biopreparatБИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечениеBiological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment2221-996X2619-1156Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products10.30895/2221-996X-2020-20-4-277-284biopreparat-299Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESТеоретическое и экспериментальное обоснование перспективных методов экспертизы качества вакцины сибиреязвенной живойTheoretical and Experimental Substantiation of Alternative Methods for Quality Control of Live Anthrax Vaccinehttps://orcid.org/0000-0002-2002-0151КасинаИ. В.KasinaI. V.

Касина Ирина Владимировна, канд. биол. наук,

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Irina V. Kasina, Cand. Sci. (Biol.).

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051, Russian Federation

kasina@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5804-5709АлексееваС. А.AlekseevaS. A.

Алексеева Светлана Александровна, канд. биол. наук,

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Svetlana A. Alekseeva, Cand. Sci. (Biol.).

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051, Russian Federation

AlekseevaS@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0848-7306НемировскаяТ. И.NemirovskayaT. I.

Немировская Татьяна Ивановна, канд. мед. наук,

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Tatyana I. Nemirovskaya, Cand. Sci. (Med.).

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051, Russian Federation

Nemirovskaya@expmed.ruФедеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияScientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal ProductsRussian Federation202013112020204277284Copyright © Касина И.В., Алексеева С.А., Немировская Т.И., 20202020Касина И.В., Алексеева С.А., Немировская Т.И.Kasina I.V., Alekseeva S.A., Nemirovskaya T.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.biopreparations.ru/jour/article/view/299

Вакцинация против сибирской язвы проводится в соответствии с национальным Календарем профилактических прививок по эпидемическим показаниям. Для иммунизации людей применяется живая вакцина, представляющая собой лиофилизированную взвесь спор вакцинного штамма Вacillus anthracis СТИ-1 в стабилизирующей среде. Усовершенствование контроля качества иммунобиологических лекарственных препаратов посредством внедрения современных стандартных методов контроля является актуальной и неотъемлемой частью системы менеджмента качества. Цель работы: совершенствование экспертизы качества вакцины сибиреязвенной живой по показателю «Подлинность» и «Специфическая активность» (общая концентрация спор). Материалы и методы: испытание по показателям качества «Подлинность» и «Специфическая активность» (общая концентрация спор) проводили на образцах вакцины сибиреязвенной живой серии 266 производства ФГБУ «48 ЦНИИ» Минобороны России. Исследование иммунохроматографическим методом показателя качества вакцины «Подлинность» проводили с помощью набора реагентов иммунохроматографическая тест-система для экспресс-выявления и идентификации спор возбудителя сибирской язвы «ИХ тест-система B. anthracis» производства ФГБУ «ГНЦ ПМБ» Роспотребнадзора (г. Оболенск); контроль показателя качества вакцины «Специфическая активность» (общая концентрация спор) проводили визуальным и расчетным методами с применением камеры Горяева и отраслевого стандартного образца (ОСО) мутности бактериальных взвесей 10 МЕ — ОСО 42-28-85 (ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России); испытание по показателю качества «Специфическая активность» (количество живых спор) сибиреязвенной вакцины проводили микробиологическим методом (посевом на питательные среды). Статистическая обработка результатов была выполнена с помощью программы Microsoft Excel и Statistica 10.0. Результаты: теоретически обоснована и экспериментально доказана возможность применения иммунохроматографического метода как альтернативного для оценки показателя «Подлинность» вакцины сибиреязвенной живой. При проведении данного испытания препарат следует разводить до концентраций 108 и 109 м.к./мл. Разработана методика определения общей концентрации спор (показатель «Специфическая активность») вакцины сибиреязвенной живой с применением ОСО мутности бактериальных взвесей 10 МЕ. Предложена формула расчета общей концентрации спор в вакцине. Вывод: предложенные методики экспертизы качества вакцины сибиреязвенной живой могут быть рекомендованы для включения в нормативную документацию в качестве альтернативных.

