biopreparatБИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечениеBiological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment2221-996X2619-1156Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products10.30895/2221-996X-2025-25-4-428-437biopreparat-701Research ArticleДОКЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВBIOLOGICAL PRODUCTS: PRECLINICAL STIDUESИммунобиологические свойства циркулирующих штаммов Bordetella pertussis: кандидатные штаммы для изготовления коклюшных вакцинImmunobiological properties of circulating Bordetella pertussis strains: Candidate strains for production of pertussis vaccineshttps://orcid.org/0000-0001-5586-2933АлексееваИ. А.AlekseevaI. A.

Алексеева Ирина Андреевна, д-р мед. наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Irina A. Alekseeva, Dr. Sci. (Med.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

AlekseevaI@expmed.ruhttps://orcid.org/0009-0003-4061-8892ЛепиховаД. Н.LepikhovaD. N.

Лепихова Дарья Николаевна

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Darya N. Lepikhova

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

https://orcid.org/0000-0001-6316-5046БорисоваО. Ю.BorisovaO. Yu.

Борисова Ольга Юрьевна, д-р мед. наук, проф.

ул. Адмирала Макарова, д. 10, Москва, 125212

Olga Yu. Borisova, Dr. Sci. (Med.), Prof.

10 Admiral Makarov St., Moscow 125212

https://orcid.org/0000-0002-6914-3531ПименоваА. С.PimenovaA. S.

Пименова Алена Сергеевна

ул. Адмирала Макарова, д. 10, Москва, 125212

Alena S. Pimenova, Cand. Sci. (Med.)

10 Admiral Makarov St., Moscow 125212

https://orcid.org/0000-0003-2997-942XАндриевскаяИ. Ю.AndrievskayaI. Yu.

Андриевская Ирина Юрьевна

ул. Адмирала Макарова, д. 10, Москва, 125212

Irina Yu. Andrievskaya

10 Admiral Makarov St., Moscow 125212

https://orcid.org/0009-0001-8002-2407ИбрагимхалиловаИ. В.IbragimkhalilovaI. V.

Ибрагимхалилова Ильхамья Вейсаловна, канд. биол. наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Ilkhamya V. Ibragimkhalilova, Cand. Sci. (Biol.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияScientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal ProductsRussian FederationФедеральное бюджетное учреждение науки «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человекаРоссияG.N. Gabrichevsky Research Institute for Epidemiology and MicrobiologyRussian Federation202519122025254428437Copyright © Алексеева И.А., Лепихова Д.Н., Борисова О.Ю., Пименова А.С., Андриевская И.Ю., Ибрагимхалилова И.В., 20252025Алексеева И.А., Лепихова Д.Н., Борисова О.Ю., Пименова А.С., Андриевская И.Ю., Ибрагимхалилова И.В.Alekseeva I.A., Lepikhova D.N., Borisova O.Y., Pimenova A.S., Andrievskaya I.Y., Ibragimkhalilova I.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.biopreparations.ru/jour/article/view/701ВВЕДЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ. Одна из причин роста заболеваемости коклюшем заключается в адаптации патогена к имеющемуся коллективному иммунитету, сформированному в условиях вакцинопрофилактики заболевания. Мониторинг иммунобиологических свойств штаммов Bordetella pertussis необходим для прослеживания изменений адаптивного потенциала патогена в ответ на вакцинацию.

ЦЕЛЬ

ЦЕЛЬ. Сопоставление иммунобиологических свойств выделенных изолятов циркулирующих штаммов Bordetella pertussis и производственных штаммов, используемых для изготовления цельноклеточной коклюшной вакцины.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. В исследовании использованы 9 изолятов современных циркулирующих штаммов B. pertussis, выделенных от пациентов с коклюшем в 2016–2020 гг. Из штаммов изготовлены экспериментальные серии цельноклеточной коклюшной вакцины. Серии оценивали по следующим параметрам: серологические свойства и антигенная структура (серотипы); гемагглютинирующая, гемолитическая и дермонекротическая активности; вирулентность; остаточная токсичность и защитная активность. В исследовании использовали аутбредных и инбредных мышей линии F1 (C57Bl/6J×CBA). Бактериальную культуру оценивали по морфологическим и культуральным свойствам. Экспериментальные данные сопоставляли с требованиями к производственным штаммам, изложенным в МУК 4.2.2317-08 (Отбор, проверка и хранение производственных штаммов коклюшных, паракоклюшных и бронхисептикозных бактерий).

