biopreparatБИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечениеBiological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment2221-996X2619-1156Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products10.30895/2221-996X-2024-24-4-389-402biopreparat-595Research ArticleТЕМА НОМЕРА: ИННОВАЦИОННЫЕ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫISSUE TOPIC: INNOVATIVE IMMUNOBIOLOGICALSОпределение специфической активности ротавирусной вакцины на основе вирусоподобных частиц с использованием иммуноферментного анализа: разработка и валидация методикиEnzyme-linked immunosorbent assay to determine the potency of a rotavirus vaccine based on virus-like particles: analytical procedure development and validationhttps://orcid.org/0000-0001-5274-224XФилатовИ. Е.FilatovI. E.

Филатов Илья Евгеньевич

ул. Гамалеи, д. 18, Москва, 123098

Ilya E. Filatov

18 Gamaleya St., Moscow 123098

filat69rus@yandex.ruhttps://orcid.org/0009-0003-1545-3969СилаенковаМ. М.SilaenkovaM. M.

Силаенкова Мария Михайловна

ул. Гамалеи, д. 18, Москва, 123098

Maria M. Silaenkova

18 Gamaleya St., Moscow 123098

surgeon14_07_1994@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-2150-5764ЦибезовВ. В.TsibezovV. V.

Цибезов Валерий Владимирович, канд. биол. наук

ул. Гамалеи, д. 18, Москва, 123098

Valeriy V. Tsibezov, Cand. Sci. (Biol.)

18 Gamaleya St., Moscow 123098

tsibezov@yandex.ruhttps://orcid.org/0009-0002-8179-1379БаландинаМ. В.BalandinaM. V.

Баландина Марина Владимировна, канд. биол. наук

ул. Гамалеи, д. 18, Москва, 123098

Marina V. Balandina, Cand. Sci. (Biol.)

18 Gamaleya St., Moscow 123098

mbalandina77@mail.ruhttps://orcid.org/0009-0006-9608-4713НоркинаС. Н.NorkinaS. N.

Норкина Светлана Николаевна, канд. биол. наук

ул. Гамалеи, д. 18, Москва, 123098

Svetlana N. Norkina, Cand. Sci. (Biol.)

18 Gamaleya St., Moscow 123098

snork9@list.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5757-3809ЛатышевО. Е.LatyshevO. E.

Латышев Олег Евгеньевич, канд. биол. наук

ул. Гамалеи, д. 18, Москва, 123098

Oleg E. Latyshev, Cand. Sci. (Biol.)

18 Gamaleya St., Moscow 123098

oleglat80@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0723-9749ЕлисееваО. В.EliseevaO. V.

Елисеева Олеся Васильевна, канд. биол. наук

ул. Гамалеи, д. 18, Москва, 123098

Olesja V. Eliseeva, Cand. Sci. (Biol.)

18 Gamaleya St., Moscow 123098

olesenka80@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1734-5369ЧерепушкинС. А.CherepushkinS. A.

Черепушкин Станислав Андреевич

ул. Гамалеи, д. 18, Москва, 123098

Stanislav A. Cherepushkin

18 Gamaleya St., Moscow 123098

cherepushkin1@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-6141-9361ГребенниковаТ. В.GrebennikovaT. V.

Гребенникова Татьяна Владимировна, д-р биол. наук, проф., член-корр. РАН

ул. Гамалеи, д. 18, Москва, 123098

Tatyana V. Grebennikova, Dr. Sci. (Biol.), Prof., Corresponding Member of the Russian Academy of Sciences

