biopreparatБИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечениеBiological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment2221-996X2619-1156Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products10.30895/2221-996X-2019-19-3-161-168biopreparat-242Research ArticleОБЗОРЫREVIEWSСовершенствование методики оценки качества питательной среды для выявления микоплазмWays to Improve Quality Control of Culture Medium Used for Mycoplasma Detectionhttps://orcid.org/0000-0001-6621-4384СухановаС. М.SukhanovaS. M.

Суханова Светлана Михайловна, канд. биол. наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Svetlana M. Sukhanova, Cand. Sci. (Biol.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

suhanovasm@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0002-9865-4250БердниковаЗ. Е.BerdnikovaZ. E.

Бердникова Зинаида Евтропиевна, канд. биол. наук

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Zinaida E. Berdnikova, Cand. Sci. (Biol.)

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

berdnikova@expmed.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7281-1249ТихоноваА. С.TikhonovaA. S.

Тихонова Александра Сергеевна

Петровский б-р, д. 8, стр. 2, Москва, 127051

Aleksandra S. Tikhonova

8/2 Petrovsky Blvd, Moscow 127051

alehina@expmed.ruФедеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияScientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal ProductsRussian Federation201911092019193161168Copyright © Суханова С.М., Бердникова З.Е., Тихонова А.С., 20192019Суханова С.М., Бердникова З.Е., Тихонова А.С.Sukhanova S.M., Berdnikova Z.E., Tikhonova A.S.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.biopreparations.ru/jour/article/view/242

Актуальной проблемой безопасности биологических лекарственных препаратов (БЛП) остается контаминация микоплазмами, источниками которой могут быть ткани и органы доноров, вирусные сборы, компоненты питательных сред, трипсин, сыворотки крови животных, а также персонал, занимающийся изготовлением медицинских препаратов. В настоящее время в связи с расширением спектра выпускаемых БЛП возрастает необходимость повышения чувствительности и специфичности методик их анализа. В Российской Федерации оценку качества готовой формы препарата на присутствие микоплазм микробиологическим (культуральным) методом проводят с использованием сложных питательных сред, чувствительность которых зависит от качества используемого белкового сырья, ингредиентов и реактивов. Ростовые свойства сред, согласно требованиям Государственной фармакопеи Российской Федерации XIV изд., определяют с помощью одного тест-штамма — Mycoplasma arginini G230 (ОСО M. arginini G230). Цель работы — анализ современных отечественных и зарубежных требований к оценке качества питательной среды, используемой в испытании на присутствие микоплазм, для актуализации и совершенствования методики ее оценки в Российской Федерации. Установлено, что безусловным преимуществом рекомендаций отечественной фармакопеи является возможность применения полужидкой питательной среды, не требующей создания специальных аэробных или анаэробных условий инкубации, позволяющей определять количество колоний и титр микоплазм в испытуемом материале при подтверждении ее ростовых свойств с помощью ОСО тест-штамма М. arginini G230. Выявленные в ходе анализа отличия отечественных и зарубежных требований к оценке качества питательной среды позволили разработать предложения по совершенствованию отечественной методики, заключающиеся в расширении спектра используемых тест-штаммов и создании соответствующих стандартных образцов.

An urgent safety concern associated with biological products is contamination with mycoplasmas, which may originate from donor tissues and organs, virus harvests, culture medium components, trypsin, animal blood serum, as well as be transmitted by personnel involved in the manufacture of medicines. Currently, due to an increase in the range of biologicals available, there is a need for more sensitive and specific test methods. In the Russian practice, microbiological (culture-based) testing of finished pharmaceutical products for mycoplasma contamination is performed using complex culture media whose sensitivity depends on the quality of proteins, ingredients, and reagents used. Growth promotion properties of the media are determined according to the State Pharmacopoeia of the Russian Federation, 14th ed., using a single test strain — Mycoplasma arginini G230 (M. arginini G230 industry reference material). The aim of the study was to analyse current Russian and foreign requirements for the quality control of culture media that are used for mycoplasma detection, in order to update and improve the quality control procedure in Russia. It was demonstrated that a compelling advantage of the State Pharmacopoeia of the Russian Federation is the possibility of using a semi-liquid culture medium which does not require special aerobic or anaerobic incubation conditions and allows for quantification of mycoplasma colonies and determination of mycoplasma titre in culture medium while testing its growth promotion properties using reference М. arginini G230 test strain. The analysis revealed some differences in Russian and foreign requirements for quality evaluation of culture media. These differences were taken into account when developing recommendations for improvement of the Russian test procedure, i.e. enlarging the range of test strains used and development of respective reference standards.