РЕЗУЛЬТАТЫ

РЕЗУЛЬТАТЫ. Из 9 изолятов циркулирующих штаммов B. pertussis выделены штаммы 16-16 и 33-18, которые соответствуют требованиям к производственным штаммам. Анализ результатов оценки защитной активности штаммов 25-16, 37-18 и 2-20 указал на целесообразность дополнительного подтверждения данного показателя из-за ограниченности опытного материала. Четыре штамма 31(2)-17, 28(1)-18, 25-16, 2-20 B. pertussis не проявили требуемой защитной активности (<8 МЕ/мл).

ВЫВОДЫ

ВЫВОДЫ. Свойства изолятов 16-16 и 33-18 B. pertussis соответствуют всем требованиям к производственным штаммам. Исследованные штаммы имеют современный генотип и перспективны с точки зрения их практического использования в качестве кандидатов для замены устаревших производственных штаммов B. pertussis при изготовлении коклюшных вакцин.

INTRODUCTION

INTRODUCTION. One of the reasons for increased pertussis cases is the pathogen adapting to the existing collective immunity formed under conditions of vaccine prophylaxis. Monitoring immunobiological properties of Bordetella pertussis strains is necessary to track changes in the pathogen adaptive potential triggered by vaccination.

AIM

AIM. This study aimed to compare immunobiological properties of isolated circulating Bordetella pertussis strains and strains used to produce whole-cell pertussis vaccine.

MATERIALS AND METHODS

MATERIALS AND METHODS. The study used nine isolates of modern circulating strains of B. pertussis. Experimental series of whole-cell pertussis vaccine was made using strains iso­lated from the patients with pertussis in 2016–2020. The series was evaluated by the following parameters: serological properties and antigenic structure (serotypes); haemagglutinating, haemolytic, and dermonecrotic effect; virulence; residual toxicity and protective properties. The study used outbred and inbred F1 mice (C57Bl/6J×CBA) and evaluated morphological and cultural properties of the bacteria. Experimental data were compared with the requirements for production strains set out in the local guidelines MUK 4.2.2317-08 (Selection, testing and storage of production strains of pertussis, parapertussis and bronchisepticosis bacteria).

RESULTS

RESULTS. Strains 16-16 and 33-18 were obtained from nine isolates of circulating B. pertussis strains meeting the requirements for production strains. The assessment results of protective activity for strains 25-16, 37-18, and 2-20 were analysed and showed the necessity of further confirming this value due to the limited experimental material. Four B. pertussis strains, 31(2)-17, 28(1)-18, 25-16, and 2-20, did not show the required protective activity (<8 IU/mL).

CONCLUSIONS

CONCLUSIONS. The properties of isolates 16-16 and 33-18 of B. pertussis meet all the requirements for production strains. The test strains have a modern genotype and are prospectively applicable as candidates for replacing obsolete B. pertussis strains in production of pertussis vaccines.

