administrationimmunoglobulin Gplasmarabbitsbioequivalencepost-exposure prophylaxisemergency prophylaxismedicinal productshepatitis B immunoglobulinВВЕДЕНИЕ

Вирусный гепатит В (ВГВ) по-прежнему остается актуальной проблемой как для глобального здравоохранения, так и для здравоохранения Российской Федерации. При инфекции, вызванной ВГВ, возможны разные клинические исходы, например острый бессимптомный или хронический гепатит В (ХГВ). ХГВ приводит к длительному воспалению и повреждению печени с прогрессированием до цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы [1][2]. Ежегодно в мире 1,5–2 млн человек умирают от последствий инфицирования ВГВ, в том числе около 100 тыс. — от фульминантного ВГВ, 500 тыс. — от острого ВГВ, около 700 тыс. — от цирроза печени и 200 тыс. — от гепатоцеллюлярной карциномы [3].

Несмотря на применение безопасных и эффективных вакцин для борьбы с передачей вируса, более 2 млрд человек в мире инфицированы ВГВ, более 250 млн человек имеют хроническую форму инфекции. Ежегодно регистрируется около 1,2 млн новых случаев острого гепатита В (ОГВ)1. В России количество инфицированных ВГВ лиц превышает 5 млн, при этом доля желтушных форм составляет 10–40% [4]. Заболеваемость гепатитом В наиболее распространена среди лиц молодого возраста [5].

Реализация комплекса профилактических и противоэпидемических мероприятий в Российской Федерации2 позволила достичь снижения заболеваемости ОГВ в >100 раз [3]. Однако заболеваемость ХГВ на протяжении последних пяти лет находится практически на одном уровне: 9–10 случаев на 100 тыс. населения. В настоящее время именно хронические и латентные варианты гепатита В определяют основную часть эпидемического процесса, социальную значимость и прогноз данной инфекции. При инфицировании ВГВ взрослого человека хронизация инфекции наблюдается в 10% случаев, из которых в 70% случаев формируется вирусоносительство и лишь в 30% развивается прогрессирующий гепатит [3].

Высокий риск заражения ВГВ существует в случаях гемотрансфузии вируссодержащей донорской плазмы крови. В группе высокого риска заражения ВГВ находятся пациенты с хронической почечной недостаточностью, получающие курсы гемодиализа. Естественную передачу ВГВ вертикальным и половым путем в высшей степени трудно контролировать. Инфицирование новорожденных от матерей — хронических вирусоносительниц, особенно с признаками активной вирусной репродукции (наличие HBeAg), с последующим развитием хронической инфекции достигает 90% по сравнению с детьми, инфицированными в возрасте от 1 до 5 лет (30–50%), и людьми, инфицированными во взрослом возрасте (<5%). В этих случаях необходима экстренная специфическая профилактика [6–8].

Препараты иммуноглобулина против гепатита В, наряду с вакцинацией, являются основополагающим элементом экстренной профилактики инфекции, что отражено во всех действующих российских и зарубежных клинических рекомендациях. Для профилактики ВГВ используются препараты иммуноглобулина против гепатита В для внутримышечного (в/м) введения: Аунатив (Австрия), Иммуногам (Великобритания), Гепуман В (Италия), Антигеп (Россия) и внутривенного (в/в) введения: ГепаГам В (Канада), Неогепатект (Германия), ВенБиг (Швейцария) и др. [9].

Иммуноглобулины для в/м введения имеют относительно низкую биодоступность. Резорбция препарата осуществляется из места введения в течение 2–3 сут. Больше половины препарата подвергается разрушению протеолитическими ферментами и задерживается в мышечной ткани. Кроме того, низкая скорость поступления антител в системный кровоток не позволяет быстро создавать высокие концентрации антител в неотложных ситуациях. Препараты для в/в введения имеют существенные преимущества перед иммуноглобулинами для в/м введения, так как их применение способствует достижению эффективных концентраций антител в крови в кратчайшие сроки [10]. Международный опыт использования иммуноглобулина против гепатита В для в/в введения свидетельствует о его высокой профилактической и лечебной эффективности [11][12].

В настоящее время иммуноглобулин против гепатита В для в/в введения широко используется для профилактики инфицирования при трансплантации печени [13][14] в целях снижения вероятности отторжения иммунной системой трансплантата и блокирования клеточных рецепторов вируса. В США и европейских медицинских центрах введение иммуноглобулина против гепатита B в терапию пациентов после трансплантации печени позволило увеличить уровень выживаемости с 50 до 80% [15][16].

Таким образом, накопленный опыт использования иммуноглобулина против гепатита В специалистами разных стран свидетельствует о высокой профилактической эффективности формы препарата для внутривенного введения. В связи с этим разработка отечественного иммуноглобулина для внутривенного введения против гепатита В является актуальной.

Цель работы — разработка, контроль качества, исследование вирусной безопасности и фармакокинетики российского препарата иммуноглобулина человека против гепатита В для внутривенного введения.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫМатериалы

Иммуноглобулин человека против гепатита В для внутривенного введения получали из плазмы крови здоровых доноров, протестированной на наличие маркеров инфекций, передающихся с кровью, и соответствующей требованиям ФС.3.3.2.00011.193, содержащей антитела к поверхностному антигену (HBsAg) вируса гепатита В4. Производство препарата Антигеп-Нео осуществляли на базе АО «НПО «Микроген» (филиал АО НПО «Микроген» в г. Пермь «Пермское НПО «Биомед»).

В качестве препаратов сравнения использовали лекарственный препарат Неогепатект, который представляет собой иммуноглобулин человека против гепатита В, раствор для инфузий 50 МЕ/мл (Biotest Pharma, Германия), и препарат Антигеп — иммуноглобулин человека против гепатита В, раствор для внутримышечного введения 50 МЕ/мл (AO «НПО «Микроген», Россия).

Методы

Оценку физико-химических и биологических свойств иммуноглобулина проводили в соответствии с требованиями нормативных документов Минздрава России.