18 Gamaleya St., Moscow 123098

t_grebennikova@mail.ruФедеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияNational Research Centre for Epidemiology and Microbiology named after honorary academician N.F. GamaleyaRussian Federation202422122024244389402Copyright © Филатов И.Е., Силаенкова М.М., Цибезов В.В., Баландина М.В., Норкина С.Н., Латышев О.Е., Елисеева О.В., Черепушкин С.А., Гребенникова Т.В., 20242024Филатов И.Е., Силаенкова М.М., Цибезов В.В., Баландина М.В., Норкина С.Н., Латышев О.Е., Елисеева О.В., Черепушкин С.А., Гребенникова Т.В.Filatov I.E., Silaenkova M.M., Tsibezov V.V., Balandina M.V., Norkina S.N., Latyshev O.E., Eliseeva O.V., Cherepushkin S.A., Grebennikova T.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.biopreparations.ru/jour/article/view/595ВВЕДЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ. Создание вакцин на основе вирусоподобных частиц (virus-like particles, VLP), состоящих из рекомбинантных белков ротавируса типа А человека, имитирующих структуру нативного вируса, но не обладающих инфекционной активностью, является перспективным направлением для вакцинопрофилактики. Для оценки специфической активности таких вакцин оптимальным представляется применение метода иммуноферментного анализа (ИФА) для определения титра специфических IgG-антител к белкам ротавируса А в образцах сыворотки крови иммунизированных животных.

ЦЕЛЬ

ЦЕЛЬ. Разработка и валидация методики оценки специфической активности ротавирусной вакцины на основе VLP с использованием метода ИФА для определения уровня антител к белкам VP2/6 ротавируса А в образцах сыворотки крови иммунизированных морских свинок.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Оценку специфической активности ротавирусной вакцины на основе VLP проводили in vivo с использованием трех видов экспериментальных животных: мышей линии BALB/c, морских свинок породы агути и новорожденных карликовых свиней. Вакцину в дозе 30 мкг вводили животным трехкратно внутримышечно. Оценивали уровни специфических иммуноглобулинов класса G (IgG) к белкам VP2/6 ротавируса А и вируснейтрализующих антител (ВНА) в образцах сыворотки крови животных методом непрямого ИФА и в реакции нейтрализации соответственно. Определяли среднее геометрическое значение титров (СГТ) антител. Валидацию методики оценки специфической активности проводили на двух сериях вакцины с использованием стандартных методов статистического анализа.

РЕЗУЛЬТАТЫ

РЕЗУЛЬТАТЫ. Проведено сравнение уровней специфических IgG-антител к белкам VP2/6 и ВНА к ротавирусу типа A через 14 сут после первой, второй и третьей иммунизаций. Значительное увеличение титра антител и статистически значимые различия (p<0,05) между группами наблюдались уже после второй иммунизации. Двукратная иммунизация вакциной приводила к образованию IgG-антител и ВНА у новорожденных карликовых свиней (СГТ антител — 200,0 и 108,9 соответственно) и морских свинок (СГТ антител — 12800 и 2600 соответственно). У иммунизированных мышей наблюдался значительный рост уровня специфических IgG-антител (СГТ — 572440). В качестве релевантной модели для валидации методики ИФА для определения специфической активности были выбраны морские свинки при использовании двукратной схемы иммунизации. По результатам валидационных испытаний двух серий вакцины установлено, что метод ИФА удовлетворял критериям приемлемости по характеристикам: специфичность, повторяемость (коэффициент вариации не более 15% — для 1 и 2 серий вакцины 12,4 и 7,7%) и промежуточная прецизионность (коэффициент вариации не более 15% — для 1 и 2 серий вакцины 6,9 и 10,2%).

ВЫВОДЫ

ВЫВОДЫ. Разработана и валидирована методика оценки специфической активности ротавирусной вакцины на основе VLP с использованием ИФА. Метод ИФА может быть использован для контроля показателя качества «Специфическая активность» ротавирусной вакцины на основе VLP.

INTRODUCTION

INTRODUCTION. Rotavirus vaccines based on virus-like particles (VLPs), non-infectious recombinant proteins of human rotavirus A that mimic the structure of the native virus, show promise for preventive vaccination. Presumably, the optimal method to determine the potency of VLP-based rotavirus vaccines is the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) method used to measure the titre of specific IgG antibodies to rotavirus A proteins in serum samples from vaccinated animals.

AIM

AIM. This study aimed at assessing the potency of a VLP-based rotavirus vaccine by developing and validating an analytical procedure using ELISA to determine the levels of antibodies to the VP2 and VP6 proteins of rotavirus A in serum samples from vaccinated guinea pigs.