Bordetella pertussisкоклюшсеротипраспространенностьвирулентностьцельноклеточная коклюшная вакцинавакцинациягенотипгеномциркулирующие штаммыBordetella pertussispertussisserotypeincidencevirulencewhole-cell pertussis vaccinevaccinationgenotypegenomecirculating strainsРабота выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России № 056-00001-25-00 на проведение прикладных научных исследований (номер государственного учета НИР № 124022200103-5).This study was conducted by the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products as part of the applied research funded under State Assignment No. 056-00001-25-00 (R&D Registry No. 124022200103-5).ReferencesБабаченко ИВ, Нестерова ЮВ, Чернышова ЮЮ и др. Клинико-эпидемиологические аспекты коклюша у детей в условиях массовой вакцинопрофилактики. Журнал инфектологии. 2019;11(2):88–96. https://doi.org/10.22625/2072-6732-2019-11-2-88-96Babachenko IV, Nesterova YuV, Chernyshova YuYu, et al. Clinical-epidemiological aspects of whooping cough in children in conditions of mass vaccinoprophylactics. Journal Infectology. 2019;11(2):88–96 (In Russ.). https://doi.org/10.22625/2072-6732-2019-11-2-88-96Краснов ВВ, Ильяненков КФ, Павлович ЛР, Кузмичева МВ. Коклюш у детей первого года жизни. Детские инфекции. 2018;17(1):12–7. https://doi.org/10.22627/2072-8107-2018-17-1-12-17Krasnov VV, Ilyanenkov KF, Pavlovich LR, Kuzmicheva MV. Pertussis in infants. Children Infections. 2018;1(1):12–7 (In Russ.). https://doi.org/10.22627/2072-8107-2018-17-1-12-17Esposito S, Stefanelli P, Fry NK, et al. Pertussis prevention: Reasons for resurgence, and differences in the current acellular pertussis vaccines. Front Immunol. 2019;10:1344. https://doi.org/10.3389/fimmu.2019.01344Esposito S, Stefanelli P, Fry NK, et al. Pertussis prevention: Reasons for resurgence, and differences in the current acellular pertussis vaccines. Front Immunol. 2019;10:1344. https://doi.org/10.3389/fimmu.2019.01344Mir-Cros A, Moreno-Mingorance A, Martin-Gomez MT, et al. Pertactin-deficient Bordetella pertussis with unusual mechanism of pertactin disruption, Spain, 1986–2018. Emerg Infect Dis. 2022;28(5):967–76. https://doi.org/10.3201/eid2805.211958Mir-Cros A, Moreno-Mingorance A, Martin-Gomez MT, et al. Pertactin-deficient Bordetella pertussis with unusual mechanism of pertactin disruption, Spain, 1986–2018. Emerg Infect Dis. 2022;28(5):967–76. https://doi.org/10.3201/eid2805.211958Burns DL, Meade BD, Messionnier NE. Pertussis resurgence: Perspectives from the Working Group Meeting on pertussis on the causes, possible paths forward, and gaps in our knowledge. J Infect Dis. 2014;209(Suppl 1):S32–5. https://doi.org/10.1093/infdis/jit491Burns DL, Meade BD, Messionnier NE. Pertussis resurgence: Perspectives from the Working Group Meeting on pertussis on the causes, possible paths forward, and gaps in our knowledge. J Infect Dis. 2014;209(Suppl 1):S32–5. https://doi.org/10.1093/infdis/jit491Mooi FR, Van Der Maas NA, De Melker HE. Pertussis resurgence: Waning immunity and pathogen adaptation — two sides of the same coin. Epidemiol Infect. 2014;142(4):685–94. https://doi.org/10.1017/S0950268813000071Mooi FR, Van Der Maas NA, De Melker HE. Pertussis resurgence: Waning immunity and pathogen adaptation — two sides of the same coin. Epidemiol Infect. 2014;142(4):685–94. https://doi.org/10.1017/S0950268813000071Zomer A, Otsuka N, Hiramatsu Y, et al. Bordetella pertussis population dynamics and phylogeny in Japan after adoption of acellular pertussis vaccines. Microb Genom. 