Молекулярные параметры препаратов иммуноглобулина оценивали на хроматографической колонке BioSep Sec-s3000 (Phenomenex, США). В качестве препарата сравнения использовали европейский стандартный образец Human immunoglobulin (molecular size) BRP European Pharmacopoeia reference standard (code Y0000488, Sigma-Aldrich, Германия).

Содержание иммуноглобулина А определяли методом радиальной иммунодиффузии в геле по методу Манчини с использованием набора реагентов «Моно-РИД-G, A, M Сыворотки диагностические моноспецифические против IgG(H), IgА(H), IgМ(H) человека сухие по ТУ 9389-145-14237183-2009» (АО НПО «Микроген», Россия).

Соотношение подклассов иммуноглобулина класса G оценивали с помощью тест-системы Human IgG Subclass Profile ELISA KIT (Thermo Fisher Scientific, США) согласно инструкции производителя.

Определение функционального состояния Fc-фрагмента проводили с помощью реакции коагглютинации, которая основана на способности белка А стафилококка штамма Cowan I избирательно связываться с Fc-фрагментом иммуноглобулинов класса G [17]. В качестве положительного контроля использовали стандартный образец иммуноглобулина Human immunoglobulin BRP (Fc function and molecular size) European Pharmacopoeia reference standard (code Y0001512, Sigma-Aldrich, Германия). Отрицательным контролем служил образец иммуноглобулина, лишенный Fc-фрагмента (образец содержит только Fab2-фрагменты) [18]. Методика получения образца отрицательного контроля более подробно описана в онлайн-приложении 1 (опубликовано на сайте журнала5). Стандартный образец, испытуемые образцы и образец отрицательного контроля переносили на стекло, затем к этим образцам добавляли суспензию стафилококка штамм Cowan-I в равном объеме. Результатом взаимодействия реагентов являлось образование агглютинатов в капле.

Индекс активности функции Fc (IFc) рассчитывали по формуле (1):

(1)

где TS — время образования агглютинатов в стандартном образце; Т — время образования агглютинатов в испытуемом или контрольном образцах.

Оценку тромбогенного потенциала готовой лекарственной формы препарата иммуноглобулина осуществляли на модели венозного стаза по методу S. Wessler [19][20] с использованием кроликов породы Советская шиншилла (2,0–2,5 кг). Миорелаксацию проводили при в/м введении препарата Ксила® (Interchemie werken «De Adelaar» В.V., Нидерланды) в дозе 0,15–0,20 мл/кг; общую анестезию — при в/м введении препарата Золетил® 100 (Virbac Sante Animale, Франция) в дозе 0,15–0,2 мл/кг с добавлением 0,9% раствора натрия хлорида до объема 1,0 мл.

Доклиническое исследование препарата. Сравнительное изучение фармакокинетических свойств препаратов Антигеп-Нео, Неогепатект и Антигеп проводили на 15 кроликах-самках породы Советская шиншилла (по 5 животных в группе) массой 2,0–2,5 кг (возраст 4,5–5 мес.), которые были получены из филиала АО «НПО Микроген» в с. Горный Чишминского района Республики Башкортостан «Питомник лабораторных животных». Все исследования были одобрены локальным Комитетом инспекторов по контролю качества доклинических исследований Филиала АО «НПО «Микроген» в г. Пермь «Пермское НПО «Биомед» от 20.03.2017 и проведены в соответствии с Директивой Европейского парламента и Совета Европейского союза 2010/63/EU от 22.09.2010 об охране животных, используемых в научных целях.

Кролики содержались в отдельном помещении вивария в индивидуальных клетках, оснащенных кормушкой и поилкой, по одной особи, при температуре от 20 до 23°C и относительной влажности не ниже 45%. В помещениях для содержания животных поддерживался 12-часовой цикл освещения и 15-кратный воздухообмен в 1 ч с помощью приточно-вытяжной вентиляции. У кроликов был свободный доступ к чистой питьевой воде и корму.

Препараты Антигеп-Нео (200 МЕ, объем 4 мл) и Неогепатект (200 МЕ, объем 4 мл) вводили внутривенно в ушную вену; препарат Антигеп [21] (200 МЕ, объем 4 мл) вводили животным внутримышечно в область бедра. Забор крови осуществляли из ушной вены через 1, 4 и 24 ч после введения препаратов с последующим ежедневным забором крови на протяжении 20 сут. Формирование групп кроликов, пути и схемы введения препаратов, а также забора крови были выбраны в соответствии с руководящими принципами этичного использования животных (3R): минимальной инвазивности, болезненности и стресса для животных.

Клиническое исследование препарата. Клиническое исследование (КИ) иммуноглобулина Антигеп-Нео проводилось в рамках простого слепого сравнительного рандомизированного одноцентрового исследования фазы I–II на двух параллельных группах здоровых добровольцев в соответствии с Протоколом исследования № АГБ-Р-I-00-007/2016 (разрешение Минздрава России № 177 от 18.04.2018). Цель КИ заключалась в изучении фармакокинетики препарата иммуноглобулина человека против гепатита В. Введение препарата добровольцам и наблюдение за ними проводилось в период с января по май 2019 г. Всего в КИ приняли участие 48 здоровых добровольцев (24 мужчины и 24 женщины) в возрасте от 18 до 50 лет, удовлетворяющих критериям включения и невключения в соответствии с утвержденным протоколом клинического исследования №АГБ-Р-I-00-007/20166. Критерии включения и невключения более подробно описаны в онлайн-приложении 2 (опубликовано на сайте журнала7). До начала исследования каждым добровольцем было подписано информированное согласие на включение результатов их обследования и лечения в данное исследование. Все исследования проводили в соответствии с правилами Надлежащей клинической практики (Международная конференция по гармонизации, 1996 г.) и с Хельсинкской Декларацией (Всемирная медицинская ассоциация, 2008 г.), а также в соответствии с ГОСТ Р 52379-2005 «Надлежащая клиническая практика» и Решением ЕАЭС № 79.