MATERIALS AND METHODS

MATERIALS AND METHODS. The potency of the VLP-based rotavirus vaccine was determined in vivo in three types of experimental animals, including BALB/c mice, agouti guinea pigs, and newborn minipigs. The animals received three intramuscular injections of the vaccine at a dose of 30 µg. This study used the indirect ELISA method to quantify VP2- and VP6-specific immunoglobulin G (IgG) antibodies and the virus-neutralisation test to measure neutralising antibodies (nAbs) to rotavirus A in animal serum samples. The study involved calculating the geometric mean titres (GMTs) of antibodies. The authors validated the analytical procedure for potency assessment on two batches of the vaccine using standard statistical analysis methods.

RESULTS

RESULTS. The study compared VP2- and VP6-specific IgG and nAb levels 14 days after the first, second, and third vaccinations. The authors observed a significant increase in antibody titres and statistically significant (p<0.05) differences between groups as early as after the second vaccination. Double vaccination induced rotavirus-specific IgGs and nAbs in newborn minipigs (GMTs of 200.0 and 108.9, respectively) and guinea pigs (GMTs of 12,800 and 2,600, respectively). Vaccinated mice demonstrated a significant increase in rotavirus-specific IgG levels (GMT of 572,440). Guinea pigs were selected as a relevant model for validating the ELISA-based potency assessment procedure. The validation study used a double vaccination scheme. The validation using two batches of the VLP-based rotavirus vaccine indicated that the ELISA-based analytical procedure met the acceptance criteria for specificity, repeatability, and intermediate precision. The repeatability assessment resulted in a coefficient of variation (CV) of 12.4% for batch 1 and a CV of 7.7% for batch 2, whereas the intermediate precision assessment showed a CV of 6.9% for batch 1 and a CV of 10.2% for batch 2, which were within the acceptance criteria for both validation parameters (CV≤15%).

CONCLUSIONS

CONCLUSIONS. The authors developed and validated an ELISA-based analytical procedure for assessing the potency of VLP-based preventive rotavirus vaccines. According to the study results, ELISA is applicable to the control of the potency of VLP-based preventive rotavirus vaccines.

