biopreparatБИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечениеBiological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment2221-996X2619-1156Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products10.30895/2221-996X-2022-22-1-38-48biopreparat-360Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESРазработка стандартного образца предприятия активности антирабического иммуноглобулина для применения в реакции нейтрализации вируса на культуре клеток VeroDevelopment of an in-house reference standard for anti-rabies immunoglobulin potency, to be used in the virus neutralisation test in a Vero cell culturehttps://orcid.org/0000-0002-8798-1547АбрамоваЕ. Г.AbramovaE. G.

Абрамова Елена Геннадьевна, доктор биологических наук

ул. Университетская, д. 46, Саратов, 410005: Театральная пл. 1, Саратов, 410012

 

Elena G. Abramova, Dr. Sci. (Biol.). 

46 Universitetskaya St., Saratov 410005; 1 Teatralnaya Sq., Saratov 410012

abramova.PhD2018@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7919-3412ГавриловаЮ. К.GavrilovaYu. K.

Гаврилова Юлия Кирилловна

ул. Университетская, д. 46, Саратов, 410005

Yuliya K. Gavrilova

46 Universitetskaya St., Saratov 410005

ylia-93@list.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1461-5383ГенераловС. В.GeneralovS. V.

Генералов Сергей Вячеславович, кандидат биологических наук

ул. Университетская, д. 46, Саратов, 410005

Sergey V. Generalov, Cand. Sci. (Biol.)

46 Universitetskaya St., Saratov 410005

svgeneraloff@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0001-8085-2331ЛобовиковаО. А.LobovikovaO. A.

Лобовикова Оксана Анатольевна, кандидат биологических наук 

ул. Университетская, д. 46, Саратов, 410005

Oksana A. Lobovikova, Cand. Sci. (Biol.)

46 Universitetskaya St., Saratov 410005

Lobovikova_OA@microbe.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5866-4091ШульгинаИ. В.ShulginaI. V.

Шульгина Ирина Витальевна, кандидат медицинских наук

ул. Университетская, д. 46, Саратов, 410005

Irina V. Shulgina, Cand. Sci. (Med.)

46 Universitetskaya St., Saratov 410005

Shulgina_IV@microbe.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1609-0384КомиссаровА. В.KomissarovA. V.

Комиссаров Александр Владимирович, доктор биологических наук, профессор

ул. Университетская, д. 46, Саратов, 410005

Aleksandr V. Komissarov, Dr. Sci. (Biol.), Professor

46 Universitetskaya St., Saratov 410005

komissarov-9@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1130-3504НикифоровА. К.NikiforovA. K.

Никифоров Алексей Константинович, доктор биологических наук, доцент

ул. Университетская, д. 46, Саратов, 410005: Театральная пл. 1, Саратов, 410012

Aleksey K. Nikiforov, Dr. Sci. (Biol.), Associate Professor

46 Universitetskaya St., Saratov 410005; 1 Teatralnaya Sq., Saratov 410012

rusrapi@microbe.ruФедеральное казенное учреждение здравоохранения «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека; Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Саратовский государственный аграрный университет им. Н. И. Вавилова»РоссияRussian Research Antiplague Institute “Microbe”; Saratov State Vavilov Agrarian UniversityRussian FederationФедеральное казенное учреждение здравоохранения «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человекаРоссияRussian Research Antiplague Institute “Microbe”Russian Federation2022100320222213848Copyright © Абрамова Е.Г., Гаврилова Ю.К., Генералов С.В., Лобовикова О.А., Шульгина И.В., Комиссаров А.В., Никифоров А.К., 20222022Абрамова Е.Г., Гаврилова Ю.К., Генералов С.В., Лобовикова О.А., Шульгина И.В., Комиссаров А.В., Никифоров А.К.Abramova E.G., Gavrilova Y.K., Generalov S.V., Lobovikova O.A., Shulgina I.V., Komissarov A.V., Nikiforov A.K.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.biopreparations.ru/jour/article/view/360

Разработка и применение новых методов контроля качества лекарственных средств предполагает использование большого количества референтного материала для контрольных исследований. Специалистами ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб» Роспотребнадзора предложен альтернативный методический подход для определения активности антирабического иммуноглобулина на культуре клеток, внедрение которого в практику диктует необходимость разработки стандартного образца предприятия, аттестованного относительно стандартного образца активности антирабического иммуноглобулина человека Европейской фармакопеи.