Исследование состояло из трех периодов: скрининг (до 7 сут), период введения препаратов (госпитализация в течение 24 ч), период последующего наблюдения (104 сут с момента введения препарата). По результатам скрининга добровольцы были распределены на две группы по 24 человека (50% женщин, 50% мужчин): группа 1 — введение исследуемого препарата Антигеп-Нео (средний возраст 30,00±8,40 года); группа 2 — введение препарата сравнения Неогепатект (средний возраст 29,92±9,33 года). Рандомизация проводилась методом конвертов. Все добровольцы получили однократную инфузию иммуноглобулинов в дозе не менее 500 МЕ (10 мл). На 8, 12, 17, 24, 31, 38, 45, 59, 73, 87, 104 сут добровольцы посещали исследовательский центр с целью контроля за состоянием здоровья и забора проб крови для исследования фармакокинетики.

Определение уровня антител к HBsAg проводили с использованием набора реагентов для иммуноферментного качественного и количественного определения антител к HBs-антигену вируса гепатита B в сыворотке (плазме) крови (АО «Вектор Бест», Россия) в соответствии с инструкцией по применению.

Определяли следующие основные фармакокинетические параметры: максимальное значение концентрации специфических антител IgG к ВГВ (Сmax) и время его достижения (Tmax); площадь под кривой (AUC) «концентрация специфических антител IgG к ВГВ — время» с момента введения препарата до последнего определяемого значения концентрации специфических антител IgG к ВГВ во временной точке t (AUC0-t) или «до бесконечности» (AUC0-∞), рассчитанная методом трапеций. Кроме того, определяли дополнительные фармакокинетические параметры: период полувыведения специфических антител IgG к ВГВ (T1/2) и константу скорости элиминации (Kel), оцениваемую по угловому коэффициенту линии регрессии, который рассчитывали по методу наименьших квадратов.

Статистическую обработку данных проводили в программе Microsoft Excel.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕПолучение препарата иммуноглобулина

В АО «НПО «Микроген» разработана и успешно применяется универсальная технологическая платформа для получения препаратов иммуноглобулинов для в/в введения Биогам, КОВИД-глобулин [22][23] и препарата Антигеп-Нео. Технология (способ получения) защищена патентом ЕАЭС № 0435268. Блок-схема получения препарата Антигеп-Нео представлена на рисунке 1.

Рисунок подготовлен авторами по собственным данным / The figure was prepared by the authors using their own data

Рис. 1. Блок-схема получения препарата иммуноглобулина Антигеп-Нео. Осадок А — белковая фракция плазмы крови, из которой выделяют иммуноглобулин G; нанофильтрация 20 нм — фильтрация через фильтр с диаметром пор 20 нм.

Fig. 1. Production flowchart of Antigep-Neo immunoglobulin preparation. Precipitate A, protein fraction of blood plasma used to separate immunoglobulin G; 20 nm nanofiltration, filtration through a filter with a pore diameter of 20 nm.

https://cdn.elpub.ru/assets/journals/biopreparat/2025/4/wwfKaTs5JIQFTlcMEcEeOT1q1Aqe1p7m2Lajb9Qs.jpeg

Технология основана на стандартном спиртовом фракционировании по методу Кона и хроматографической очистке через систему из трех последовательно соединенных колонн, заполненных гидрофобным, анионо- и катионообменными сорбентами. Препарат концентрируют с помощью тангенциальной ультрафильтрации с последующей стерилизующей фильтрацией.

Изучение вирусной безопасности препарата

Вирусная безопасность иммуноглобулинов, полученных по универсальной технологии, обеспечивается благодаря следующим мероприятиям: отбор и обследование доноров; тестирование плазмы для фракционирования на маркеры гемотрансмиссивных инфекций и карантинизация плазмы; включение трех специализированных стадий инактивации и/или удаления вирусов. Такие стадии включают обработку смесью сольвент-детергента, нанофильтрацию и инкубацию в растворе с низким значением рН [24], что соответствует нормативным требованиям9, согласно которым для обеспечения вирусной безопасности процесс производства препаратов иммуноглобулинов должен включать не менее двух ортогональных стадий инактивации вирусов.

В процессе проведенной валидации вирусной редукции с использованием модельных вирусов было показано снижение вирусной нагрузки на величину R (фактор снижения вирусной нагрузки)10 ≥10,0 lоg10 для оболочечных и ≥5,0 lоg10 для безоболочечных вирусов, что свидетельствует об эффективности процедуры инактивации и/или удаления вирусов (табл. 1).

Таблица 1. Оценка эффективности вирусной редукции при производстве препаратов иммуноглобулина человека по универсальной технологии

Table 1. Evaluation of viral reduction efficiency in the production of human immunoglobulin preparations as per universal technology

Таблица составлена авторами по собственным данным / The figure was prepared by the authors using their own data.

Примечание. ВГВУ — вирус гепатита В уток (РНК-содержащий вирус); ВИЧ-1 — вирус иммунодефицита человека 1 (РНК-содержащий вирус); ВГС — вирус гепатита С (РНК-содержащий вирус); ВГВ — вирус гепатита В (ДНК-содержащий вирус); ВВД-БС КРС — возбудитель вирусной диареи — болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота (РНК-содержащий вирус); В19V — парвовирус В19 (ДНК-содержащий вирус); ЭМКВ — вирус энцефаломиокардита; «–» — показатель не определялся; нанофильтрация 20 нм — фильтрация через фильтр с диаметром пор 20 нм.

Note. DHBV, duck hepatitis B virus (RNA-containing virus); HIV-1, human immunodeficiency virus type 1 (RNA-containing virus); HCV, hepatitis C virus (RNA-containing virus); HBV, hepatitis B virus (DNA-containing virus); BVDV, bovine viral diarrhoea virus (RNA-containing virus); B19V, human parvovirus B19 (DNA-containing virus); PPV, porcine parvovirus; EMCV, encephalomyocarditis virus; –, not measured; nanofiltration 20 nm, filtration through a filter with a pore diameter of 20 nm.