2018;4(5):e000180. https://doi.org/10.1099/mgen.0.000180Zomer A, Otsuka N, Hiramatsu Y, et al. Bordetella pertussis population dynamics and phylogeny in Japan after adoption of acellular pertussis vaccines. Microb Genom. 2018;4(5):e000180. https://doi.org/10.1099/mgen.0.000180Mir-Cros A, Moreno-Mingorance A, Martín-Gómez MT, et al. Population dynamics and antigenic drift of Bordetella pertussis following whole cell vaccine replacement, Barcelona, Spain, 1986–2015. Emerg Microbes Infect. 2019;8(1):1711–20. https://doi.org/10.1080/22221751.2019.1694395Mir-Cros A, Moreno-Mingorance A, Martín-Gómez MT, et al. Population dynamics and antigenic drift of Bordetella pertussis following whole cell vaccine replacement, Barcelona, Spain, 1986–2015. Emerg Microbes Infect. 2019;8(1):1711–20. https://doi.org/10.1080/22221751.2019.1694395Ross PJ, Sutton CE, Higgins S, et al. Relative contribution of Th1 and Th17 cells in adaptive immunity to Bordetella pertussis: Towards the rational design of an improved acellular pertussis vaccine. PLoS Pathog. 2013;9(4):e1003264. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003264Ross PJ, Sutton CE, Higgins S, et al. Relative contribution of Th1 and Th17 cells in adaptive immunity to Bordetella pertussis: Towards the rational design of an improved acellular pertussis vaccine. PLoS Pathog. 2013;9(4):e1003264. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003264Warfel JM, Zimmerman LI, Merkel TJ. Acellular pertussis vaccines protect against disease but fail to prevent infection and transmission in a nonhuman primate model. Proc Natl Acad Sci USA. 2014;111(2):787–92. https://doi.org/10.1073/pnas.1314688110Warfel JM, Zimmerman LI, Merkel TJ. Acellular pertussis vaccines protect against disease but fail to prevent infection and transmission in a nonhuman primate model. Proc Natl Acad Sci USA. 2014;111(2):787–92. https://doi.org/10.1073/pnas.1314688110Борисова ОЮ, Гадуа НТ, Пименова АС и др. Структура популяции штаммов возбудителя коклюша на территории России. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2016;15(4):22–8. https://doi.org/10.31631/2073-3046-2016-15-4-22-28Borisova OYu, Gadua NT, Pimenova AS, et al. Structure of population of strains of the Bordetella pertussis in the Russia. Epidemiology and Vaccinal Prevention. 2016;15(4):22–8 (In Russ.). https://doi.org/10.31631/2073-3046-2016-15-4-22-28Koide K, Yao SM, Chiang C-S, et al. Genotyping and macrolide-resistant mutation of Bordetella pertussis in East and South-East Asia. J Glob Antimicrob Resist. 2022;31:263–9. https://doi.org/10.1016/j.jgar.2022.10.007Koide K, Yao SM, Chiang C-S, et al. Genotyping and macrolide-resistant mutation of Bordetella pertussis in East and South-East Asia. J Glob Antimicrob Resist. 2022;31:263–9. https://doi.org/10.1016/j.jgar.2022.10.007Barkoff AM, Mertsola J, Pierard D, et al. Surveillance of circulating Bordetella pertussis strains in Europe during 1998 to 2015. J Clin Microbiol. 2018;56(5):e01998-17. https://doi.org/10.1128/JCM.01998-17Barkoff AM, Mertsola J, Pierard D, et al. Surveillance of circulating Bordetella pertussis strains in Europe during 1998 to 2015. J Clin Microbiol. 2018;56(5):e01998-17. https://doi.org/10.1128/JCM.01998-17Moosa F, du Plessis M, Weigand MR, et al. Genomic characterization of Bordetella pertussis in South Africa, 2015–2019. Microb Genom. 2023;9(12):001162. https://doi.org/10.1099/mgen.0.001162Moosa F, du Plessis M, Weigand MR, et al. Genomic characterization of Bordetella pertussis in South Africa, 2015–2019. Microb Genom. 