Цель работы: разработка и оценка метрологических характеристик стандартного образца предприятия (СОП) специфической активности антирабического иммуноглобулина для применения в реакции нейтрализации вируса на культуре клеток Vero. Материалы и методы: иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови лошади; перевиваемая клеточная культура Vero; фиксированный вирус бешенства (штамм Москва 3253Vero); стандартный образец активности антирабического иммуноглобулина человека Европейской фармакопеи. Специфическую активность кандидата в СОП и образцов антирабического иммуноглобулина определяли в реакции нейтрализации на культуре клеток. Учет результатов осуществляли с помощью флуоресцентного микроскопа. Статистическую обработку проводили в соответствии с общей фармакопейной статьей 1.1.0014.15 Государственной фармакопеи Российской Федерации XIV издания. Результаты: в ходе испытаний установлена аттестуемая характеристика СОП по показателю «Специфическая активность», соответствующая значению 180,8±18,8 МЕ/мл. Граничные значения доверительного интервала определены при уровне вероятности 0,95. Установлен срок годности СОП – 1,5 года при хранении в соответствии с СанПиН 3.3686-21. По итогам аттестации образцу присвоен номер 41-01-20, разработан и утвержден комплект технической и эксплуатационной документации. Применение разработанного СОП позволяет проводить анализ специфической активности антирабического иммуноглобулина in vitro, выраженной в международных единицах, для подтверждения соответствия требованиям нормативной документации. Выводы: разработан стандартный образец предприятия специфической активности антирабического иммуноглобулина для применения в реакции нейтрализации вируса на клеточной культуре, аттестованный относительно стандартного образца активности антирабического иммуноглобулина человека Европейской фармакопеи.

The development and use of new methods of quality control of medicines involve the use of a lot of reference materials in quality control testing. Specialists of the Russian Research Antiplague Institute “Microbe” have proposed an alternative methodological approach to determination of potency of anti-rabies immunoglobulin in cell culture, which requires the development of an in-house reference standard (RS) certified against the biological reference preparation (BRP) of the European Pharmacopoeia human rabies immunoglobulin. The aim of the study was to develop and evaluate the metrological characteristics of an in-house RS for anti-rabies immunoglobulin potency, to be used in the virus neutralisation test in a Vero cell culture. Materials and methods: The following materials were used in the study: equine rabies immunoglobulin, Vero continuous cell culture, fixed rabies virus (Moscow 3253Vero strain), human rabies immunoglobulin BRP of the European Pharmacopoeia. The potencies of the candidate in-house RS and rabies immunoglobulin samples were determined in the neutralisation test in cell culture. The results were recorded using a fluorescent microscope. Statistical processing was carried out in accordance with general chapter 1.1.0014.15 of the State Pharmacopoeia of the Russian Federation, 14th edition. Results: the certified value of the in-house RS potency was 180.8±18.8 IU/mL. The confidence limits were determined at the 0.95 probability level. The shelf life of the in-house RS is 1.5 years (when stored according to the sanitary regulation SanPiN 3.3686-21). The certified in-house RS was assigned with the number 41-01-20. A set of technical and operational documentation was developed and approved for the in-house RS. The developed in-house RS can be used for in vitro determination of anti-rabies immunoglobulin potency, expressed in international units, to confirm its compliance with the product specification file. Conclusions: the authors developed an in-house RS for anti-rabies immunoglobulin potency, to be used in the virus neutralisation test in cell culture, certified against the human rabies immunoglobulin BRP of the European Pharmacopoeia.