Стадии удаления/инактивации вирусов Virus inactivation/removalФактор вирусной редукции, log10 / Virus reduction factor, log10
Оболочечные вирусы Enveloped virusesБезоболочечные вирусы Non-enveloped viruses
ВГВУ DHBVВИЧ-1 HIV-1ВГС HCVВГВ HBVВВД-БС КРС BVDVB19VПарвовирус свиней PPVЭМКВ EMCV
Обработка раствором сольвент/детергента Solvent/detergent treatment≥5,0≥6,0––≥4,0–––
Фракционирование этиловым спиртом до осадка А Ethanol fractionation for precipitate A––4,2–4,35,1–5,5–4,4–4,7––
Инкубация при низком значении pH Low-pH incubation≥5,0≥4,0––5,5–6,1–––
Хроматографическая очистка Chromatography purification––2,2–2,33,5–3,7–3,7–3,8––
Нанофильтрация (20 нм) Nanofiltration (20 nm)–≥4,04,0–4,14,2–4,3≥5,04,0–4,2≥5,0≥5,0
Суммарный фактор редукции Cumulative reduction factor≥10,0≥14,0≥10,4≥12,8≥14,5≥12,2>5,0>5,0
Изучение основных показателей качества препарата иммуноглобулина

Результаты исследований физико-химических, иммунологических и микробиологических свойств лекарственного препарата Антигеп-Нео, полученного в производственных условиях, представлены в таблице 2. Разработанный иммуноглобулин против гепатита В полностью соответствует требованиям Государственной фармакопеи Российской Федерации11 и Европейской фармакопеи12.

Таблица 2. Основные показатели качества иммуноглобулина Антигеп-Нео для внутривенного введения

Table 2. The main parameters of Antigep-Neo immunoglobulin for intravenous administration

Таблица составлена авторами по собственным данным / The figure was prepared by the authors using their own data.

Примечание. Fc — фрагмент иммуноглобулинов, состоящий из С-доменов тяжелой и легкой цепи; МЕ — международные единицы; СН50 — общая гемолитическая способность комплемента; HBsAg — поверхностный антиген вируса гепатита В.a Показатели качества иммуноглобулина представлены в соответствии с требованиями ОФС.1.8.1.0003.15 Государственной фармакопеи Российской Федерации XV изд., 2023 и 01/2015:1016 Ph. Eur., 11th ed., 2024.b Human Immunoglobulin BRP (Fc function and molecular size), code Y0001512, Ph. Eur.с Среднее арифметическое ± стандартное отклонение (среднее по трем сериям).

Note. Fc, immunoglobulin fragment consisting of heavy and light chain C domains; IU, international units; CH50, total haemolytic capacity of complement; HBsAg, the surface antigen of hepatitis B virus.a Immunoglobulin quality indicators are presented in accordance with the requirements of general pharmacopoeia monograph 1.8.1.0003.15 of the State Pharmacopoeia of the Russian Federation, 15th ed., 2023, and 01/2015:1016 Ph. Eur., 11th ed., 2024.b Human Immunoglobulin BRP (Fc function and molecular size), code Y0001512, Ph. Eur.c Arithmetic mean ± standard deviation (the average of the three series).

Название параметраa ParameteraНормативные требования к показателям качества Regulatory requirements for quality parametersЗначение параметраc Valuec
Электрофоретическая однородность, % Purity, %≥95 от общего содержания белка ≥95 of the total protein96,90±0,22
Молекулярные параметры Distribution of IgG molecular sizeСодержание мономеров и димеров иммуноглобулина G должно быть ≥90,0% IgG mono- and dimers not less than 90.0%99,78±0,08
Содержание полимеров и агрегатов должно быть ≤3,0% Polymers and aggregates not more than 3.0%0,15±0,01
Содержание иммуноглобулина А, мг/мл Immunoglobulin A, mg/mL≤0,50,13±0,06
Фактор концентрирования Concentration factor≥3 раза по сравнению с исходной плазмой Not less than threefold compared to baseline plasma5,13±0,04
Специфическая активность (cодержание антител к HBsAg), МЕ/мл Specific activity (the content of antibodies to HBsAg), IU/mL≥5073,95±5,07
Антикомплементарная aктивность, СН50/мг иммуноглобулина Anti-complementary activity, СН50/mg immunoglobulin1 мг белка иммуноглобулина не должен связывать более 1 ед. (СН50) комплемента 1 mg immunoglobulin should not bind more than one complement unit (СН50)0,17±0,06
Анти-А гемагглютинины Haemagglutinins anti-A≤1:64 (титр / titre)1:8
Анти-В гемагглютинины Haemagglutinins anti-B≤1:64 (титр / titre)1:8
Анти-D антитела Anti-D antibodiesСодержание анти-D антител в препарате должно быть не более, чем в положительном стандартном образце Anti-D antibodies in the drug does not exceed that of the positive reference standardСоответствует Complies
Распределение по подклассам IgG subclass distributionСоотношение подклассов иммуноглобулина G должно соответствовать нормальной плазме человека IgG subclass proportion corresponds to normal human plasmaСоответствует Complies
Активность Fc-фрагмента, % Fc function, %≥60% относительно стандартного образцаb Not less than 60% of the reference standardb170,66±17,95
Активность прекалликреина, МЕ/мл Precallikrein activity, IU/mL≤357,45±2,11
Тромбогенный потенциал Thrombogenic potentialНе должно наблюдаться образование тромба No clottingСоответствует Complies

Таким образом, разработанная технологическая платформа для получения иммуноглобулинов для в/в введения, в том числе специфических иммуноглобулинов, позволяет максимально сохранить естественную структуру иммуноглобулина с полноценной функцией Fc-фрагмента и получить высокоочищенный препарат, 99% которого представлены мономерами и димерами.

