biopreparatБИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечениеBiological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment2221-996X2619-1156Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Productsbiopreparat-98Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESРазработка и валидация методики определения концентрации экулизумаба в плазме крови человека с применением технологии биослойной интерферометрииDevelopment and validation of a method for determination of Eculizumab concentration in human plasma by biolayer interferometryСимоновВ. М.SimonovV. M.

Научный сотрудник отдела молекулярной и клеточной биологии

noemail@neicon.ruПантюшенкоМ. С.PantushenkoM. S.

Научный сотрудник отдела аналитических методов

Staff scientist of department of analytical methods

noemail@neicon.ruКазаровА. А.KazarovA. A.

Начальник лаборатории иммунохимии отдела аналитических методов

Head of immunochemistry laboratory of department of analytical methods

noemail@neicon.ruМарковаО. А.MarkovaO. A.

Руководитель научной клинической группы управления клинических исследований

Head of scientific clinical group of clinical study department

noemail@neicon.ruПорошинГ. Н.PoroshinG. N.

Научный сотрудник отдела аналитических методов

Staff scientist of department of analytical methods

noemail@neicon.ruМеждународный биотехнологический центр «Генериум»РоссияInternational Biotechnology Center «Generium»Russian FederationАО «Генериум»РоссияJSC «Generium»Russian Federation201720022018173158164Copyright © Симонов В.М., Пантюшенко М.С., Казаров А.А., Маркова О.А., Порошин Г.Н., 20182018Симонов В.М., Пантюшенко М.С., Казаров А.А., Маркова О.А., Порошин Г.Н.Simonov V.M., Pantushenko M.S., Kazarov A.A., Markova O.A., Poroshin G.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.biopreparations.ru/jour/article/view/98

Разработана и валидирована методика определения концентрации препарата моноклонального терапевтического антитела экулизумаб в плазме крови человека в диапазоне концентраций 3-250 мкг/мл. Методика основана на взаимодействии иммобилизованного Fab-фрагмента антитела, специфичного к экулизумабу в образце плазмы крови. Методика использует принцип биослойной интерферометрии, позволяющий без внесения дополнительных меток оценить концентрацию анализируемого вещества. Результаты валидации методики сопоставлялись с результатами валидации альтернативной методики на основе иммуноферментного анализа. По итогам исследования показано преимущество методики на основе биослойной интерферометрии по основным метрологическим характеристикам - аналитическому диапазону, правильности, прецизионности и селективности.

The article describes a new method for measurement of monoclonal antibody Eculizumab concentration in human plasma in a range of 3-250 μg/ml. In this method we used an antibody Fab fragment, capable of binding to eculizumab specifically in human plasma. The method uses the biolayer interferometry for determination of Eculizumab concentration without additional tag in the analyzing substances. This method was comparatively validated along with the traditional ELISA. Comparative validation demonstrated that the biolayer interferometry based method has an advantage to the ELISA in such important statistical criteria as an analytical range, accuracy, precision, specificity and selectivity (matrix effect).

моноклональное антителоэкулизумаббиослойная интерферометриявалидацияmonoclonal antibodyEculizumabbiolayer interferometryvalidationReferencesYoung N, Maciejewski J. Genetic and environmental effects in paroxysmal nocturnal hemoglobinuria: this little PIG-A goes «Why? Why? Why?». J Clin Investigation 2000, 106: 637-41.Young N, Maciejewski J. Genetic and environmental effects in paroxysmal nocturnal hemoglobinuria: this little PIG-A goes «Why? Why? Why?». J Clin Investigation 2000, 106: 637–41.Al-Ani F, Chin-Yee I, Lazo-Langner A. Eculizumab in the management of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria: patient selection and special considerations. Therapeutics Clinical Risk Management 2016, 12: 1161-70.Al-Ani F, Chin-Yee I, Lazo-Langner A. Eculizumab in the management of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria: patient selection and special considerations. Therapeutics Clinical Risk Management 2016, 12: 1161–70.Abdiche Y, Malashock D, Pinkerton A, Pons J. Determining kinetics and affinities of protein interactions using a parallel real-time label-free biosensor, the Octet. Anal Biochem. 2008, 377: 209-17.Abdiche Y, Malashock D, Pinkerton A, Pons J. Determining kinetics and affinities of protein interactions using a parallel real-time label-free biosensor, the Octet. Anal Biochem. 2008, 377: 209–17.Do T, Ho F, Heidecker B, Witte K, Chang L, Lerner L. A rapid method for determining dynamic binding capacity of resins for the purification of proteins. Protein Expression Purification 2008, 60: 147-50.Do T, Ho F, Heidecker B, Witte K, Chang L, Lerner L. A rapid method for determining dynamic binding capacity of resins for the purification of proteins. Protein Expression Purification 2008, 60: 147–50.Правила проведения исследований биоэквивалентности лекарственных препаратов в рамках Евразийского экономического союза. Утверждены Решением Совета Евразийской экономической комиссии от 3 ноября 2016 г. № 85 /Приложение № 6. Требования к валидации биоаналитических методик испытаний и анализу исследуемых биологических образцов.Rules for conducting bioequivalence studies of medicinal products within the framework of the Eurasian Economic Union. Approved by the Decision of the Council of the Eurasian Economic Commission of November 3, 2016.EMEA/CHMP/EWP/192217/2009 Rev. 1 Corr. 2. Guideline on bioanalytical method validation. European Medicines Agency, Committee for Medicinal Products for Human Use, 2011.EMEA/CHMP/EWP/192217/2009 Rev. 1 Corr. 2. Guideline on bioanalytical method validation. European Medicines Agency, Committee for Medicinal Products for Human Use, 2011.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.