biopreparatБИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечениеBiological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment2221-996X2619-1156Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products10.30895/2221-996X-2019-19-4-242-250biopreparat-252Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESРазработка ортотопической модели глиобластомы мыши с использованием клеточной линии GLi-261Development of a Mouse Glioblastoma Orthotopic Model Using the GLi-261 Cell Linehttps://orcid.org/0000-0003-0628-5513ОвсепянА. А.BorzovA. A.

Овсепян Армен Алексанович

ул. Владимирская, д. 14, пос. Вольгинский, Петушинский район, Владимирская область, 601125

Anton A. Borzov

14 Vladimirskaya St., Volginsky town, Petushinsky District, Vladimir Oblast 601125

lykov@ibcgenerium.ruhttps://orcid.org/0000-0002-9199-8464БорзовА. А.ОvsepyanA. A.

Борзов Антон Александрович

ул. Владимирская, д. 14, пос. Вольгинский, Петушинский район, Владимирская область, 601125

Armen A. Ovsepyan

14 Vladimirskaya St., Volginsky town, Petushinsky District, Vladimir Oblast 601125

lykov@ibcgenerium.ruhttps://orcid.org/0000-0003-3329-0182КаторкинаЕ. И.KatorkinaE. I.

Каторкина Елена Ивановна

ул. Владимирская, д. 14, пос. Вольгинский, Петушинский район, Владимирская область, 601125

Elena I. Katorkina

14 Vladimirskaya St., Volginsky town, Petushinsky District, Vladimir Oblast 601125

lykov@ibcgenerium.ruhttps://orcid.org/0000-0001-5457-3072АнисимоваЕ. О.AnisimovaE. O.

Анисимова Екатерина Олеговна, канд. вет. наук

ул. Владимирская, д. 14, пос. Вольгинский, Петушинский район, Владимирская область, 601125

Ekaterina O. Anisimova, Cand. Sci. (Vet.)

14 Vladimirskaya St., Volginsky town, Petushinsky District, Vladimir Oblast 601125

lykov@ibcgenerium.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5740-6664ЛыковМ. В.LykovM. V.

Лыков Максим Валерьевич, канд. мед. наук

ул. Владимирская, д. 14, пос. Вольгинский, Петушинский район, Владимирская область, 601125

Maksim V. Lykov, Cand. Sci. (Med.)

14 Vladimirskaya St., Volginsky town, Petushinsky District, Vladimir Oblast 601125

lykov@ibcgenerium.ruОбщество с ограниченной ответственностью «Международный биотехнологический центр «ГЕНЕРИУМ»РоссияInternational Biotechnology Center «GENERIUM»Russian Federation201928102019194242250Copyright © Овсепян А.А., Борзов А.А., Каторкина Е.И., Анисимова Е.О., Лыков М.В., 20192019Овсепян А.А., Борзов А.А., Каторкина Е.И., Анисимова Е.О., Лыков М.В.Borzov A.A., Оvsepyan A.A., Katorkina E.I., Anisimova E.O., Lykov M.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.biopreparations.ru/jour/article/view/252

Глиобластома — наиболее часто встречающийся и наиболее агрессивный тип опухолей головного мозга с почти 100 % смертностью пациентов в течение 5 лет. Для поиска новых эффективных подходов к лечению этого заболевания требуется разработка адекватных экспериментальных моделей. Цель работы: отработка и внедрение в практику ортотопической модели глиобластомы мышей. Материалы и методы: клетки глиомы мыши GLi-261 ортотопически, c использованием стереотаксического оборудования, инокулировали в область Putamen головного мозга мышей линии C57Bl/6. Динамика развития опухоли была исследована с помощью высокопольного магнитно-резонансного томографа Preclinical MRI System 7.0T/17cm (Flexiscan). В качестве «положительного» контроля при лечении экспериментальной глиобластомы использовали Темцитал® (темозоломид). Оценку неврологического статуса животных при протекании опухолевого процесса оценивали по результатам тестов. Результаты: отработана ортотопическая модель глиобластомы мыши, разработанная на основе клеточной линии GLi-261, с использованием стереотаксического оборудования для точной инокуляции опухолевых клеток, магнитно-резонансной томографии для неинвазивного определения объема и динамики развития опухоли, специальных тестов для определения неврологического статуса биологических тест-систем. С использованием данной модели показана эффективность темозоломида («золотой стандарт» лечения глиобластомы). Выводы: данная модель внедрена в практику ООО «МБЦ «ГЕНЕРИУМ» и может быть использована в качестве in vivo тест-системы для доклинической оценки эффективности разрабатываемых новых противоопухолевых препаратов, а также схем лечения онкологических заболеваний головного мозга при комплексной терапии.

Glioblastoma is the most common and most aggressive type of brain tumor, with an almost 100 % mortality rate over 5 years. The search for new effective approaches to the treatment of this disease requires the development of adequate experimental models. Objective: to develop and put into practice an orthotopic model of mouse glioblastoma. Materials and methods: GLi-261 mouse glioma cells were orthotopically inoculated into the putamen of C57Bl/6 mice brain. Tumor dynamics was investigated by Preclinical MRI System 7.0T/17cm (Flexiscan) highfield magnetic resonance imager (MR Solutions, UK). Temcital® (temozolomide) was used as a positive control in the treatment of experimental glioblastoma. The neurological status of animals in the course of tumour development was assessed by specific tests. Results: a GLi-261 cell-based mouse glioblastoma orthotopic model was developed using stereotactic equipment for accurate inoculation of tumour cells, magnetic resonance imaging for non-invasive determination of tumour volume and dynamics, and special tests for determination of the neurological status of the biological test systems. This model was used to demonstrate the effectiveness of temozolomide (the «gold standard» for glioblastoma treatment). Conclusions: this model has been introduced into practice at the IBC Generium, LLC, and can be used as an in vivo test system for preclinical evaluation of efficacy of new antitumour drugs being developed, as well as brain cancer treatment regimens using combination therapy.