биологические лекарственные препаратыконтаминация микоплазмамибезопасностьотраслевой стандартный образецоценка чувствительности питательной средыэкспертиза качестваMycoplasmaAcholeplasmabiological productsmycoplasma contaminationsafetyindustry reference materialassessment of culture medium sensitivityquality controlРабота выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России № 056-00154-19-00 на проведение прикладных научных исследований (номер государственного учета НИР AAAA-A18-118021590046-9).The study reported in this publication was carried out as part of a publicly funded research project No. 056-00154-19-00 and was supported by the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products (R&D public accounting No. AAAA-A18-118021590046-9).ReferencesПрозоровский СВ, Раковская ИВ, Вульфович ЮВ. Медицинская микоплазмология. М.: Медицина; 1995.Prozorovskiy SV, Rakovskaya IV, Vul’fovich YuV. Medical mycoplasmology. Moscow: Meditsina; 1995 (In Russ.)McGarrity GJ, Kotani H, Butler GH. Mycoplasmas and tissue culture cells. In: Maniloff J, McElhaney RN, Finch LR, Baseman JB, eds. Mycoplasmas: molecular biology and pathogenesis. Washington DC: American Society for Microbiology; 1992. P. 445–54.McGarrity GJ, Kotani H, Butler GH. Mycoplasmas and tissue culture cells. In: Maniloff J, McElhaney RN, Finch LR, Baseman JB, eds. Mycoplasmas: molecular biology and pathogenesis. Washington DC: American Society for Microbiology; 1992. P. 445–54.Чернов ВМ, Чернова ОА, Санчес-Вега ХТ, Колпаков АИ, Ильинская ОН. Микоплазменные контаминации клеточных культур: везикулярный трафик у бактерий и проблема контроля инфектогенов. Acta Naturae. 2014;6(3):43–54.Chernov VM, Chernova OA, SanchezVega JT, Kolpakov АI, Ilinskaya ОN. Mycoplasma contamination of cell cultures: vesicular traffic in bacteria and control over infectious agents. Acta Naturae. 2014;6(3):43–54 (In Russ.)Olarerin-George AO, Hogenesch JB. Assessing the prevalence of mycoplasma contamination in cell culture via a survey of NCBI’s RNA-seq archive. Nucleic Acids Res. 2015;43(5):2535–42. https://doi.org/10.1093/nar/gkv136Olarerin-George AO, Hogenesch JB. Assessing the prevalence of mycoplasma contamination in cell culture via a survey of NCBI’s RNA-seq archive. Nucleic Acids Res. 2015;43(5):2535–42. https://doi.org/10.1093/nar/gkv136Мовсесянц АА, Бондарев ВП, Олефир ЮВ, Меркулов ВА, Шимчук ЛФ. Стандарты качества иммунобиологических лекарственных препаратов — новое в Государственной фармакопее Российской Федерации. Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. 2016;(2):38–41.Movsesyants AA, Bondarev VP, Olefir YuV, Merkulov VA, Shimchuk LF. Quality standards for immunobiological medicinal products — new texts in the State Pharmacopoeia of the Russian Federation. Vedomosti Nauchnogo tsentra ekspertizy sredstv meditsinskogo primeneniya = Тhе Bulletin of the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products. 2016;(2):38–41 (In Russ.)Савичева АМ, Шипицына ЕВ, Башмакова МА. Генитальные микоплазмы — проблемы диагностики и лечения. Клиническая дерматология и венерология. 2008;(6):80– 90.Savicheva AM, Shipitsyna EV, Bashmakova MA. Genital Mycoplasmas are the problems of diagnosis and treatment. Klinicheskaya dermatologiya i venerologiya = Russian Journal of Clinical Dermatology and Venereology. 2008;(6):80–9 (In Russ.)Потатуркина-Нестерова НИ, Немова ИС, Магомедова АМ, Нестеров АС. Патогенный потенциал микоплазм, эпидемиологически ассоциированных с воспалительными заболеваниями урогенитального тракта. Фундаментальные исследования. 2012;(1):89–92.PotaturkinaNesterova NI, Nemova IS, Magomedova AM, Nesterov AS. Pathogenic mycoplasma potential epidemiologically associated with inflammatory diseases of urinogenital tract. Fundamental’nye issledovaniya = Fundamental research. 2012;(1):89–92 (In Russ.)Подчерняева РЯ, Урываев ЛВ, Дедова АВ, Дедова ЛВ, Ионова КС, Михайлова ГР и др. Определение микоплазм и вируса бычьей диареи в коллекционных клеточных линиях. Клеточные культуры. Информационный бюллетень. 2011;27:80–8.Podchernyaeva RYa, Uryvaev LV, Dedova AV, Dedova LV, Ionova KS, Mikhaylova GR, et al. Determination of mycoplasmas and bovine diarrhea virus in collection cell lines. Kletochnye kul’tury. Informatsionnyy byulleten’ = Cell Culture. News Bulletin. 2011;27:80–8 (In Russ.)Сухинин АА, Макавчик СА, Кузьмин ВА, Фогель ЛС, Орехов ДА, Карпенко ЛЮ, Кан ФЛ. Методические рекомендации по профилактике и ликвидации микоплазмозов сельскохозяйственных животных, в том числе птиц. СПб: ФГБОУ ВО СПбГАВМ; 2017.Sukhinin AA, Makavchik SA, Kuz’min VA, Fogel’ LS, Orekhov DA, Karpenko LYu, Kan FL. Guidelines for the prevention and elimination of mycoplasmosis of farm animals, including birds. St. Petersburg: FGBOU VO SPbGAVM; 2017 (In Russ.)Колокольцова ТД, Сабурина ИН. Патологические аспекты микоплазменной контаминации клеточных культур. Патогенез. 2013;11(3):29–31.Kolokoltsova TD, Saburina IN. Pathologic aspects of mycoplasma contamination of cell cultures. Patogenez = Pathogenesis. 2013;11(3):29–31 (In Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.