biopreparatБИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечениеBiological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment2221-996X2619-1156Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products10.30895/2221-996X-2024-24-1-21-31biopreparat-550Research ArticleТЕМА НОМЕРА: СТАНДАРТИЗАЦИЯ И КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА БИОЛОГИЧЕСКИХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВISSUE TOPIC: STANDARDISATION AND QUALITY CONTROL OF BIOLOGICALSАттестация фармакопейного стандартного образца для оценки специфической активности рекомбинантного интерферона α-2bCertification of a pharmacopoeial reference standard for potency testing of recombinant interferon α-2bhttps://orcid.org/0000-0002-6176-5934ГайдероваЛ. А.GaiderovaL. A.

Гайдерова Лидия Александровна, канд. мед. наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, 127051

Lidia A. Gaiderova, Cand. Sci. (Med.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

gaiderova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8933-6966ЛебедеваЮ. Н.LebedevaYu. N.

Лебедева Юлия Николаевна

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, 127051

Yulia N. Lebedeva

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

lebedevaun@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8972-4851ЛобановаТ. Н.LobanovaT. N.

Лобанова Татьяна Николаевна, канд. биол. наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, 127051

Tatiana N. Lobanova, Cand. Sci. (Biol.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

Tlobanova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1471-8737ЛипатоваЭ. К.LipatovaE. K.

Липатова Эльвира Константиновна 

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, 127051

Elvira K. Lipatova

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

lipatova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8698-2890ВолковаР. А.VolkovaR. A.

Волкова Рауза Асхатовна, доктор биол. наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, 127051

Rauza A. Volkova, Dr. Sci. (Biol.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

volkova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8473-7442ФадейкинаО. В.FadeikinaO. V.

Фадейкина Ольга Васильевна, канд. биол. наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, 127051

Olga V. Fadeikina, Cand. Sci. (Biol.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

fadeikina@expmed.ruФедеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияScientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal ProductsRussian Federation202421022024241Стандартизация и контроль качества биологических лекарственных препаратов2131Copyright © Гайдерова Л.А., Лебедева Ю.Н., Лобанова Т.Н., Липатова Э.К., Волкова Р.А., Фадейкина О.В., 20242024Гайдерова Л.А., Лебедева Ю.Н., Лобанова Т.Н., Липатова Э.К., Волкова Р.А., Фадейкина О.В.Gaiderova L.A., Lebedeva Y.N., Lobanova T.N., Lipatova E.K., Volkova R.A., Fadeikina O.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.biopreparations.ru/jour/article/view/550АКТУАЛЬНОСТЬ

АКТУАЛЬНОСТЬ. Методика определения специфической активности рекомбинантных интерферонов предусматривает использование стандартного образца в качестве меры сравнения. Доступность международного стандартного образца (МСО), обычно используемого для оценки качества препаратов указанного типа, в настоящее время ограничена, в связи с чем при оценке качества интерферонов целесообразно применять фармакопейные стандартные образцы (ФСО), которые предварительно аттестуют с использованием МСО при их наличии.

ЦЕЛЬ

ЦЕЛЬ. Аттестация фармакопейного стандартного образца для оценки специфической активности рекомбинантного интерферона α-2b.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Определение специфической активности проводили в реакции подавления интерфероном цитопатического действия вируса на культуре клеток в сравнении с активностью МСО интерферона α-2b (WHO International Standard Interferon alpha 2b (Human, rDNA derived). В исследовании использовали клетки линий A549 и MDBK в комбинации с вирусами везикулярного стоматита (VSV) и энцефаломиокардита (EMC). Исследование проводили в соответствии с требованиями Государственной фармакопеи Российской Федерации (ОФС.1.7.2.0002.15). Учет результатов осуществляли инструментальным и визуальным методами. При расчетах использовали методы математической статистики; учет влияния факторов промежуточной прецизионности проводили с помощью t-критерия Стьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ

РЕЗУЛЬТАТЫ. В соответствии с разработанной программой и методикой аттестации проведена аттестация ФСО человеческого рекомбинантного интерферона α-2b (ФСО чрИФН-α-2b), предназначенного для оценки качества соответствующего препарата по показателям «Специфическая активность» (определение противовирусной активности на культуре клеток), «Подлинность» (реакция нейтрализации). Входной контроль кандидата в ФСО по показателям спецификации подтвердил его соответствие требованиям нормативной документации. По результатам испытаний установлено значение специфической активности ФСО: 4,47×10⁸ МЕ/мл, расширенная неопределенность: 8,12×10⁷ МЕ/мл (коэффициент охвата 2, уровень доверия ~95%). Срок годности ФСО чрИФН-α-2b установлен по сроку годности соответствующего препарата при хранении при температуре не выше минус 40 °С. Допускается хранение размороженного ФСО при температуре 2–8 °С в течение 1 мес.