глиобластомастереотаксисмагнитно-резонансная томографиятемозоломидортотопическая модельglioblastomastereotaxymagnetic resonance imagingtemozolomideorthotopic modelКоллектив авторов выражает благодарность компании ООО «Селлтера Фарм» и лично ее генеральному директору С.В. Ручко за любезно предоставленную возможность использования материалов МРТ-исследования.The authors express gratitude to «Selltera Farm», OOO and to Sergey Ruchko, General Director, in particular, for their kind permission to use MRI materials.ReferencesYi L, Zhou C, Wang B, Chen T, Xu M, Xu L, Feng H. Implantation of GL261 neurospheres into C57/BL6 mice: a more reliable syngeneic graft model for research on glioma-initiating cells. Int J Oncol. 2013;43(2):477–84. https://doi.org/10.3892/ijo.2013.1962Yi L, Zhou C, Wang B, Chen T, Xu M, Xu L, Feng H. Implantation of GL261 neurospheres into C57/BL6 mice: a more reliable syngeneic graft model for research on glioma-initiating cells. Int J Oncol. 2013;43(2):477–84. https://doi.org/10.3892/ijo.2013.1962Arias-Ramos N, Ferrer-Font L, Lope-Piedrafita S, Mocioiu V, Julià-Sapé M, Pumarola M, et al. Metabolomics of therapy response in preclinical glioblastoma: a multi-slice MRSI-based volumetric analysis for noninvasive assessment of temozolomide treatment. Metabolites. 2017;7(2). https://doi.org/10.3390/metabo7020020Arias-Ramos N, Ferrer-Font L, Lope-Piedrafita S, Mocioiu V, Julià-Sapé M, Pumarola M, et al. Metabolomics of therapy response in preclinical glioblastoma: a multi-slice MRSI-based volumetric analysis for noninvasive assessment of temozolomide treatment. Metabolites. 2017;7(2). https://doi.org/10.3390/metabo7020020Завьялов ЕЛ, Разумов ИА, Герлинская ЛА, Ромащенко АВ. In vivo МРТ-визуализация динамики развития глиобластомы U87 в модели ортотопической ксенотрансплантации мышам линии SCID. Вавиловский журнал генетики и селекции. 2015;19(4):460–5.Zavjalov EL, Razumov IA, Gerlinskaya LA, Romashchenko AV. In vivo MRI visualization of growth and morphology in the orthotopic xenotrasplantation U87 glioblastoma mouse SCID model. Vavilovskii Zhurnal Genetiki i Selektsii = Vavilov Journal of Genetics and Breeding. 2015;19(4):460–5.Hatzipetros T, Kidd JD, Moreno AJ, Thompson K, Gill A, Vieira FG. A quick phenotypic neurological scoring system for evaluating disease progression in the SOD1-G93A mouse model of ALS. J Vis Exp. 2015;(104):e53257. https://doi.org/10.3791/53257Hatzipetros T, Kidd JD, Moreno AJ, Thompson K, Gill A, Vieira FG. A quick phenotypic neurological scoring system for evaluating disease progression in the SOD1-G93A mouse model of ALS. J Vis Exp. 2015;(104):e53257. https://doi.org/10.3791/53257Shen W, Hu JA, Zheng JS. Mechanism of temozolomide-induced antitumor effects on glioma cells. J Int Med Res. 2014;42(1):164–72. https://doi.org/10.1177/0300060513501753Shen W, Hu JA, Zheng JS. Mechanism of temozolomide-induced antitumor effects on glioma cells. J Int Med Res. 2014;42(1):164–72. https://doi.org/10.1177/0300060513501753Guyenet SJ, Furrer SA, Damian VM, Baughan TD, La Spada AR, Garden GA. A simple composite phenotype scoring system for evaluating mouse models of cerebellar ataxia. J Vis Exp. 2010;(39):e1787. https://doi.org/10.3791/1787Guyenet SJ, Furrer SA, Damian VM, Baughan TD, La Spada AR, Garden GA. A simple composite phenotype scoring system for evaluating mouse models of cerebellar ataxia. J Vis Exp. 2010;(39):e1787. https://doi.org/10.3791/1787Aartsma-Rus A, van Putten M. Assessing functional performance in the Mdx mouse model. J Vis Exp. 2014;(85):e51303. https://doi.org/10.3791/51303Aartsma-Rus A, van Putten M. Assessing functional performance in the Mdx mouse model. J Vis Exp. 2014;(85):e51303. https://doi.org/10.3791/51303Брюховецкий ИС. Эффективность применения препарата стволовых клеток в эксперименте in vivo после курса химиотерапии на модели глиобластомы у крыс. Российский биотерапевтический журнал. 2014;13(4):51–7.Bryukhovetskiy IS. Efficiency of stem cell preparation in the experiment in vivo after a course of chemotherapy on the experimental model of glioblastoma in rats. Rossijskij bioterapevticheskij Zhurnal = Russian Journal of Biotherapy. 2014;13(4):51–7

The authors declare that there are no conflicts of interest present.