Preventive immunisation against anthrax is carried out in accordance with the national Immunisation Schedule for Epidemic Settings. The vaccination is performed using a live vaccine—a freeze-dried suspension of Bacillus anthracis STI-1 vaccine strain spores in a stabilizing media. Improvement of the quality control of immunobiological medicines is a pressing issue and an integral part of the quality management system. The aim of study was to streamline quality control of live anthrax vaccine in terms of the following test parameters: identification and specific activity (total spore concentration). Materials and methods: identification and specific activity (total spore concentration) tests were performed for samples of live anthrax vaccine, batch 266, produced by the 48 Central Scientific Research Institute. The identification test was performed using the B. anthracis immunochromatography test kit for express detection and identification of anthrax pathogen spores produced by the State Research Center for Applied Microbiology and Biotechnology (Obolensk). The specific activity (total spore concentration) was assessed by the visual method and calculated in the Goryaev chamber using the industry reference standard of bacterial suspension turbidity equivalent to 10 IU—OSO 42-28-85 (by the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products). The number of live spores in live anthrax vaccine was determined by the microbiological method (by inoculating media). The statistical processing of the results was performed using Excel and Statistica 10.0. Results: the authors provided theoretical and experimental substantiation to support the feasibility of using immunochromatography as an alternative identification test method for live anthrax vaccine. Test samples dilutions of 108 microbial cells per millilitre and 109 microbial cells per millilitre are used in the test. The authors developed a test procedure for determination of the total spore concentration (specific activity) in live anthrax vaccine using an industry reference standard of turbidity equivalent to 10 IU, and proposed a formula for calculation of the total spore concentration. Conclusions: the developed test procedures could be recommended for inclusion in the live anthrax vaccine specification files as alternative methods of quality control. 