2023;9(12):001162. https://doi.org/10.1099/mgen.0.001162Fu P, Zhou J, Yang C, et al. Molecular evolution and increasing macrolide resistance of Bordetella pertussis, Shanghai, China, 2016–2022. Emerg Infect Dis. 2023;30(1):29–38. https://doi.org/10.3201/eid3001.221588Fu P, Zhou J, Yang C, et al. Molecular evolution and increasing macrolide resistance of Bordetella pertussis, Shanghai, China, 2016–2022. Emerg Infect Dis. 2023;30(1):29–38. https://doi.org/10.3201/eid3001.221588Weigand MR, Williams MM, Peng Y, et al. Genomic survey of Bordetella pertussis diversity, United States, 2000–2013. Emerg Infect Dis. 2019;25(4):780–3. https://doi.org/10.3201/eid2504.180812Weigand MR, Williams MM, Peng Y, et al. Genomic survey of Bordetella pertussis diversity, United States, 2000–2013. Emerg Infect Dis. 2019;25(4):780–3. https://doi.org/10.3201/eid2504.180812Ma L, Caulfield A, Dewan KK, Harvill ET. Pertactin-deficient Bordetella pertussis, vaccine-driven evolution, and reemergence of pertussis. Emerg Infect Dis. 2021;27(6):1561–6. https://doi.org/10.3201/eid2706.203850Ma L, Caulfield A, Dewan KK, Harvill ET. Pertactin-deficient Bordetella pertussis, vaccine-driven evolution, and reemergence of pertussis. Emerg Infect Dis. 2021;27(6):1561–6. https://doi.org/10.3201/eid2706.203850Belcher T, Preston A. Bordetella pertussis evolution in the (functional) genomics era. Pathog Dis. 2015;73(8):ftv064. https://doi.org/10.1093/femspd/ftv064Belcher T, Preston A. Bordetella pertussis evolution in the (functional) genomics era. Pathog Dis. 2015;73(8):ftv064. https://doi.org/10.1093/femspd/ftv064Борисова ОЮ, Андриевская ИЮ, Пименова АС и др. Генотипическая характеристика штаммов Bordetella pertussis — кандидатов для получения коклюшного компонента вакцинных препаратов (сообщение 1). Вестник РГМУ. 2024;(2):4–9. https://doi.org/10.24075/vrgmu.2024.017Borisova OYu, Andrievskaya IYu, Pimenova AS, et al. Genotypic characteristics of Bordetella pertussis, candidate strains for production of pertussis component of vaccines (statement I). Bulletin of RSMU. 2024;(2):4–9 (In Russ.). https://doi.org/10.24075/vrgmu.2024.017Алексеева ИА, Лепихова ДН, Борисова ОЮ и др. Влияние условий хранения цельноклеточной коклюшной вакцины на ее токсичность: исследование на аутбредных мышах. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2025;25(1):111–20. https://doi.org/10.30895/2221-996X-2025-25-1-111-120Alekseeva IA, Lepikhova DN, Borisova OYu, et al. Influence of storage conditions on the toxicity of whole-cell pertussis vaccine in outbred mice. Biological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment. 2025;25(1):111–20 (In Russ.). https://doi.org/10.30895/2221-996X-2025-25-1-111-120Hiramatsu Y, Miyaji Y, Otsuka N, et al. Significant decrease in pertactin-deficient Bordetella pertussis isolates, Japan. Emerg Infect Dis. 2017;23(4):699–701. https://doi.org/10.3201/eid2304.161575Hiramatsu Y, Miyaji Y, Otsuka N, et al. Significant decrease in pertactin-deficient Bordetella pertussis isolates, Japan. Emerg Infect Dis. 2017;23(4):699–701. https://doi.org/10.3201/eid2304.161575Kallonen T, Mertsola J, Mooi FR, He Q. Rapid detection of the recently emerged Bordetella pertussis strains with the ptxP3 pertussis toxin promoter allele by real-time PCR. Clin Microbiol Infect. 2012;18(9):E377–9. https://doi.org/10.1111/j.1469-0691.2012.04000.xKallonen T, Mertsola J, Mooi FR, He Q. Rapid detection of the recently emerged Bordetella pertussis strains with the ptxP3 pertussis toxin promoter allele by real-time PCR. Clin Microbiol Infect. 