ротавирус типа А человекавирусоподобные частицыVLPротавирусная вакцинаспецифическая активностьиммуноферментный анализреакция нейтрализациивалидацияin vivohuman rotavirus Avirus-like particlesVLProtavirus vaccinepotencyenzyme-linked immunosorbent assayvirus neutralisation testvalidationin vivoРабота выполнена в рамках Государственной тематики Минздрава России «Разработка подходов для создания вакцины против инфекции, вызванной ротавирусом типа «А» (регистрационный номер AAAA-A18-118051490143-3)The study was conducted as part of the State Programme of the Ministry of Health of the Russian Federation ‘Development of approaches to create a vaccine against rotavirus A infection’ (registration No. AAAA-A18-118051490143-3)ReferencesEstes MK. Rotaviruses and their replication. In: Knipe DN, Howeley PM, Griffin DE, eds. Fields virology. Philadelphia: Lippicott Williams and Wilkins; 2001. P. 1747–86.Estes MK. Rotaviruses and their replication. In: Knipe DN, Howeley PM, Griffin DE, eds. Fields virology. Philadelphia: Lippicott Williams and Wilkins; 2001. P. 1747–86.Hallowell BD, Chavers T, Parashar U, Tate JE. Global estimates of rotavirus hospitalizations among children below 5 years in 2019 and current and projected impacts of rotavirus vaccination. J Pediatric Infect Dis Soc. 2022;11(4):149–58. https://doi.org/10.1093/jpids/piab114Hallowell BD, Chavers T, Parashar U, Tate JE. Global estimates of rotavirus hospitalizations among children below 5 years in 2019 and current and projected impacts of rotavirus vaccination. J Pediatric Infect Dis Soc. 2022;11(4):149–58. https://doi.org/10.1093/jpids/piab114Troeger C, Khalil IA, Rao PC, Cao S, Blacker BF, Ahmed T, et al. Rotavirus vaccination and the global burden of rotavirus diarrhea among children younger than 5 years. JAMA Pediatr. 2018;172(10):958–65. https://doi.org/10.1001/jamapediatrics.2018.1960Troeger C, Khalil IA, Rao PC, Cao S, Blacker BF, Ahmed T, et al. Rotavirus vaccination and the global burden of rotavirus diarrhea among children younger than 5 years. JAMA Pediatr. 2018;172(10):958–65. https://doi.org/10.1001/jamapediatrics.2018.1960Yen C, Healy K, Tate JE, Parashar UD, Bines J, Neuzil K, et al. Rotavirus vaccination and intussusception — science, surveillance, and safety: a review of evidence and recommendations for future research priorities in low- and middle-income countries. Hum Vaccin Immunother. 2016;12(10):2580–9. https://doi.org/10.1080/21645515.2016.1197452Yen C, Healy K, Tate JE, Parashar UD, Bines J, Neuzil K, et al. Rotavirus vaccination and intussusception — science, surveillance, and safety: a review of evidence and recommendations for future research priorities in low- and middle-income countries. Hum Vaccin Immunother. 2016;12(10):2580–9. https://doi.org/10.1080/21645515.2016.1197452Черепушкин СА, Цибезов ВВ, Южаков АГ, Латышев ОЕ, Алексеев КП, Алтаева ЕГ и др. Синтез и характеристика вирусоподобных частиц ротавируса А (Reoviridae: Sedoreo­virinae: Rotavirus: Rotavirus A) человека. Вопросы вирусологии. 2021;66(1):55–64. https://doi.org/10.36233/0507-4088-27Cherepushkin SA, Tsibezov VV, Yuzhakov AG, Latyshev OE, Alekseev KP, Altayeva EG, et al. Synthesis and characterization of human rotavirus A (Reoviridae: Sedoreovirinae: Rotavirus: Rotavirus A) virus-like particles. Problems of Virology. 2021;66(1):55–64 (In Russ.). https://doi.org/10.36233/0507-4088-27Bachmann MF, Jennings GT. Vaccine delivery: a matter of size, geometry, kinetics and molecular patterns. Nat Rev Immunol. 2010;10(11):787–96. https://doi.org/10.1038/nri2868Bachmann MF, Jennings GT. Vaccine delivery: a matter of size, geometry, kinetics and molecular patterns. Nat Rev Immunol. 2010;10(11):787–96. https://doi.org/10.1038/nri2868Li C, Luo G, Zeng Y, Song F, Yang H, Zhang S, et al. Establishment of sandwich ELISA for quality control in rotavirus vaccine production. Vaccines (Basel). 2022;10(2):243. https://doi.org/10.3390/vaccines10020243Li C, Luo G, Zeng Y, Song F, Yang H, Zhang S, et al. Establishment of sandwich ELISA for quality control in rotavirus vaccine production. Vaccines (Basel). 