biopreparatБИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечениеBiological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment2221-996X2619-1156Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products10.30895/2221-996X-2021-21-1-50-63biopreparat-320Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESСравнительная оценка использования моно- и поликлональных антител при определении подлинности различных лекарственных средств на основе интерферона альфа-2bComparative evaluation of mono- and polyclonal antibodies used in identification of interferon alpha-2b productshttps://orcid.org/0000-0002-6176-5934ГайдероваЛ. А.GayderovaL. A.

Гайдерова Лидия Александровна, кандидат медицинских наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Lidiya A. Gayderova, Cand. Sci. (Med.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

gaiderova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8933-6966ЛебедеваЮ. Н.LebedevaYu. N.

Лебедева Юлия Николаевна

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Yuliya N. Lebedeva

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

LebedevaUN@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8972-4851ЛобановаТ. Н.LobanovaT. N.

Лобанова Татьяна Николаевна, кандидат биологических наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Tatyana N. Lobanova, Cand. Sci. (Biol.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

Tlobanova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8260-2360ЛукиноваЕ. А.LukinovaE. A.

Лукинова Екатерина Александровна

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Ekaterina A. Lukinova

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

Lukinova@expmed.ruФедеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияScientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal ProductsRussian Federation2021291220202115063Copyright © Гайдерова Л.А., Лебедева Ю.Н., Лобанова Т.Н., Лукинова Е.А., 20212021Гайдерова Л.А., Лебедева Ю.Н., Лобанова Т.Н., Лукинова Е.А.Gayderova L.A., Lebedeva Y.N., Lobanova T.N., Lukinova E.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.biopreparations.ru/jour/article/view/320

В настоящее время все большую актуальность приобретают вопросы оценки качества лекарственных препаратов на основе рекомбинантных интерферонов (рИФН) с использованием современных аналитических методов, среди которых одними из важнейших являются методы определения подлинности. Особую проблему представляет оценка подлинности интерферона в отечественных препаратах на основе рИФН, содержащих помимо интерферона (ИФН) альфа-2b иные действующие и вспомогательные вещества, затрудняющие определение этого показателя физико-химическими методами. Производители препаратов указанного типа используют для оценки их подлинности реакцию нейтрализации ИНФ различными моно- и поликлональными антителами. Цель работы: оценка пригодности различных видов антител для проведения испытания по показателю «Подлинность» в реакции нейтрализации противовирусной активности интерферона в различных лекарственных средствах на основе интерферона альфа-2b, содержащих помимо интерферона иные действующие и вспомогательные вещества. Материалы и методы: в исследовании использовали клетки MDBK, вирус везикулярного стоматита, образцы различных лекарственных средств, содержащих интерферон альфа-2b, разного состава и производства, моно- и поликлональные антитела различного производства. Определение подлинности рИНФ проводили биологическим методом, основанным на нейтрализации специфическими антителами способности ИФН подавлять цитопатическое действие индикаторного вируса в культуре клеток в сравнении со стандартным образцом. Результаты: показано, что образцы всех субстанций на основе интерферона альфа-2b нейтрализуются как поликлональными, так и моноклональными антителами. Поликлональные антитела взаимодействуют со всеми лекарственными препаратами различного состава, изготовленными из тех же субстанций. Моноклональные антитела избирательно взаимодействуют с некоторыми препаратами. Выводы: поликлональные антитела универсальны с точки зрения возможности их использования для определения подлинности любого препарата, содержащего ИФН альфа-2b. Применение с этой целью моноклональных антител ограничено и зависит от состава препарата.

Quality control of recombinant interferon (rIFN) products with the help of modern analytical methods, including those used for identification, is becoming increasingly relevant nowadays. Identification is especially challenging in the case of Russian rIFN products that contain not only interferon (IFN) alpha-2b, but also other active ingredients and excipients that hinder the use of physical and chemical methods. Manufacturers of such products use IFN neutralization assay with mono- and/or polyclonal antibodies for identification. The aim of the study was to assess the feasibility of using different types of antibodies in the identification test based on neutralization of IFN antiviral activity in IFN alpha-2b products containing other active ingredients and excipients in addition to IFN. Materials and methods: the following materials were used in the study: MDBK cells, vesicular stomatitis virus, samples of IFN alpha-2b products with different composition and by different manufacturers, mono- and polyclonal antibodies by different manufacturers. Identification of rINFs was carried out by a biological method based on neutralization by specific antibodies of IFN ability to suppress the cytopathic effect of the indicator virus in a cell culture using a reference standard for comparison. Results: both polyclonal and monoclonal antibodies were shown to neutralize the activity of the tested IFN alpha-2b substances. Polyclonal antibodies interact with all products containing the same active ingredients, irrespective of their composition. Monoclonal antibodies interact selectively with some products. Conclusions: polyclonal antibodies can be used for identification of any product containing IFN alpha-2b. The use of monoclonal antibodies for this purpose is limited and depends on the composition of the product.