вакцина сибиреязвенная живаяВacillus anthracis СТИ-1подлинностьспецифическая активностьобщая концентрация спор Вacillus anthracis СТИ-1концентрация живых спорколониеобразующая единица (КОЕ)камера ГоряеваОСО мутности бактериальных взвесей 10 МЕlive anthrax vaccineBacillus anthracis STI-1identificationspecific activitytotal spore concentrationlive spore concentrationcolony-forming unit (CFU)Goryaev chamberindustry reference standard of bacterial suspension turbidity equivalent to 10 IUРабота выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России № 056-00003-20-00 на проведение прикладных научных исследований (номер государственного учета НИР AAAA-A18-118021590046-9). Выражаем благодарность главному технологу ИЦЭК МИБП ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России кандидату биологических наук Фадейкиной Ольге Васильевне за оказанную помощь в статистической обработке результатов.ReferencesМаринин ЛИ, Дятлов ИА, Шишкова НА, Герасимов ВН. Сибиреязвенные скотомогильники: проблемы и решения. М.: Династия; 2017.Marinin LI, Dyatlov IA, Shishkova NA, Gerasimov VN. Burial grounds of cattle that contain anthrax: problems and solution to them. Moscow: Dynastiya; 2017 (In Russ.)Ковальчук НА. Сибиреязвенные скотомогильники: актуальные проблемы. Известия Российской Военно-медицинской академии. 2019;1(S1):214–6.Kovalchuk NA. Siberian cattle burial grounds: actual problems. Izvestiya Rossiyskoy Voenno-meditsinskoy akademii = Izvestia of the Russian Military Medical Academy. 2019;1(S1):214–6 (In Russ.)Гаврилов ВА, Грязнева ТН, Селиверстов ВВ. Сибирская язва — вечная проблема землян. М.: ФГБОУ ВО МГАВМиБ — МВА им. К.И. Скрябина; 2017.Gavrilov VA, Gryazneva TN, Seliverstov VV. Anthrax — the eternal problem of earthlings. Moscow: Moscow SAVMB; 2017 (In Russ.)Попова АЮ, Ежлова ЕБ, Демина ЮВ, Куличенко АН, Рязанова АГ, Буравцева НП и др. Пути совершенствования эпидемиологического надзора и контроля за сибирской язвой в Российской Федерации. Проблемы особо опасных инфекций. 2017;(1):84–8. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2017-1-84-88Popova AYu, Ezhlova EB, Demina YuV, Kulichenko AN, Ryazanova AG, Buravtseva NP, et al. Ways to improve the epidemiological surveillance and control of anthrax in the Russian Federation. Problemy osobo opasnykh infektsiy = Problems of Particularly Dangerous Infections. 2017;(1):84–8 (In Russ.) https://doi.org/10.21055/0370-1069-2017-1-84-88Ланцов ЕВ, Кобылкин ДВ, Кузин АА, Азаров ИИ, Аминев РМ. Роль и организация работы военных специалистов профилактического профиля при ликвидации последствий биолого-социальной чрезвычайной ситуации (на примере ликвидации очага сибирской язвы в Ямало-Ненецком автономном округе в 2016 г.). Медицина катастроф. 2017;(4):38–42.Lantsov EV, Kobylkin DV, Kuzin AA, Azarov II, Aminev RM. Role and activity organization of military specialists of preventive measures line in liquidation of consequences of biological-social emergency situation (as exemplified by liquidation of anthrax focus in Yamalo-Nenets Autonomous okrug in 2016). Meditsina katastrof = Disaster Medicine. 2017;(4):38–42 (In Russ.)Супотницкий МВ. Биологическая война. Введение в эпидемиологию искусственных эпидемических процессов и биологических поражений. М.: Кафедра, Русская панорама; 2013.Supotnitskiy MV. Biological warfare. Introduction to the epidemiology of artificial epidemic processes and biological lesions. Moscow: Kafedra, Russkaya panorama; 2013 (In Russ.)Шевцов АН, Коротышев ОВ, Пермяков СА, Погорельский ИП. Вакцинопрофилактика сибирской язвы в Российской Федерации и ее ближайшие перспективы. Вестник войск РХБ защиты. 2019;3(4):337–49.Shevtsov AN, Korotyshev OV, Permyakov SA, Pogorelsky IP. Vaccinal prevention of anthrax in the Russian Federation and its immediate prospects. Vestnik voysk RKhB zashchity = Journal of NBC Protection Corps. 2019;3(4):337–49 (In Russ.)Волова ЛЮ. Организация вакцинопрофилактики против сибирской язвы в плановом порядке и по эпидемическим показаниям на территории Ямало-Ненецкого автономного округа. Журнал МедиАль. 2018;2:36–8.Volova LYu. Organization of vaccination against anthrax in a planned manner and for epidemic indications in YamaloNenets Autonomous district. Zhurnal MediAl’ = MediAl. 2018;2:36–8 (In Russ.)Саяпина ЛВ, Бондарев ВП, Олефир ЮВ. Современное состояние вакцинопрофилактики особо опасных инфекций. Проблемы особо опасных инфекций. 2016;2:107–10. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2016-2-107-110Sayapina LV, Bondarev VP, Olefir YuV. Current state of the vaccine prophylaxis of particularly dangerous infections. Problemy osobo opasnykh infektsiy = Problems of Particularly Dangerous Infections. 