2022;10(2):243. https://doi.org/10.3390/vaccines10020243Gupta R, Arora K, Singha Roy S, Joseph A, Rastogi R, Mehrotra Arora N. Platforms, advances, and technical challenges in virus-like particles-based vaccines. Front Immunol. 2023;14:1123805. https://doi.org/10.3389/fimmu.2023.1123805Gupta R, Arora K, Singha Roy S, Joseph A, Rastogi R, Mehrotra Arora N. Platforms, advances, and technical challenges in virus-like particles-based vaccines. Front Immunol. 2023;14:1123805. https://doi.org/10.3389/fimmu.2023.1123805Яговкин ЭА, Онищенко ГГ, Попова АЮ, Ежлова ЕБ, Мельникова АА, Соловьев МЮ и др. Состояние и перспективы разработки вакцин для специфической профилактики этеровирусной (неполио) инфекции. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2016;15(4):74–82. https://doi.org/10.31631/2073-3046-2016-15-4-74-82Yagovkin EA, Onishchenko GG, Popova AYu, Ezhlova EB, Melnikova AA, Soloviev MYu, et al. Condition and prospects of development of vaccines for specific prevention of enterovirus (nonpolio) infection. Epidemiology and Vaccinal Prevention. 2016;15(4):74–82 (In Russ.). https://doi.org/10.31631/2073-3046-2016-15-4-74-82Воробьева МС, Афонина ОС, Бархалева ОА, Щербинина МС, Саркисян КА, Рукавишников АВ и др. Анализ многолетнего изучения инактивированных культуральных вакцин для профилактики клещевого энцефалита отечественного и зарубежного производства по показателю качества — специфическая активность (иммуногенность). БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2015;(4):4–10. EDN: VAEGZNVorobieva MS, Afonina OS, Barhaleva OA, Shcherbinina MS, Sarkisyan KA, Rukavishnikov AV, et al. The analysis of a long-term experience of studying inactivated cell-culture vaccines for preventing tick-borne encephalitis of domestic and foreign manufacture in terms of specific activity (immunogenicity). BIOpreparations. Prevention, Diagnosis, Treatment. 2015;(4):4–10 (In Russ.). EDN: VAEGZNФилатов ИЕ, Цибезов ВВ, Баландина МВ, Норкина СН, Латышев ОЕ, Елисеева ОВ и др. Использование вирусоподобных частиц на основе рекомбинантных вирусных белков VP2/VP6 ротавируса А для оценки гуморального иммунного ответа методом ИФА. Вопросы вирусологии. 2023;68(2):161–71. https://doi.org/10.36233/0507-4088-169Filatov IE, Tsibezov VV, Balandina MV, Norkina SN, Latyshev OE, Eliseeva OV, et al. Virus-like particles based on rotavarus A recombinant VP2/VP6 proteins for assessment the antibody immune response by ELISA. Problems of Virology. 2023;68(2):161–171 (In Russ.). https://doi.org/10.36233/0507-4088-169Хаметова КМ, Алексеев КП, Южаков АГ, Костина ЛВ, Раев СА, Мусиенко МИ и др. Молекулярно-биологические свойства клонированного штамма Wa ротавируса А человека. Вопросы вирусологии. 2019;64(1):16–22. https://doi.org/10.18821/0507-4088-2019-64-1-16-22Khametova KM, Alekseev KP, Yuzhakov AG, Kostina LV, Raev SA, Musienko MI, et al. Evaluation of the molecular-biological properties of human rotavirus A strain Wa. Problems of Virology. 2019;64(1):16–22 (In Russ.). https://doi.org/10.18821/0507-4088-2019-64-1-16-22Sullivan EJ, Rosenbaum MJ. Methods for preparing tissue culture in disposable microplates and their use in virology. Am J Epidemiol. 1967;85(3):424–37.Sullivan EJ, Rosenbaum MJ. Methods for preparing tissue culture in disposable microplates and their use in virology. Am J Epidemiol. 1967;85(3):424–37.Костина ЛВ, Филатов ИЕ, Елисеева ОВ, Латышев ОЕ, Чернорыж ЯЮ, Юрлов КИ и др. Исследование безопасности и иммуногенности вакцины на основе VLP для профилактики ротавирусной инфекции на модели новорожденных карликовых свиней. Вопросы вирусологии. 2023;68(5):415–28. https://doi.org/10.36233/0507-4088-194Kostina LV, Filatov IE, Eliseeva OV, Latyshev OE, Chernoryzh YaYu, Yurlov KI, et al. Study of the safety and immunogenicity of VLP-based vaccine for the prevention of rotavirus infection in neonatal minipig model. Problems of Virology. 2023;68(5):415–28 (In Russ.). https://doi.org/10.36233/0507-4088-194Ward RL, McNeal MM, Sheridan JF. Evidence that active protection following oral immumization of mice with live rotavirus is not dependent on neutralizing antibody. Virology. 