ВЫВОДЫ

ВЫВОДЫ. Аттестован ФСО для оценки специфической активности рекомбинантного интерферона α-2b. По результатам аттестации ФСО включен в Реестр фармакопейных стандартных образцов Государственной фармакопеи Российской Федерации с реестровым номером ФСО.3.2.00455 и наименованием «Интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный (специфическая активность)». Внедрение аттестованного ФСО чрИФН-α-2b позволит проводить оценку качества всех отечественных препаратов интерферона указанного типа по показателям «Специфическая активность», «Подлинность» на надлежащем научно-методическом уровне и обеспечит независимость отечественных производителей и органов контроля качества препаратов от импорта МСО.

SCIENTIFIC RELEVANCE

SCIENTIFIC RELEVANCE. Potency testing of recombinant interferons requires a reference standard. The availability of International Standards (ISs) that are commonly used to assess the quality of recombinant interferons is currently limited. Therefore, the quality of interferons should be assessed using pharmacopoeial reference standards (RSs) certified using ISs (if available).

AIM

AIM. This study aimed to certify a pharmacopoeial RS for potency testing of recombinant interferon α-2b.

MATERIALS AND METHODS

MATERIALS AND METHODS. The potency determination involved comparing the inhibition of the virus-induced cytopathic effect observed in cell culture with the candidate RS and the WHO International Standard for Human rDNA-derived interferon α-2b. The study used A-549 and MDBK cell lines with encephalomyocarditis (EMC) and vesicular stomatitis (VSV) viruses. The authors followed the requirements of the State Pharmacopoeia of the Russian Federation (Cell-Culture Bioassays for Interferon Products, OFS.1.7.2.0002.15). The results were recorded using instrumental and visual methods. The calculations used mathematical statistics. To factor in the influence of intermediate precision, the authors applied Student’s t-test.

RESULTS

RESULTS. The authors developed a certification programme and procedure and certified the pharmacopoeial RS for recombinant human interferon α-2b (rhIFN α-2b) to identify the corresponding medicinal products (by virus neutralisation) and test their potency (by antiviral activity in cell culture). Upon receipt, the candidate RS was verified for compliance with regulatory specifications. According to the test results, the potency of the candidate pharmacopoeial RS was 4.47×10⁸ IU/mL, and the expanded uncertainty was 8.12×10⁷ IU/mL, with a coverage factor of k=2 and a confidence level of 95%. The pharmacopoeial RS for rhIFN α-2b was considered to have the same shelf-life period as the corresponding medicinal products  if stored at a temperature not higher than –40 ºC. When thawed, the pharmacopoeial RS for rhIFN α-2b can be stored at a temperature of 2–8 ºC for up to 1 month.

CONCLUSIONS

CONCLUSIONS. Upon certification for potency testing, the pharmacopoeial RS for rhIFN α-2b has been included in the Register of Reference Standards of the Russian Pharmacopoeia as Recombinant Human Interferon α-2b (Potency) FSO.3.2.00455. The introduction of this pharmacopoeial RS will help to conduct the identification and potency testing of all Russian interferon α-2b products at an appropriate scientific and methodological level. As a result, Russian pharmaceutical manufacturers and quality control agencies will no longer depend on imported ISs.