Изучение фармакокинетического профиля препарата иммуноглобулина

На следующем этапе исследования проведено сравнение фармакокинетических параметров препаратов Антигеп-Нео, Неогепатект и Антигеп. После в/в введения препарата Антигеп-Нео или Неогепатект максимальное содержание общих IgG в сыворотке крови животных достигалось уже через 1 ч, тогда как после в/м введения — через 1 сут. Кроме того, защитный титр антител против гепатита В (не менее 10 мМЕ/мл) сохранялся в течение 15 сут после в/в введения препаратов и в течение 13 сут после в/м введения препарата Антигеп (рис. 2). Фармакокинетические параметры (AUC, Сmax, Тmах, T1/2, Kel) препаратов Антигеп-Нео и Неогепатект достоверно не отличались (p>0,05) (табл. 3). Относительная биодоступность препаратов составила 1,05, что свидетельствует об их биоэквивалентности. Максимальное содержание антител составило 3672,6 и 1407,0 мМЕ/мл после в/в введения препарата Антигеп-Нео и в/м введения препарата Антигеп соответственно.

Рисунок подготовлен авторами по собственным данным / The figure was prepared by the authors using their own data

Рис. 2. Фармакокинетические профили препаратов иммуноглобулинов против гепатита В (по данным доклинического исследования). Для построения графика использовали средние значения показателя специфической активности.

Fig. 2. Pharmacokinetic profile of hepatitis B immunoglobulin preparations (according to the preclinical study). The average potency values were used to construct the diagram.

https://cdn.elpub.ru/assets/journals/biopreparat/2025/4/QzbsBGDvHw00dhUjY0UtRjhKaNYJ8KCLuqZAhSTI.jpeg

Таблица 3. Основные фармакокинетические параметры препаратов иммуноглобулинов против гепатита В (по данным доклинического исследования)

Table 3. Main pharmacokinetic parameters of the immunoglobulin preparations against hepatitis B (according to the preclinical study)

Таблица составлена авторами по собственным данным / The figure was prepared by the authors using their own data.

Примечание. МЕ — международные единицы; Cmax — максимальная концентрация лекарственного вещества; Tmax — время достижения максимальной концентрации лекарственного вещества; AUС0-480 — площадь под кривой «концентрация лекарственного вещества — время» в течение 480 ч; Kel — показатель константы элиминации; Т1/2 — время полувыведения лекарственного вещества.

В таблице представлены средние арифметические значения ± стандартные отклонения (n=20).

Note. IU, international units; Cmax, the maximal concentration of the medicinal substance; Tmax, the time to reach the maximum concentration of the medicinal substance; AUC0-480, the area under the curve “concentration of the medicinal substance vs time” for 480 hours; Kel, parameter constant elimination; T1/2, half–life of the medicinal product.

The table presents mean values ± standard deviations (n=20).

Параметр ParameterПрепарат / Preparation
Антигеп-Нео Antigep-NeoНеогепатект NeohepatectАнтигеп Antigep
Cmax, мМЕ/мл / Cmax , mIU/mL3672,0±1465,03946,0±2018,01407,0±237,0
Tmax, ч / Tmax , hour1,01,024,0
AUС0-480, мМЕ×ч/мл AUС0-480, mIU×hour/mL224937,9±89249,0214451,5±114430,3192112,4±51336,4
Kel, ч⁻¹ / Kel , hour ⁻¹0,016±0,0020,018±0,0020,007±0,001
Т1/2, ч / Т1/2 , hour42,4±4,337,8±3,693,9±12,3

Биоэквивалентность препаратов Антигеп-Нео и Неогепатект была подтверждена и в наблюдениях на добровольцах. На рисунке 3 представлен фармакокинетический профиль в линейных координатах исследуемого препарата и препарата сравнения. Как видно из полученных результатов, форма кривых, отражающих зависимость специфической активности от времени, для сравниваемых препаратов практически не отличалась.

Рисунок подготовлен авторами по собственным данным / The figure was prepared by the authors using their own data

Рис. 3. Фармакокинетические профили препаратов Антигеп-Нео и Неогепатект в линейных координатах (по данным клинического исследования на здоровых добровольцах). Для построения графика использовали средние значения показателя специфической активности.

Fig. 3. Pharmacokinetic profile of Antigep-Neo and Neohepatect preparations in linear coordinates (according to clinical study on healthy valunteers). The average values of the specific activity were used to construct the diagram.

https://cdn.elpub.ru/assets/journals/biopreparat/2025/4/SHPI7zLPiTqGfaXVEsWUDxXasR8LABNfnZuG0gg8.jpeg

Максимальное значение концентрации специфических антител IgG к ВГВ в образцах сыворотки крови добровольцев, получивших препарат Антигеп-Нео, составляло 70,0±18,3 мМЕ/мл; для препарата сравнения Неогепатект такой показатель составил 87,4±19,3 мМЕ/мл. Значение параметра AUС0-t для препарата Антигеп-Нео составляло 39790,8±8575,2 мМЕ×ч/мл; для препарата сравнения Неогепатект значение AUС0-t соответствовало 43478,7±8087,9 мМЕ×ч/мл. Анализ полученных результатов показал, что различия фармакокинетических параметров препаратов Антигеп-Нео и Неогепатект статистически не значимы (p>0,05), что свидетельствует о биоэквивалентности препаратов.

Препарат Антигеп-Нео — первый иммуноглобулин человека против гепатита В для в/в введения российского производства соответствует требованиям к препаратам иммуноглобулинов для в/в введения четвертого поколения: высокая чистота IgG с нормальным распределением по подклассам, содержание мономеров и димеров более 95%, высокая активность Fc-фрагмента молекулы, многоступенчатая схема вирусной инактивации, включающая не менее двух самостоятельных методов (сольвент-детергентная обработка, нанофильтрация и инкубация при низком значении pH) [25].

Результаты проведенного исследования могут служить основой для составления рекомендаций по применению разработанного лекарственного препарата Антигеп-Нео для экстренной профилактики гепатита B по известным схемам.