иммуноглобулин антирабическийстандартный образец активности антирабического иммуноглобулина человека Европейской фармакопеистандартный образец предприятиявирус бешенствареакция нейтрализациикультура клетокanti-rabies immunoglobulinhuman rabies immunoglobulin BRP of the European Pharmacopoeiain-house reference standardrabies virusneutralisation testcell cultureИсследование проводилось без спонсорской поддержки.The study was performed without external fundingReferencesФадейкина ОВ, Волкова РА. Разработка порядка аттестации стандартных образцов биологических лекарственных средств. Химико-фармацевтический журнал. 2017;51(8):44–50. https://doi.org/10.30906/0023-1134-2017-51-8-44-50Fadeikina OV, Volkova RA. Elaboration of the certification procedure for biological reference standards. Khimiko-farmatsevticheskii zhurnal = Pharmaceutical Chemistry Journal. 2017;51(8):44–50 (In Russ.) https://doi.org/10.30906/0023-1134-2017-51-8-44-50Мовсесянц АА, Бутырский АЮ, Бондарев ВП, Олефир ЮВ, Постнова ЕЛ, Мухачева АВ. К вопросу о применении гетерологичного антирабического иммуноглобулина для специфической профилактики бешенства у людей. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2015;5:85–9. https://doi.org/10.31631/2073-3046-2015-14-5-85-89Movsesyants AA, Butyrsky AYu, Bondarev VP, Olefir YuV, Postnova EL, Mukhacheva AV. On the issue of the use of heterologous anti-rabies immunoglobulin for the specific prevention of rabies in humans. Èpidemiologiâ i vakcinoprofilaktika = Epidemiology and Vaccination Prevention. 2015;5:85–9 (in Russ.) https://doi.org/10.31631/2073-3046-2015-14-5-85-89Абрамова ЕГ, Лобовикова ОА, Шульгина ИВ, Комиссаров АВ, Савицкая ЛВ, Генералов СВ и др. Разработка стандартного образца предприятия (СОП) специфической активности иммуноглобулина антирабического из сыворотки крови лошади. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2017;4(21):160–4.Abramova EG, Lobovikova OA, Shulgina IV, Komissarov AB, Savitskaya LV, Generalov SV, et al. Development of quality control sample to assess specific activity of anti-rabies immunoglobulin obtained from equine blood serum. Razrabotka i registraciâ lekarstvennyh sredstv = Drug Development & Registration». 2017;4(21):160–4 (In Russ.)Гаврилова ЮК, Генералов СВ, Абрамова ЕГ, Савицкая ЛВ, Галкина МВ, Кочкин АВ. Экспресс-анализ активности антирабических сывороток и иммуноглобулина в клеточных культурах методом иммунофлуоресценции. Биотехнология. 2018;34(4):83–8. https://doi.org/10.21519/0234-2758-2018-34-4-83-88Gavrilova YuK, Generalov SV, Abramova EG, Savitskaya LV, Galkina MV, Kochkin AV. Express analysis of activity of anti-rabies serum and anti-rabies immunoglobulin in cell cultures by immunofluorescence method. Biotekhnologiya = Biotechnology. 2018;34(4):83–8 (In Russ.) https://doi.org/10.21519/0234-2758-2018-34-4-83-88Cliquet F, Aubert M, Sagné L. Development of a fluorescent antibody virus neutralisation test (FAVN test) for the quantitation of rabies-neutralising antibody. J Immunol Methods. 1998;212(1):79–87. https://doi.org/10.1016/s0022-1759(97)00212-3Cliquet F, Aubert M, Sagné L. Development of a fluorescent antibody virus neutralisation test (FAVN test) for the quantitation of rabies-neutralising antibody. J Immunol Methods. 1998;212(1):79–87. https://doi.org/10.1016/s0022-1759(97)00212-3Баркова ИП, Нагиева ФГ, Никулина ВГ, Лисаков АН. Быстрый культуральный метод для индикации антигенов вируса бешенства в инфицированных клеточных культурах. Инфекция и иммунитет. 2013;3(4):323–6. https://doi.org/10.15789/2220-7619-2013-4-323-326Barkova IP, Nagieva FG, Nikulina VG, Lisakov AN. The rapid culture method for the indication of rabies virus antigens in infected cell cultures. Infektsiya i immunitet = Russian Journal of Infection and Immunity. 2013;3(4):323–6 (In Russ.) https://doi.org/10.15789/2220-7619-2013-4-323-326Мовсесянц АА, Олефир ЮВ. Современные проблемы вакцинопрофилактики бешенства. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2019;19(1):10–6. https://doi.org/10.30895/2221-996X-2019-19-1-10-16Movsesyants AA, Olefir YuV. Current challenges of preventive vaccination against rabies. BIOpreparaty. Profilaktika, diagnostika, lechenie = BIOpreparations. Prevention, Diagnosis, Treatment. 2019;19(1):10–6 (In Russ.) https://doi.org/10.30895/2221-996X-2019-19-1-10-16Волкова РА, Фадейкина ОВ, Климов ВИ, Саканян ЕИ, Олефир ЮВ, Меркулов ВА и др. Актуальные вопросы стандартных образцов в сфере обращения биологических лекарственных средств. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2016;16(4):229–37.Volkova RA, Fadeikina OV, Klimov VI, Sakanyan EI, Olefir YuV, Merkulov VA, et al. Current issues of standard samples in the field of circulation of biological medicines. BIOpreparaty. Profilaktika, diagnostika, lechenie = BIOpreparations. Prevention, Diagnosis, Treatment. 2016;16(4):229–37 (In Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.