рекомбинантный интерферон α-2bчрИФН-α-2bспецифическая активностьпротивовирусная активностьфармакопейный стандартный образец (ФСО)аттестация ФСОрасширенная неопределенностьrecombinant interferon α-2brhIFN α-2bpotencyantiviral activitypharmacopoeial reference standardreference standard certificationexpanded uncertaintyРабота выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России № 056-00026-24-00 на проведение прикладных научных исследований (номер государственного учета НИР № 124022200103-5)The study reported in this publication was carried out as part of publicly funded research project No. 056-00026-24-00 and was supported by the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products (R&D reporting No. 124022200103-5)ReferencesВолкова РА, Фадейкина ОВ, Устинникова ОБ, Саканян ЕИ, Меркулов ВА, Мовсесянц АА и др. Современные проблемы стандартных образцов лекарственных средств в Российской Федерации. Фармация. 2020;69(2):5–11. https://doi.org/10.29296/25419218-2020-02-01Volkova RA, Fadeikina OV, Ustinnikova OB, Sakanyan EI, Merkulov VA, Movsesyants AA, et al. Current problems with the standard samples of medicines in the Russian Federation. Pharmacy. 2020;69(2):5–11 (In Russ.). https://doi.org/10.29296/25419218-2020-02-01Гегечкори ВИ, Шатилина АА, Шульга НА, Петухова ЯД, Смирнов ВВ, Раменская ГВ. Биологические стандартные образцы: актуальные вопросы разработки и порядка аттестации. Эталоны. Стандартные образцы. 2023;19(3):21–9. https://doi.org/10.20915/2077-1177-2023-19-3-21-29Gegechkori VI, Shatilina AA, Shulga NA, Petukhova YaD, Smirnov VV, Ramenskaya GV. Biological reference materials: topical issues of development and certification procedure. Measurement Standards. Reference Materials. 2023;19(3):21–9 (In Russ.). https://doi.org/10.20915/2077-1177-2023-19-3-21-29Олефир ЮВ, Волкова РА, Фадейкина ОВ, Саканян ЕИ, Меркулов ВА, Мовсесянц АА, Бондарев ВП. Проблемы стандартных образцов биологических лекарственных средств. В кн.: Сборник тезисов докладов III международной научной конференции «Стандартные образцы в измерениях и технологиях». Екатеринбург; 2018. С. 148–50. EDN: YSMLQLOlefir YuV, Volkova RA, Fadeikina OV, Sakanyan EI, Merkulov VA, Movsesyants AA, Bondarev VP. Problems of biological reference standards. In: Collection of abstracts of the III International Scientific Conference “Reference materials in measurements and technologies”. Ekaterinburg; 2018. P. 148–50 (In Russ.). EDN: YSMLQLMeager A, Gaines Das R, Zoon K, Mire-Sluis A. Establishment of new and replacement World Health Organization International Biological Standards for human interferon alpha and omega. J Immunol Methods. 2001;257(1–2):17–33. https://doi.org/10.1016/s0022-1759(01)00460-4Meager A, Gaines Das R, Zoon K, Mire-Sluis A. Establishment of new and replacement World Health Organization International Biological Standards for human interferon alpha and omega. J Immunol Methods. 2001;257(1–2):17–33. https://doi.org/10.1016/s0022-1759(01)00460-4Петров АЮ, Сысуев ЕБ, Новикова НА. Некоторые особенности применения стандартных образцов в фармации. Роль технического регулирования и стандартизации в эпоху цифровой экономики. Сборник статей II Международной научно-практической конференции молодых ученых. Екатеринбург: Ажур; 2020. С. 21–32. EDN: JGBEACPetrov AYu, Sysuev EB, Novikova NA. Some features of application standard samples in pharmacy. The role of technical regulation and standardization in the era of the digital economy. Collection of articles of the II International Scientific and Practical Conference of Young Scientists. Ekaterinburg: Azhur; 2020. P. 21–32 (In Russ.). EDN: JGBEACФадейкина ОВ, Волкова РА. Разработка порядка аттестации стандартных образцов биологических лекарственных средств. Химико-фармацевтический журнал. 2017;51(8):44–50. https://doi.org/10.30906/0023-1134-2017-51-8-44-50 https://doi.org/10.1007/s11094-017-1680-6Fadeikina OV, Volkova RA. Elaboration of certification procedures for reference standards of biological drugs. Pharm Chem J. 2017;51(8):716–21. https://doi.org/10.1007/s11094-017-1680-6Гайдерова ЛА, Никитина ТН, Фадейкина ОВ, Байкова МЛ, Устинникова ОБ, Климов ВИ, Шведов ДВ. Аттестация отраслевого стандартного образца активности лейкоцитарного интерферона альфа типа. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2014;(2):31–6. EDN: SJRCDFGayderova LA, Nikitina TN, Fadeikina OV, Baikova ML, Ustinnikova OB, Klimov VI, Shvedov DV. Evaluation of branch reference standard of leukocyte interferon alpha activity. Biopreparation (Biopharmaceuticals). 2014;(2):31–6 (In Russ.). EDN: SJRCDFАлпатова НА, Гайдерова ЛА, Яковлев АК, Мотузова ЕВ, Лысикова СЛ, Солдатов АА, Авдеева ЖИ. Особенности определения специфической активности биотехнологических лекарственных средств. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2017;17(1):13–26. EDN: YHSSGLAlpatova NA, Gayderova LA, Yakovlev АК, Motuzova EV, Lysikova SL, Soldatov AA, Avdeeva GI. Assessment of biotechnological products specific activity. BIOlpreparations. Prevention, Diagnosis, Treatment. 2017;17(1):13–26 (In Russ.). EDN: YHSSGLGlantz SA. Primer of biostatistics. 7th ed. New York: McGraw-Hill; 2012Glantz SA. Primer of biostatistics. 7th ed. New York: McGraw-Hill; 2012.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.