2012;18(9):E377–9. https://doi.org/10.1111/j.1469-0691.2012.04000.xPetersen RF, Dalby T, Dragsted DM, et al. Temporal trends in Bordetella pertussis populations, Denmark, 1949–2010. Emerg Infect Dis. 2012;18(5):767–74. https://doi.org/10.3201/eid1805.110812Petersen RF, Dalby T, Dragsted DM, et al. Temporal trends in Bordetella pertussis populations, Denmark, 1949–2010. Emerg Infect Dis. 2012;18(5):767–74. https://doi.org/10.3201/eid1805.110812Schmidtke AJ, Boney KO, Martin SW, et al. Population diversity among Bordetella pertussis isolates, United States, 1935–2009. Emerg Infect Dis. 2012;18(8):1248–55. https://doi.org/10.3201/eid1808.120082Schmidtke AJ, Boney KO, Martin SW, et al. Population diversity among Bordetella pertussis isolates, United States, 1935–2009. Emerg Infect Dis. 2012;18(8):1248–55. https://doi.org/10.3201/eid1808.120082Mooi FR, van Loo IHM, van Gent M, et al. Bordetella pertussis strains with increased toxin production associated with pertussis resurgence. Emerg Infect Dis. 2009;15(8):1206–13. https://doi.org/10.3201/eid1508.081511Mooi FR, van Loo IHM, van Gent M, et al. Bordetella pertussis strains with increased toxin production associated with pertussis resurgence. Emerg Infect Dis. 2009;15(8):1206–13. https://doi.org/10.3201/eid1508.081511Carbonetti NH. Pertussis toxin and adenylate cyclase toxin: key virulence factors of Bordetella pertussis and cell biology tools. Future Microbiol. 2010;5(3):455–69. https://doi.org/10.2217/fmb.09.133Carbonetti NH. Pertussis toxin and adenylate cyclase toxin: key virulence factors of Bordetella pertussis and cell biology tools. Future Microbiol. 2010;5(3):455–69. https://doi.org/10.2217/fmb.09.133Pierce C, Klein N, Peters M. Is leukocytosis a predictor of mortality in severe pertussis infection? Intensive Care Med. 2000;26(10):1512–4. https://doi.org/10.1007/s001340000587Pierce C, Klein N, Peters M. Is leukocytosis a predictor of mortality in severe pertussis infection? Intensive Care Med. 2000;26(10):1512–4. https://doi.org/10.1007/s001340000587Advani A, Gustafsson L, Carlsson R-M, Donnelly D. Clinical outcome of pertussis in Sweden: association with pulsed-field gel electrophoresis profiles and serotype. APMIS. 2007;115(6):736–42. https://doi.org/10.1111/j.1600-0463.2007.apm_628.xAdvani A, Gustafsson L, Carlsson R-M, Donnelly D. Clinical outcome of pertussis in Sweden: association with pulsed-field gel electrophoresis profiles and serotype. APMIS. 2007;115(6):736–42. https://doi.org/10.1111/j.1600-0463.2007.apm_628.xБасов АА, Высочанская СО, Цвиркун ОВ и др. Критерии оценки эпидемиологической ситуации по коклюшу в Российской Федерации. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2024;23(1):4–13. https://doi.org/10.31631/2073-3046-2024-23-1-4-13Basov AA, Vysochanskaya SO, Tsvirkun OV, et al. Criteria for assessing the epidemiological situation of pertussis in Russian Federation. Epidemiology and Vaccinal Prevention. 2024;23(1):4–13 (In Russ.). https://doi.org/10.31631/2073-3046-2024-23-1-4-13Chodorowska M, Kuklinska D. Restrykcyjna analiza DNA paleczek Bordetella pertussis wyizolowanych od chorych na krztusiec w 1968 roku i w latach 1995–98 oraz szczepow B. pertussis stosowanych do produkcji krajowej szczepionki przeciwkrztuscowej. Med Dośw Mikrobiol. 2001;52(2):111–7 (In Polish).Chodorowska M, Kuklinska D. Restrykcyjna analiza DNA paleczek Bordetella pertussis wyizolowanych od chorych na krztusiec w 1968 roku i w latach 1995–98 oraz szczepow B. pertussis stosowanych do produkcji krajowej szczepionki przeciwkrztuscowej. Med Dośw Mikrobiol. 2001;52(2):111–7 (In Polish).

The authors declare that there are no conflicts of interest present.