1992;188(1):57–66. https://doi.org/10.1016/0042-6822(92)90734-7Ward RL, McNeal MM, Sheridan JF. Evidence that active protection following oral immumization of mice with live rotavirus is not dependent on neutralizing antibody. Virology. 1992;188(1):57–66. https://doi.org/10.1016/0042-6822(92)90734-7McAdams D, Estrada M, Holland D, Singh J, Sawant N, Hickey JM, et al. Concordance of in vitro and in vivo mea­sures of non-replicating rotavirus vaccine potency. Vaccine. 2022;40(34):5069–78. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2022.07.017McAdams D, Estrada M, Holland D, Singh J, Sawant N, Hickey JM, et al. Concordance of in vitro and in vivo mea­sures of non-replicating rotavirus vaccine potency. Vaccine. 2022;40(34):5069–78. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2022.07.017Choi AH, McNeal MM, Basu M, Flint JA, Stone SC, Cle­ments JD et al. Intranasal or oral immunization of inbred and outbred mice with murine or human rotavirus VP6 proteins protects against viral shedding after challenge with murine rotaviruses. Vaccine. 2002;20(27–28):3310–21. https://doi.org/10.1016/s0264-410x(02)00315-8Choi AH, McNeal MM, Basu M, Flint JA, Stone SC, Cle­ments JD et al. Intranasal or oral immunization of inbred and outbred mice with murine or human rotavirus VP6 proteins protects against viral shedding after challenge with murine rotaviruses. Vaccine. 2002;20(27–28):3310–21. https://doi.org/10.1016/s0264-410x(02)00315-8El-Attar L, Oliver SL, Mackie A, Charpilienne A, Poncet D, Cohen J, Bridger JC. Comparison of the efficacy of rotavirus VLP vaccines to a live homologous rotavirus vaccine in a pig model of rotavirus disease. Vaccine. 2009;27(24):3201–8. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2009.03.043El-Attar L, Oliver SL, Mackie A, Charpilienne A, Poncet D, Cohen J, Bridger JC. Comparison of the efficacy of rotavirus VLP vaccines to a live homologous rotavirus vaccine in a pig model of rotavirus disease. Vaccine. 2009;27(24):3201–8. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2009.03.043Franco MA, Greenberg HB. Immunity to rotavirus infection in mice. J Infect Dis. 1999;179(Suppl. 3):466–9. https://doi.org/10.1086/314805Franco MA, Greenberg HB. Immunity to rotavirus infection in mice. J Infect Dis. 1999;179(Suppl. 3):466–9. https://doi.org/10.1086/314805Azevedo MP, Vlasova AN, Saif LJ. Human rotavirus virus-like particle vaccines evaluated in a neonatal gnotobiotic pig model of human rotavirus disease. Expert Rev Vaccines. 2013;12(2):169–81. https://doi.org/10.1586/erv.13.3Azevedo MP, Vlasova AN, Saif LJ. Human rotavirus virus-like particle vaccines evaluated in a neonatal gnotobiotic pig model of human rotavirus disease. Expert Rev Vaccines. 2013;12(2):169–81. https://doi.org/10.1586/erv.13.3Niu X, Liu Q, Wang P, Zhang G, Jiang L, Zhang S, et al. Establishment of an indirect ELISA method for the detection of the bovine rotavirus VP6 protein. Animals (Basel). 2024;14(2):271. https://doi.org/10.3390/ani14020271Niu X, Liu Q, Wang P, Zhang G, Jiang L, Zhang S, et al. Establishment of an indirect ELISA method for the detection of the bovine rotavirus VP6 protein. Animals (Basel). 2024;14(2):271. https://doi.org/10.3390/ani14020271Afchangi A, Jalilvand S, Mohajel N, Marashi SM, Shoja Z. Rotavirus VP6 as a potential vaccine candidate. Rev Med Virol. 2019;29(2):e2027. https://doi.org/10.1002/rmv.2027Afchangi A, Jalilvand S, Mohajel N, Marashi SM, Shoja Z. Rotavirus VP6 as a potential vaccine candidate. Rev Med Virol. 2019;29(2):e2027. https://doi.org/10.1002/rmv.2027Shoja Z, Jalilvand S, Latifi T, Roohvand F. Rotavirus VP6: involvement in immunogenicity, adjuvant activity, and use as a vector for heterologous peptides, drug deli­very, and production of nano-biomaterials. Arch Virol. 2022;167(4):1013–23. https://doi.org/10.1007/s00705-022-05407-9Shoja Z, Jalilvand S, Latifi T, Roohvand F. Rotavirus VP6: involvement in immunogenicity, adjuvant activity, and use as a vector for heterologous peptides, drug deli­very, and production of nano-biomaterials. Arch Virol. 2022;167(4):1013–23. https://doi.org/10.1007/s00705-022-05407-9

The authors declare that there are no conflicts of interest present.