Алексеева Ирина Андреевна, д-р мед. наук
Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051
Irina A. Alekseeva, Dr. Sci. (Med.)
8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051
Лепихова Дарья Николаевна
Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051
Darya N. Lepikhova
8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051
Борисова Ольга Юрьевна, д-р мед. наук, проф.
ул. Адмирала Макарова, д. 10, Москва, 125212
Olga Yu. Borisova, Dr. Sci. (Med.), Prof.
Admiral Makarov St., 10, Moscow 125212
Пименова Алена Сергеевна, канд. мед. наук
ул. Адмирала Макарова, д. 10, Москва, 125212
Alena S. Pimenova, Cand. Sci. (Med.)
Admiral Makarov St., 10, Moscow 125212
Андриевская Ирина Юрьевна
ул. Адмирала Макарова, д. 10, Москва, 125212
Irina Yu. Andrievskaya
Admiral Makarov St., 10, Moscow 125212
Ибрагимхалилова Ильхамья Вейсаловна, канд. биол. наук
Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051
Ilkhamya V. Ibragimkhalilova, Cand. Sci. (Biol.)
8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051
ВВЕДЕНИЕ. Цельноклеточная коклюшная вакцина (ЦКВ) обладает высокой эффективностью, однако побочное действие (повышение температуры, отечность в месте введения, аллергические реакции, фебрильные судороги) ограничивает ее широкое использование. Актуальными являются исследования, направленные на снижение токсических свойств ЦКВ.
ЦЕЛЬ. Оценка токсических свойств цельноклеточной коклюшной вакцины в экспериментах на мышах при изменении условий в процессе хранения вакцины.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Использовали штаммы Bordetella pertussis — производственные штаммы, а также циркулирующие штаммы, выделенные от больных коклюшем детей. Десять образцов ЦКВ готовили путем проведения смыва выращенной бактериальной культуры и внесения в суспензию формальдегида (инактивирующий агент) и тиомерсала (консервант). Использовали аутбредных мышей, которых распределяли в 10 опытных групп и 1 контрольную, содержащих по 10 животных каждая. Мышам опытных групп внутрибрюшинно вводили образцы ЦКВ, мышам контрольной группы — 0,9% раствор натрия хлорида с тиомерсалом. Проводили взвешивание мышей до введения препарата, а также на 1 и 7 сут после введения. Сроки взвешивания животных обусловлены сроками максимального проявления действия основных токсинов B. pertussis — липоолигосахарида (на 1 сут) и коклюшного токсина (на 7 сут). Определяли значения показателя специфической безопасности образцов ЦКВ на протяжении срока хранения вакцины (12 мес.) как отношение прироста массы тела мышей группы опытных животных к приросту массы тела контрольных животных, выраженное в процентах.
РЕЗУЛЬТАТЫ. Введение животным коклюшной суспензии после ее выдерживания с инактивирующим агентом в условиях хранения в течение 1–3 мес. приводило к снижению массы тела мышей на (-2,84%) относительно исходного веса на 1 сут после введения вакцины, а в случае коклюшной суспензии, инактивированной в течение 10–12 мес., снижение массы тела составило (-1,62%). Установлено, что при введении коклюшной суспензии, выдержанной с инактивирующим агентом в течение 1–3 мес., прирост массы тела мышей через 7 сут после введения вакцины составил 31,0% по отношению к исходному весу, а показатель специфической безопасности — 69,38%. В случае коклюшной суспензии, инактивированной в течение 10–12 мес., прирост массы тела составлял 43,22%, а показатель специфической безопасности — 84,31%. Это указывает на снижение остаточной токсичности вакцины через 12 мес., а также на то, что процесс обезвреживания коклюшного токсина носит пролонгированный характер и продолжается на протяжении всего срока хранения вакцины. Величина коэффициента корреляции Спирмена, характеризующая силу связи между значениями специфической безопасности и приростом массы тела мышей, составила: на 7 сут — 0,55 (р<0,01), что указывает на заметную силу связи между изучаемыми показателями; на 1 сут — 0,349 (р<0,01), что свидетельствует об умеренной силе связи.
ВЫВОДЫ. Полученные результаты продемонстрировали более полную детоксикацию коклюшного токсина в образцах вакцин, выдержанных с инактивирующим агентом не менее 10–12 мес. в условиях хранения. Для повышения безопасности АКДС-вакцины целесообразно использовать серии ЦКВ после 10–12 мес. хранения в регламентированных условиях.
INTRODUCTION. Although whole-cell pertussis vaccine (WCPV) is highly effective, its widespread use is limited by adverse reactions (increased body temperature, administration site oedema, allergic reactions, and febrile seizures). Therefore, there is a need to explore strategies for reducing the toxicity of WCPV.
AIM. This study aimed to evaluate the toxicity of WCPV in mice after storing WCPV under different conditions.
MATERIALS AND METHODS. This study focused on Bordetella pertussis strains, including vaccine production strains and circulating strains isolated from children with pertussis. Ten WCPV samples were prepared by washing the grown cultures and adding formaldehyde (inactivating agent) and thimerosal (preservative) to the bacterial suspensions. Outbred mice were randomised into 10 test groups and 1 control group (10 animals per group). The test groups received intraperitoneal injections of the WCPV samples, while the control group received 0.9% sodium chloride with thimerosal. Mice were weighed before injection, as well as on Days 1 and 7 after injection. The weighing was timed to coincide with the peak activity of the main B. pertussis toxins, lipo-oligosaccharide (Day 1) and pertussis toxin (Day 7). The specific safety index was calculated as the ratio of the weight gain of the test animals to the weight gain of the control animals (in %) and was monitored for the WCPV samples throughout the WCPV shelf life (12 months).
RESULTS. On Day 1 after injection, the B. pertussis suspensions kept with the inactivating agent under recommended storage conditions for 1–3 months caused a 2.84% decrease in the body weight of mice from the baseline weight, and the suspensions inactivated for 10–12 months caused a 1.62% weight loss relative to the baseline. On Day 7 after injection, the mice that received the B. pertussis suspensions inactivated for 1–3 months showed a 31.0% increase from the baseline weight, and the mice that received the suspensions inactivated for 10–12 months demonstrated a 43.22% weight gain. The suspensions inactivated for 1–3 months and 10–12 months had specific safety indices of 69.38% and 84.31%, respectively. According to these findings, the residual toxicity of WCPV decreased after 12 months of storage, and the process of pertussis toxin inactivation lasted throughout the entire WCPV shelf life. Spearman’s correlation coefficient, characterising the strength of the relationship between the specific safety index and the weight gain of mice, was 0.55 (p<0.01) on Day 7 (a noticeably strong relationship) and 0.349 (p<0.01) on Day 1 (a moderately strong relationship).
CONCLUSIONS. The results suggest a more complete detoxification of pertussis toxin in the samples of WCPV kept with the inactivating agent under recommended storage conditions for at least 10–12 months compared with that after a shorter period. To improve the safety of DTP vaccines, it is advisable to use WCPV batches stored for 10–12 months.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.