Лекарственный препарат Антигеп-Нео включен в Государственный реестр лекарственных средств России ЛП-№(005326)-(РГ-RU).

ВЫВОДЫ

Дополнительная информация. На сайте журнала «БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение» опубликованы приложения № 1 и 2.

https://doi.org/10.30895/2221-996X-2025-25-4-400-412-annex1

https://doi.org/10.30895/2221-996X-2025-25-4-400-412-annex2

Вклад авторов. Все авторы подтверждают соответствие своего авторства критериям ICMJE. Наибольший вклад распределен следующим образом: А.М. Николаева — обоснование концепции исследования, обобщение и интерпретация результатов исследования; формулировка выводов, утверждение окончательного варианта рукописи; А.В. Иванов, О.В. Белякова, А.И. Семичева — проведение экспериментальных исследований, сбор, анализ и систематизация экспериментальных данных, обобщение и интерпретация результатов исследования; Т.В. Вязникова, Т.И. Смолянова — обобщение и интерпретация результатов исследования; формулировка выводов; Е.И. Саканян — редактирование и переработка текста рукописи, утверждение окончательного варианта рукописи; А.Р. Соколова, Д.М. Трофимов — организация клинических исследований, сбор, анализ и систематизация полученных данных. Все авторы участвовали в обсуждении полученных результатов в форме научной дискуссии.

Additional information. Supplements No. 1 and 2 are published on the website of Biological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment.

https://doi.org/10.30895/2221-996X-2025-25-4-400-412-annex1

https://doi.org/10.30895/2221-996X-2025-25-4-400-412-annex2

Authors’ contributions. All the authors confirm that they meet the ICMJE criteria for authorship. The most significant contributions were as follows. A.M. Nikolaeva substantiated the study concept, generalised and interpreted study results, formulated the conclusions, and approved the final version for publication. A.V. Ivanov, O.V. Beliakova, and A.I. Semicheva conducted experimental studies, collected, analysed and collated experimental data, generalised and interpreted the study results. T.V. Vyaznikova and T.I. Smolyanova generalised and interpreted the study results, and formulated the conclusions. E.I. Sakanjan edited and revised the manuscript, and approved the final version for publication. A.R. Sokolova and D.M. Trofimov arranged clinical trials, collected, analysed and collated experimental data. All the authors participated in interpreting the obtained results in the form of a scientific discussion.

Соответствие принципам этики. Документы клинического исследования были рассмотрены на заседаниях Локального этического комитета (ЛЭК) ООО «Центр профессиональной медицины» (копия выписки из протокола № 33 от 12.10.2018, копия выписки из протокола № 34 от 28.12.2018, и копия выписки из протокола № 35 от 25.03.2019). На проведение клинического исследования получено разрешение Минздрава России № 177 от 18.04.2018. Исследование проведено на основании разрешения Совета по этике Министерства здравоохранения Российской Федерации (копия выписки из протокола № 166 от 27.03.2018).

Документы доклинического исследования были рассмотрены Комитетом инспекторов по контролю качества доклинических исследований Филиала АО «НПО «Микроген» в г. Пермь «Пермское НПО «Биомед» от 20.03.2017.

Ethics approval. The clinical trial documents were also reviewed at meetings of the Local Ethics Committee (LEK), Centre for Professional Medicine LLC (copy of Meeting Minutes No. 33 of 12.10.2018, copy of Meeting Minutes No. 34 of 28.12.2018, and copy of Meeting Minutes No. 35 of 25.03.2019). The clinical trial was approved by the Russian Ministry of Health, Approval No. 177 of 04.18.2018. The study was conducted with the permission of the Ethics Council of the Ministry of Health of the Russian Federation (a copy of Meeting Minutes No. 166 of 27.03.2018).

Preclinical study documents were approved by Committee of inspectors for quality control of preclinical studies, Perm SPA Biomed, branch of SPA Microgen, of 20.03.2017.

1. Global hepatitis report 2024: action for access in low- and middle-income countries. WHO; 2024. 2. О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2024 году: Государственный доклад. М.: Роспотребнадзор; 2025. 3. ФС.3.3.2.00011.19 Плазма человека для фракционирования. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд.; 2018. 4. ФС.3.3.2.00011.18 Иммуноглобулин человека против гепатита В для внутривенного введения. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд.; 2018. 5. https://doi.org/10.30895/2221-996X-2025-25-4-400-412-annex1 6. Руководство по проведению клинических исследований лекарственных средств. Часть первая. М.: Гриф и К; 2012. 7. https://doi.org/10.30895/2221-996X-2025-25-4-400-412-annex2 8. https://patents.google.com/patent/EA043526B1/ru 9. Решение Совета ЕЭК от 03.11.2016 № 89 «Об утверждении Правил проведения исследований биологических лекарственных средств Евразийского экономического союза». 10. Величина R должна превышать 4,0 log10 для эффективной вирусной инактивации согласно Решению Совета ЕЭК от 03.11.2016 № 89 «Об утверждении Правил проведения исследований биологических лекарственных средств Евразийского экономического союза». 11. ОФС.1.8.1.0003.15 Иммуноглобулины человека. Государственная фармакопея Российской Федерации XV изд.; 2023. 12. 01/2015:1016 Human hepatitis B immunoglobulin for intravenous administration. European Pharmacopeia 11th ed. Strasbourg: EDQM; 2024.