2016;2:107–10 (In Russ.) https://doi.org/10.21055/0370-1069-2016-2-107-110Мовсесянц АА, Миронов АН, Меркулов ВА, Борисевич ИВ. Цели и задачи Испытательного центра экспертизы качества иммунобиологических лекарственных препаратов. Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. 2012;1:7–9.Movsesyants AA, Mironov AN, Merkulov VA, Borisevich IV. Aims and objectives of the Testing center for quality expertise of medical immunobiological preparations. Vedomosti Nauchnogo tsentra ekspertizy sredstv meditsinskogo primeneniya = The Bulletin of the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products. 2012;1:7–9 (In Russ.)Мовсесянц АА, Бондарев ВП, Олефир ЮВ, Меркулов ВА, Шимчук ЛФ. Стандарты качества иммунобиологических лекарственных препаратов — новое в Государственной фармакопее Российской Федерации. Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. 2016;2:38–41.Movsesyants AA, Bondarev VP, Olefir YuV, Merkulov VA, Shimchuk LF. Quality standards of immunobiological medicinal products — new texts in the State Pharmacopoeia of the Russian Federation. Vedomosti Nauchnogo tsentra ekspertizy sredstv meditsinskogo primeneniya = The Bulletin of the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products. 2016;2:38–41 (In Russ.)Поздеев ОК. Медицинская микробиология. М.: ГЭОТАРМЕД; 2004.Pozdeev OK. Medical microbiology. Moscow: GEOTAR-MED; 2004 (In Russ.)Онищенко ГГ, Брагина ИВ, Ежлова ЕБ, Демина ЮВ, Пакскина НД, Шеенков НВ и др. Лабораторная диагностика опасных инфекционных болезней: Практическое руководство. М.: ЗАО «Шико», 2013.Onishchenko GG, Bragina IV, Eglova EB, Demina YuV, Pakskina ND, Sheenkov NV, et al. Laboratory diagnostics of dangerous infectious diseases. Practical guide. Moscow: ZAO “Shiko”; 2013 (In Russ.)Соловьев ПВ, Баранова ЕВ, Федюкина ГН. Разработка и опытно-экспериментальное производство иммунохроматографических тест-систем для выявления и идентификации B. anthracis, Y. pestis, F. tularensis и L. monocytogenes. В кн.: Материалы научно-практической конференции молодых ученых и специалистов научно-исследовательских учреждений Роспотребнадзора «Биологическая безопасность в современном мире». 21–22 апреля 2009 г. п. Оболенск. Протвино; 2009. С. 140–2.Soloviev PV, Baranova EV, Fedyukina GN. Development and experimental production of immunochromatographic test systems for the detection and identification of B. anthracis, Y. pestis, F. tularensis and L. monocytogenes. In: Proceedings of the scientific and practical conference of young scientists and specialists of research institutions of Rospotrebnadzor «Biological safety in the modern world». April 21–22, 2009, Obolensk. Protvino; 2009. P. 140–2 (In Russ.)Кравец ЕВ, Дугаржапова ЗФ, Родзиковский АВ, Хлынцева АЕ, Лунева НМ, Белова ЕВ и др. Применение методов латекс-агглютинации и иммунохроматографии для ускоренной идентификации культур Bacillus anthracis при эпидемиологических расследованиях вспышек. Проблемы особо опасных инфекций. 2011;1:81–2. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2011-1(107)-81-82Kravets EV, Dugarzhapova ZF, Rodzikovsky AV, Khlyntseva AE, Luneova NM, Belova EV, et al. Application of latex agglutination and immune chromatography methods for rapid identification of Bacillus anthracis cultures in the epidemiological investigation of outbreaks. Problemy osobo opasnykh infektsiy = Problems of Particularly Dangerous Infections. 2011;1:81–2 (In Russ.) https://doi.org/10.21055/0370-1069-2011-1(107)-81-82Егорова ИЮ, Селянинов ЮО, Ковалева ЕН. Оценка эффективности и практической пригодности современных методов экспресс-индикации возбудителя сибирской язвы. Russian Journal of Agricultural and Socio-Economic Sciences. 2016;2:3–13. https://doi.org/10.18551/rjoas.2016-02.01Egorova IY, Selyaninov YO, Kovaleva EN. Evaluation of effectiveness and feasibility of up-todate methods for anthrax rapid indication. Russian Journal of Agricultural and Socio-Economic Sciences. 2016;2:3–13 (In Russ.) https://doi.org/10.18551/rjoas.2016-02.01Фадейкина ОВ, Касина ИВ, Алексеева СА, Ковтун ВП, Бурдина ЕН, Ермолаева ТН и др. Применение отраслевого стандартного образца мутности бактериальных взвесей для определения общей концентрации микробных клеток в суспензиях сибиреязвенного, чумного и бруцеллезного микробов. Успехи современного естествознания. 2015;(1–8):1287–90.Fadeykina OV, Kasina IV, Alekseeva SA, Kovtun VP, Burdina EN, Ermolaeva TN, et al. Application of branch standard sample of bacterial suspension opacity for microbial cells total concentration determination in suspension of anthrax, plague and brucellosis bacteria. Uspekhi sovremennogo estestvoznaniya = Advances in Current Natural Sciences. 2015;(1–8):1287–90 (In Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.