интерферон рекомбинантныйметод определения подлинностиреакция нейтрализации противовирусной активностимоно- и поликлональные антителаrecombinant interferonidentification testantiviral activity neutralization assaymono- and polyclonal antibodiesРабота выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России № 056-00005-21-00 на проведение прикладных научных исследований (номер государственного учета НИР 121022000147-4).The study reported in this publication was carried out as part of a publicly funded research project No. 056-00005-21-00 and was supported by the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products (R&D public accounting No. 121022000147-4).ReferencesLi SF, Gong MJ, Zhao FR, Shao JJ, Xie YL, Zang YG, et al. Type I interferons: distinct biological activities and current applications for viral infection. Cell Physiol Biochem. 2018;51(5):2377–96. https://doi.org/10.1159/000495897Li SF, Gong MJ, Zhao FR, Shao JJ, Xie YL, Zang YG, et al. Type I interferons: distinct biological activities and current applications for viral infection. Cell Physiol Biochem. 2018;51(5):2377–96. https://doi.org/10.1159/000495897Wang H, Hu H, Zhang K. Overview of interferon: characteristics, signaling and anti-cancer effect. Arch Biotechnol Biomed. 2017;1:001–016. https://doi.org/10.29328/journal.hjb.1001001Wang H, Hu H, Zhang K. Overview of interferon: characteristics, signaling and anti-cancer effect. Arch Biotechnol Biomed. 2017;1:001–016. https://doi.org/10.29328/journal.hjb.1001001Bekisz J, Baron S, Balinsky C, Morrow A, Zoon KS. Antiproliferative properties of type I and type II interferon. Pharmaceuticals (Basel). 2010;3(4):994–1015. https://doi.org/10.3390/ph3040994Bekisz J, Baron S, Balinsky C, Morrow A, Zoon KS. Antiproliferative properties of type I and type II interferon. Pharmaceuticals (Basel). 2010;3(4):994–1015. https://doi.org/10.3390/ph3040994Bogdan C, Mattner J, Schleicher U. The role of type I interferons in non-viral infections. Immunol. Rev. 2004;202:33–48. https://doi.org/10.1111/j.0105-2896Bogdan C, Mattner J, Schleicher U. The role of type I interferons in non-viral infections. Immunol. Rev. 2004;202:33–48. https://doi.org/10.1111/j.0105-2896Wang YS, Youngster S, Grace M, Bausch J, Bordens R, Wyss DF. Structural and biological characterization of pegylated recombinant interferon alfa-2b and its therapeutic implications. Adv Drug Deliv Rev. 2002;54(4):547–70. https://doi.org/10.1016/s0169-409x(02)00027-3Wang YS, Youngster S, Grace M, Bausch J, Bordens R, Wyss DF. Structural and biological characterization of pegylated recombinant interferon alfa-2b and its therapeutic implications. Adv Drug Deliv Rev. 2002;54(4):547–70. https://doi.org/10.1016/s0169-409x(02)00027-3Ершов ФИ, Киселев ОИ. Интерфероны и их индукторы (от молекул до лекарств). М.: ГЭОТАР-Медиа; 2005.Ershov FI, Kiselev OI. Interferons and their inducers (from molecules to drugs). Moscow: GEOTAR-Media; 2005 (In Russ.)Хаитов РМ. Иммунология. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2013.Khaitov RM. Immunology. Moscow: GEOTAR-Media; 2013 (In Russ.)Баншеро Ж, Палукка АК, Паскуал В, Приллиман К. Моноклональные антитела против интерферона-альфа и способы применения. Патент Российской Федерации № 2431638; 2011.Banshero J, Palukka AK, Paskual B, Prilliman K. Monoclonal antibodies against interferon-alpha and methods of application. Patent of the Russian Federation № 2431638; 2011 (In Russ.)Альтшулер Е, Серебряная Д, Катруха А. Получение рекомбинантных антител и способы увеличения их аффинности. Успехи биологической химии. 2010;50:203–58.Altshuler E, Serebryanaya D, Katrukha A. Preparation of recombinant antibodies and ways to increase their affinity. Uspechi biologicheskoi khimii = Advances in biological Chemistry. 2010;50:203–58 (In Russ.)Мейл Д, Бростофф Дж, Рот ДБ, Ройт А. Иммунология. М.: Логосфера; 2007.Male D, Brostoff J, Rot DB, Roitt A. Immunology. Moscow: Logosfera; 2007 (In Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.