ReferencesWibowo DP, Agustiningsih A, Jayanti S, et al. Exploring the impact of hepatitis B immunoglobulin and antiviral interventions to reduce vertical transmission of hepatitis B virus. World J Exp Med. 2024;14(4):95960. https://doi.org/10.5493/wjem.v14.i4.95960Wibowo DP, Agustiningsih A, Jayanti S, et al. Exploring the impact of hepatitis B immunoglobulin and antiviral interventions to reduce vertical transmission of hepatitis B virus. World J Exp Med. 2024;14(4):95960. https://doi.org/10.5493/wjem.v14.i4.95960Покровский ВИ, Тотолян АА, ред. Вирусные гепатиты в Российской Федерации. Аналитический обзор. Выпуск 11. СПб.: ФБУН НИИЭМ им. Пастера; 2018. EDN: HLEEQLPokrovsky VI, Totolyan AA, eds. Viral hepatitis in the Russian Federation. Analytical review. Issue 11. St. Petersburg: Pasteur Research Institute of Economics; 2018 (In Russ.). EDN: HLEEQLПолянина АВ, Быстрова ТН. Молекулярно-эпидемиологическая характеристика вируса гепатита В в условиях массовой вакцинопрофилактики. Журнал МедиАль. 2019;(2):10–39. https://doi.org/10.21145/2225-0026-2019-2-10-39Polyanina AV, Byst­rova TN. Molecular and epidemiological characteristics of hepatitis B virus in conditions of mass vaccine prophylaxis. Journal MediAl. 2019;(2):10–39 (In Russ.). https://doi.org/10.21145/2225-0026-2019-2-10-39Новоселова АА, Полянина АВ. Эпидемиологическая характеристика парентеральных вирусных гепатитов в лечебно-профилактических/медицинских организациях. Аналитический обзор. Нижний Новгород: ФБУН ННИИЭМ им. акад. И.Н. Блохиной Роспотребнадзора; 2024. EDN: WNVGKZNovoselova AA, Polyanina AV. Epidemiological characteristics of parenteral viral hepatitis in therapeutic and preventive/medical organizations. Analytical review. Nizhny Novgorod: FBUN NNIIEM named after Academician I.N. Blokhina of Rospotrebnadzor; 2024 (In Russ.). EDN: WNVGKZПолянина АВ, Антипова ОВ. Молекулярно-эпидемиологическая характеристика вирусных гепатитов В и С у пациентов отделения родовспоможения. Аналитический обзор. Нижний Новгород: ФБУН ННИИЭМ им. академика И.Н. Блохиной Роспотребнадзора; 2023. EDN: VTFKVVPolyanina AV, Antipova OV. Molecular and epidemiological characteristics of viral hepatitis B and C in patients of the obstetric department. Analytical review. Nizhny Novgorod: FBUN NNIIEM named after Academician I.N. Blokhina of Rospotrebnadzor; 2023 (In Russ.). EDN: VTFKVVKumar M, Abbas Z, Azami M, et al. Asian Pacific association for the study of liver (APASL) guidelines: hepatitis B virus in pregnancy. Hepatol Int. 2022;16(2):211–53. https://doi.org/10.1007/s12072-021-10285-5Kumar M, Abbas Z, Azami M, et al. Asian Pacific association for the study of liver (APASL) guidelines: hepatitis B virus in pregnancy. Hepatol Int. 2022;16(2):211–53. https://doi.org/10.1007/s12072-021-10285-5Wang H, Fang JW, Gu ZW, et al. Application of hepatitis B immunoglobulin in prevention of mother-to-child transmission of chronic hepatitis B in HBsAg and HBeAg-­positive mother. J Obstet Gynaecol. 2022;42(5):877–82. https://doi.org/10.1080/01443615.2021.1946495Wang H, Fang JW, Gu ZW, et al. Application of hepatitis B immunoglobulin in prevention of mother-to-child transmission of chronic hepatitis B in HBsAg and HBeAg-­positive mother. J Obstet Gynaecol. 2022;42(5):877–82. https://doi.org/10.1080/01443615.2021.1946495Майер К-П. Гепатит и последствия гепатита. М.: ГЭОТАР-МЕД; 2004. EDN: QLFYMVMaier K-P. Hepatitis and its consequences. Moscow: GEOTAR-MED; 2004 (In Russ.). EDN: QLFYMVКоновалова ЕА, Калинина ЕН, Кормщикова ЕС и др. Лекарственные препараты иммуноглобулина человека против гепатита В: вопросы стандартизации. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2025;25(2):170–81. https://doi.org/10.30895/2221-996X-2025-621Konovalova EA, Kalinina EN, Kormshchikova ES, et al. Human hepatitis B immunoglobulins: Standardisation issues. Biological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment. 2025;25(2):170–81 (In Russ.). https://doi.org/10.30895/2221-996X-2025-621Супотницкий МВ, Елапов АА, Борисевич ИВ и др. Иммуноглобулины для внутривенного введения в аспекте показателей качества, эффективности и безопасности. Успехи современного естествознания. 2015;(5):84–94. EDN: UCMJFBSupotnitskiy MV, Elapov AA, Borisevich IV, et al. Intravenous mmunoglobulins in the view of quality, efficacy and safety profiles. Advances in Current Natural Sciences. 2015;(5):84–94 (In Russ.). EDN: UCMJFBМукомолов СЛ, Михайлов МИ. Применение иммуноглобулина против гепатита В для профилактики этой инфекции. Эпидемиология и инфекционные болезни. Актуальные вопросы. 2014;(1):47–54. EDN: RYMGIHMukomolov SL, Mikhailov MI. Use of immunoglobulin against hepatitis B for the prevention of this infection. Epidemiology and Infectious Diseases. Current Items. 2014;(1):47–54 (In Russ.). EDN: RYMGIHZuckerman JN. Review: Hepatitis B immune globulin for prevention of hepatitis B infection. J Med Virol. 2007;79(7):919–21. https://doi.org/10.1002/jmv.20816Zuckerman JN. Review: Hepatitis B immune globulin for prevention of hepatitis B infection. J Med Virol. 2007;79(7):919–21. https://doi.org/10.1002/jmv.20816Loomba R, Rowley AK, Wesley R, et al. Hepatitis B immunoglobulin and Lamivudine improve hepatitis B-related outcomes after liver transplantation: Meta-analysis. Clin Gastroenterol Hepatol. 