Николаева Алевтина Максимовна, д-р биол. наук
ул. Братская, д. 177, г. Пермь, 614089
Alevtina M. Nikolaeva, Dr. Sci. (Biol.)
177 Bratskaya St., Perm 614089
Ковязина Наталья Анатольевна, канд. фарм. наук
ул. Братская, д. 177, г. Пермь, 614089
Natalya A. Kovyazina, Cand. Sci. (Pharm.)
177 Bratskaya St., Perm 614089
Функнер Елена Викторовна, канд. мед. наук
ул. Братская, д. 177, г. Пермь, 614089
Elena V. Funkner, Cand. Sci. (Med.)
177 Bratskaya St., Perm 614089
Красильникова Анна Наилевна, канд. биол. наук
ул. Братская, д. 177, г. Пермь, 614089
Anna N. Krasilnikova, Cand. Sci. (Biol.)
177 Bratskaya St., Perm 614089
Лыско Ксения Андреевна, канд. техн. наук
ул. Братская, д. 177, г. Пермь, 614089
Kseniya A. Lysko, Cand. Sci. (Techn.)
177 Bratskaya St., Perm 614089
Актуальность. Рациональная фаготерапия — высокоэффективный способ борьбы с бактериальными инфекциями в условиях неуклонно растущей антибиотикорезистентности. Основной лекарственной формой препаратов бактериофагов является раствор для приема внутрь, местного и наружного применения. Однако при пероральном приеме жидких лекарственных форм фаговых препаратов происходит их значительная инактивация за счет кислой среды желудочного сока. С целью устранения негативного влияния кислой среды разработан лекарственный препарат поливалентного бактериофага в форме капсул — Секстафаг® Пиобактериофаг поливалентный.
Цель. Изучение специфической активности и биофармацевтических свойств лекарственного препарата поливалентного бактериофага в капсулированной форме.
Материалы и методы. Объект исследования — препарат поливалентного бактериофага в капсулированной форме; препарат сравнения — препарат поливалентного бактериофага в форме раствора. Специфическую активность изучали с использованием метода Аппельмана, количество фаговых частиц — методом Грациа. Исследование кислотонейтрализующей способности проводили путем выдерживания препарата в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты с последующим определением специфической активности по методу Аппельмана. Антифаговый иммунный ответ на антигены бактериофага изучали на кроликах породы Шиншилла, уровень иммунного ответа детектировали с помощью разработанной иммуноферментной тест-системы. Исследование фармакокинетических параметров проводили на беспородных белых мышах при пероральном введении препарата.
Результаты. Выявлен высокий уровень литической активности исследуемого препарата, который по величине отрицательной степени десятичного разведения составлял 10-6 в отношении исследуемых микроорганизмов: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Pseudomonas аeruginosa, Staphylococcus aureus и Streptococcus pneumoniae. Показатель степени всасывания после перорального введения мышам препарата поливалентного бактериофага в капсулированной форме был в 3,1–3,7 раза выше в сравнении с препаратом поливалентного бактериофага в форме раствора. Многократное пероральное введение исследуемого препарата кроликам в терапевтических дозах не стимулировало образования антифаговых антител. Исследование стабильности препарата показало сохранение высокого уровня литической активности в течение 18 мес.
Выводы. Препарат поливалентного бактериофага в капсулированной лекарственной форме обладает высоким антибактериальным действием в отношении исследуемых микроорганизмов, характеризуется высокой степенью всасывания и длительным сохранением литической активности, а также не вызывает выработку антифаговых антител при пероральном применении, что свидетельствует об эффективности и безопасности разработанного препарата.
Scientific relevance. Rational phage therapy is a highly effective way to combat bacterial infections, especially in conditions of steadily increasing antibiotic resistance. Most bacteriophage preparations are formulated as oral and topical solutions. However, oral administration of liquid phage preparations results in significant inactivation in the stomach. To shield active ingredients from the acidic environment, Sextaphag® Pyobacteriophage, polyvalent, has been formulated into capsules.
Aim. This study evaluated the polyvalent bacteriophage preparation in capsules in terms of its potency and biopharmaceutical properties.
Materials and methods. The study compared the polyvalent bacteriophage preparation formulated as capsules with the polyvalent bacteriophage preparation formulated as a solution. The potency was evaluated by the Appelmans method, and phage particles were quantified by the Gratia method. To evaluate the acid-neutralising capacity, the authors placed test samples of the bacteriophage preparation in 0.1 M hydrochloric acid and analysed their potency by the Appelmans method. Chinchilla rabbits were used to analyse anti-phage immune responses, and their antibody levels were measured using an enzyme immunoassay test system developed by the authors. The pharmacokinetic parameters were studied in outbred white mice after oral dosing.
Results. The polyvalent bacteriophage preparation exhibited high lytic activity towards Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Pseudomonas aegidinosa, Staphylococcus aureus, and Streptococcus pneumoniae, which accounted for a dilution factor of 10-6. Following oral administration of the polyvalent bacteriophage preparation in capsules to mice, the level of absorption was 3.1–3.7 times higher than that observed with the solution. Repeated oral administration of therapeutic doses did not induce anti-phage antibodies in rabbits. The stability study showed that the polyvalent bacteriophage preparation retained high lytic activity for 18 months.
Conclusions. According to the study results, the polyvalent bacteriophage preparation in capsules exerts significant antibacterial activity against the studied microorganisms, has a high level of absorption, retains its lytic activity for a long time, and does not induce anti-phage antibodies after oral dosing, which confirms its safety and efficacy.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.