2008;6(6):696–700. https://doi.org/10.1016/j.cgh.2008.02.055Loomba R, Rowley AK, Wesley R, et al. Hepatitis B immunoglobulin and Lamivudine improve hepatitis B-related outcomes after liver transplantation: Meta-analysis. Clin Gastroenterol Hepatol. 2008;6(6):696–700. https://doi.org/10.1016/j.cgh.2008.02.055Lee WC, Chou HS, Wu TH, et al. Low-dose anti-hepatitis B immunoglobulin regimen as prophylaxis for hepatitis B recurrence after liver transplantation. Transpl Infect Dis. 2019;21(6):e13190. https://doi.org/10.1111/tid.13190Lee WC, Chou HS, Wu TH, et al. Low-dose anti-hepatitis B immunoglobulin regimen as prophylaxis for hepatitis B recurrence after liver transplantation. Transpl Infect Dis. 2019;21(6):e13190. https://doi.org/10.1111/tid.13190Park JS, Gayam V, Pan CQ. Review article: Preventing hepatitis B graft infection in hepatitis B patients after liver transplantation: immunoglobulin vs anti-­virals. Aliment Pharmacol Ther. 2020;52(6):944–54. https://doi.org/10.1111/apt.15999Park JS, Gayam V, Pan CQ. Review article: Preventing hepatitis B graft infection in hepatitis B patients after liver transplantation: immunoglobulin vs anti-­virals. Aliment Pharmacol Ther. 2020;52(6):944–54. https://doi.org/10.1111/apt.15999Wang P, Tam N, Wang H, et al. Is hepatitis B immunoglobulin necessary in prophylaxis of hepatitis B recurrence after liver transplantation? A meta-analysis. PLoS One. 2014;9(8):e104480. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0104480Wang P, Tam N, Wang H, et al. Is hepatitis B immunoglobulin necessary in prophylaxis of hepatitis B recurrence after liver transplantation? A meta-analysis. PLoS One. 2014;9(8):e104480. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0104480Сперанская ВН, Петровских ВИ, Селезнева НР и др. Разработка метода определения Fc-функции препаратов иммуноглобулинов. В кн.: Перспективы развития производства и применения иммунобиологических препаратов в XXI веке. Пермь; 2018. С. 284–8. EDN: XWGAFFSperanskaya VN, Petrovskikh VI, Seleznyova NR, et al. Development of a method for determining Fc function of immunoglobulin preparations. In: Prospects for the development of the production and use of immunobiological drugs in the 21th century. Perm; 2018. P. 284–8 (In Russ.). EDN: XWGAFFKurkela R, Vuolas L, Vihko P. Preparation of F(ab’)2 fragments from monoclonal mouse IgG1 suitable for use in radioimaging. J Immunol Methods. 1988;110(2):229–36. https://doi.org/10.1016/0022-1759(88)90108-1Kurkela R, Vuolas L, Vihko P. Preparation of F(ab’)2 fragments from monoclonal mouse IgG1 suitable for use in radioimaging. J Immunol Methods. 1988;110(2):229–36. https://doi.org/10.1016/0022-1759(88)90108-1Wessler S, Reimer SM, Sheps MC. Biologic assay of a thrombosis-inducing activity in human serum. J Appl Physiol. 1959;14:943–6. https://doi.org/10.1152/jappl.1959.14.6.943Wessler S, Reimer SM, Sheps MC. Biologic assay of a thrombosis-inducing activity in human serum. J Appl Physiol. 1959;14:943–6. https://doi.org/10.1152/jappl.1959.14.6.943Wessler S, Reiner L, Freiman D, et al. Serum induced thrombosis studies of its induction and evolution under controlled conditions in vivo. Circulation. 1959;20:864–74. https://doi.org/10.1161/01.cir.20.5.864Wessler S, Reiner L, Freiman D, et al. Serum induced thrombosis studies of its induction and evolution under controlled conditions in vivo. Circulation. 1959;20:864–74. https://doi.org/10.1161/01.cir.20.5.864Петров ВФ, Николаева АМ, Казьянин АВ и др. Противовирусный препарат и способ получения иммуноглобулина для профилактики и лечения вирусных заболеваний. Патент РФ № 2144379; 1999. EDN: PYWECFPetrov VF, Nikolaeva AM, Kazyanin AV, et al. Antiviral preparation and method of preparing immunoglobulin for prophylaxis and treatment of patient with viral diseases. Patent of the Russian Federation No. 2144379; 1999 (In Russ.). EDN: PYWECFНиколаева АМ, Разумихин МВ, Перевозчиков АБ и др. Способ получения иммуноглобулина G для внутривенного введения. Евразийский патент № 043526; 2023.Nikolaeva AM, Razumikhin MV, Perevozchikov AB, et al. A method for obtaining immunoglobulin G for intravenous administration. Eurasian Patent No. 043526; 2023 (In Russ.).Николаева АМ, Разумихин МВ, Смолянова ТИ и др. Способ получения иммуноглобулина G против COVID-19. Евразийский патент № 044535; 2023.Nikolaeva AM, Razumikhin MV, Smolyanova TI, et al. The method of obtaining immunoglobulin G against COVID-19. Eurasian Patent No. 044535; 2023 (In Russ.).Зубкова НВ, Николаева АМ, Иванов АВ и др. Разработка оптимальных условий нанофильтрации в технологии производства иммуноглобулина G человека нормального для внутривенного введения. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2023;23(3–1):400–10. https://doi.org/10.30895/2221-996X-2023-23-3-1-400-410Zubkova NV, Nikolaeva AM, Ivanov AV, et al. Determination of optimum nanofiltration conditions for the manufacturing process of human normal immunoglobulin G for intravenous administration. Biological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment. 2023;23(3–1):400–10 (In Russ.). https://doi.org/10.30895/2221-996X-2023-23-3-1-400-410Донюш ЕК. Использование внутривенных иммуноглобулинов в клинической практике. Вопросы современной педиатрии. 2011;10(2):49–63. EDN: NWEHBRDonyush EK. Use of intravenous immunoglobulins in clinical practice. Current Pediatrics. 2011;10(2):49–63 (In Russ.). EDN: NWEHBR

The authors declare that there are no conflicts of interest present.